出生缺陷细胞库及其构建方法技术

本发明专利技术涉及用于医学领域的出生缺陷细胞库及其构建方法，其主要特征是以ＢａｍＨ?Ｉ、ＳＶ４０?ＤＮＡ、Ｔ４?ＤＮＡ连接酶和基因载体ｐｃＤＮＡ３．１构建ＳＶ４０Ｔ／ｐｃＤＮＡ３．１重组子，经感受态大肠杆菌扩增、纯化后，以脂质体转染法将重组子导入经０．０１％胶原酶ＩＩ消化的离体悬液状出生缺陷细胞或在含２０％胎牛血清、５～１０ｎｍｏｌ／Ｌ胰岛素的培养液中处于将进入或刚进入对数生长期、梭形细胞占９０％以上、汇合率达５５％～６５％的贴壁生长状出生缺陷细胞，并与之ＤＮＡ整合，以Ｇ４１８筛选的含阳性重组子的细胞和ＥＢ病毒转染的细胞作传代、扩增培养，构建出生缺陷细胞系并冻存于液氮中，以出生缺陷（Ｂｉｒｔｈ?Ｄｅｆｅｃｔ）及其病种的第一个英文字母命名并标明相关资料信息，用以集中保存出生缺陷的活细胞资源，解决其科研材料贫乏和无专一出生缺陷细胞库的问题。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种用于医学领域的出生缺陷细胞库及其构建方法，其主要特征是以ＢａｍＨ　Ｉ、ＳＶ４０ＤＮＡ、Ｔ４　ＤＮＡ连接酶和基因载体ｐｃＤＮＡ３．１构建ＳＶ４０Ｔ／ｐｃＤＮＡ３．１重组子，经感受态大肠杆菌扩增、纯化，以脂质体转染法导入，ＳＶ４０感染出生缺陷组织细胞，并与之ＤＮＡ整合，以Ｇ４１８筛选的含阳性重组子的细胞和ＥＢ病毒转染的细胞作传代、扩增培养，构建出生缺陷细胞系并冻存于液氮中，以集中保存出生缺陷活细胞资源，解决其科研材料贫乏和无专一出生缺陷细胞库的问题。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：翁炳焕，
申请(专利权)人：翁炳焕，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]