一种多聚磷酸激酶突变体及其在制备胞二磷胆碱中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种多聚磷酸激酶突变体及其在制备胞二磷胆碱中的应用，属于生物技术领域。本发明专利技术筛选获得了一种野生型多聚磷酸激酶，可在大肠杆菌中高效表达，通过对其定点突变改造，又获得了活性显著提高的多聚磷酸激酶突变体，能够实现CTP的高效率再生并降低生物催化成本。该突变体酶的最适pH为7.5，最适酶活温度为70℃，对70

【技术实现步骤摘要】
一种多聚磷酸激酶突变体及其在制备胞二磷胆碱中的应用


[0001]本专利技术涉及分子生物学和酶工程领域，具体涉及一种多聚磷酸激酶突变体及其应用。

技术介绍

[0002]多聚磷酸激酶(Polyphosphate kinase，PPK)可以催化核苷三磷酸NTP（ATP/CTP/GTP/UTP）转化为多聚磷酸（PolyP），且该反应为可逆反应，因此它也可以以PolyP作为磷酸供体催化NDP/NMP转化为NDP/NTP，以实现能量的循环(Green Chem,2021,23,828
‑
837)。根据PPK的结构，PPK主要被分为三类：以PolyP和NDP为底物催化合成NTP的PPK1和PPK2，以PolyP和NMP为底物催化合成NTP的PPK3。
[0003]目前关于PPK的研究报道大部分集中以聚磷酸为磷酸供体将AMP转化为ADP或者ATP，而以聚磷酸为磷酸供体将CMP转化为CDP或CTP的研究较少。因此，开发一类新型多聚磷酸激酶，能够利用廉价PolyP原料直接将CMP转化为CDP或CTP具有广泛的应用前景。
[0004本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多聚磷酸激酶突变体，其氨基酸序列为SEQ ID NO:1。2.编码如权利要求1所述多聚磷酸激酶突变体的基因。3.如权利要求2所述的基因，其特征在于，核苷酸序列为SEQ ID NO:2。4.包含如权利要求3所述基因的表达载体。5.转化了如权利要求4所述表达载体的微生物。6.如权利要求5所述的微生物，其特征在于，所述微生物是大肠杆菌BL21(DE3)。7.如权利要求l所述多聚磷酸激酶突变体或者如权利要求6所述微生物在催化制备胞二磷胆碱中的用途。8.如权利要求7所述的用途，其特征在于，以胞苷酸CMP、聚磷酸PolyP和磷酸胆碱为底物，使用磷酸胆碱胞苷转移酶作为生...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈圣，章志林，
申请(专利权)人：苏州酶泰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：