兼具腺苷激酶和腺苷酸激酶活性的耐热蛋白及基因与应用制造技术

本发明专利技术公开了兼具腺苷激酶和腺苷酸激酶活性的耐热蛋白及基因与应用，涉及生物工程领域，兼具腺苷激酶和腺苷酸激酶活性的耐热蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；兼具腺苷激酶和腺苷酸激酶活性的耐热蛋白基因的碱基序列如SEQ ID NO.2所示；ATP制备方法，包括TTAk酶活化提纯、ACEK酶活化提纯、物料混合、酶添加、和恒温水浴。本发明专利技术的优点在于：通过基因工程技术，构建了含有耐热蛋白基因的重组质粒，并实现了耐热蛋白的高效表达，构建的耐热蛋白与现有腺苷激酶或者腺苷酸激酶相比，本发明专利技术的耐热蛋白兼具腺苷激酶和腺苷酸激酶活性，利用本发明专利技术提供的耐热蛋白在ATP的催化生产中减少了催化用酶种类，简化了催化工艺过程。简化了催化工艺过程。简化了催化工艺过程。

【技术实现步骤摘要】
兼具腺苷激酶和腺苷酸激酶活性的耐热蛋白及基因与应用


[0001]本专利技术涉及生物工程领域，具体是涉及兼具腺苷激酶和腺苷酸激酶活性的耐热蛋白及基因与应用。

技术介绍

[0002]三磷酸腺苷(ATP)分子量507，是由一个腺苷基团和3个磷酸基团组成，分子式是C10H16N5013P3。它在生物体内能量代谢中起重要作用，是生物体内的能量储存器，并作为体内高能磷酸键的供体参与生物体内各种化学物质、蛋白质、核酸等的代谢。在临床应用上，ATP作用广泛，对进行性肌肉萎缩、中风后遗症、心肌梗塞、心肌炎、冠状动脉硬化、肝炎等病症具有良好的治疗和辅助治疗作用。
[0003]ATP的合成主要有化学合成法、生物酶催化法以及细胞催化等方法。其中，化学合成法污染严重；细胞催化法是以腺苷(A)或者腺苷酸(AMP)，经酵母细胞酶系催化合成ATP的反应过程复杂，反应过程中添加大量酵母细胞，引入了大量的细胞杂质给ATP后期纯化带来很多困难。目前，主要采用的是生物酶催化法，以腺苷为底物，分别添加腺苷激酶、腺苷酸激酶和多聚磷酸酶，酶种类多，反应控制复杂，不利于ATP的大规模本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种兼具腺苷激酶和腺苷酸激酶活性的耐热蛋白，其特征在于，所述兼具腺苷激酶和腺苷酸激酶活性的耐热蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.一种兼具腺苷激酶和腺苷酸激酶活性的耐热蛋白基因，其特征在于，编码权利要求1所述的兼具腺苷激酶和腺苷酸激酶活性的耐热蛋白。3.根据权利要求2所述的一种兼具腺苷激酶和腺苷酸激酶活性的耐热蛋白基因，其特征在于，所述兼具腺苷激酶和腺苷酸激酶活性的耐热蛋白基因的碱基序列如SEQ ID NO.2所示。4.一种耐热蛋白基因重组载体，其特征在于，包含如权利要求2
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3任一项所述的兼具腺苷激酶和腺苷酸激酶活性的耐热蛋白基因。5.根据权利要求4所述的一种耐热蛋白基因重组载体，其特征在于，所述耐热蛋白基因重组载体为包含如权利要求2
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3任一项所述的兼具腺苷激酶和腺苷酸激酶活性的耐热蛋白基因的重组质粒pET
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22b。6.一种耐热蛋白基因重组菌种，其特征在于，所述耐热蛋白基因重组菌种包含如权利要求2
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3任一项所述的兼具腺苷激酶和腺苷酸激酶活性的耐热蛋白基因。7.根据权利要求6所述的一种耐热蛋白基因重组菌种，其特征在于，所述耐热蛋白基因重组菌种为包含权利要求2
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3任一项所述的兼具腺苷激酶和腺苷酸激酶活性的耐热蛋白基因的重组表达基因工程菌E.coli BL21
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pET
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22b
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TTAk。8.一种耐热蛋白的制备方法，用于制备如权利要求1所述的兼具腺苷激酶和腺苷酸激酶活性的耐热蛋白，其特征在于，包括如下步骤：重组菌株获取：根据耐热蛋白编码基因针对大肠杆菌做密码子优化，将优化后的DNA序列合成并重组到表达载体pET
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22b(含酶切位点BamH I、Hind III)上，...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈圣，章志林，
申请(专利权)人：苏州酶泰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：