重组型DNA聚合酶及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种重组型DNA聚合酶，从N端到C端依次连接Pfu DNA聚合酶蛋白和Sso7d蛋白，所述Pfu DNA聚合酶蛋白和所述Sso7d蛋白之间直接连接或者通过蛋白连接肽连接，所述蛋白连接肽的氨基酸序列选自SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8及SEQ ID NO:9中的任意一种。本发明专利技术还公开了基于所述重组型DNA聚合酶的核酸分子、表达载体、宿主细胞、制备方法、核酸的扩增方法和试剂盒。核酸的扩增方法和试剂盒。核酸的扩增方法和试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
重组型DNA聚合酶及其应用


[0001]本专利技术涉及基因工程
，具体涉及一种重组型DNA聚合酶及其应用。

技术介绍

[0002]聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术被广泛地应用于DNA分子扩增技术中，其中DNA聚合酶作为PCR中的关键组分对DNA的复制起着至关重要的作用。
[0003]重组型高保真DNA聚合酶是一种校对DNA聚合酶，具有续进增强域和通用引物退火特性，在保持优良的保真性的同时，扩增量和延伸性也有显著提升。该聚合酶适用于准确性高的应用(如克隆、测序、定点突变)，可具有5
′→3′
DNA聚合酶活性、3
′→5′
外切酶活性。
[0004]目前，国内外关于高保真DNA聚合酶的研究及应用还在不断地推进，大量的专家学者探索了聚合酶的自身连接方式乃至整体结构域，深入分析了DNA聚合酶活性域、外切酶校对活性域和续进增强域的组成，并在此基础上引入新的延伸因子等。然而，通常的高保真DNA聚合酶碱基延伸速度与扩增片段的长度低于普通的Taq DNA聚合本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.重组型DNA聚合酶，其特征在于，从N端到C端依次连接Pfu DNA聚合酶蛋白和Sso7d蛋白，所述Pfu DNA聚合酶蛋白和所述Sso7d蛋白之间直接连接或者通过蛋白连接肽连接，所述蛋白连接肽的氨基酸序列选自SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8及SEQ ID NO:9中的任意一种。2.根据权利要求1所述的重组型DNA聚合酶，其特征在于，所述Sso7d蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO:10。3.根据权利要求1或2所述的重组型DNA聚合酶，其特征在于，所述Pfu DNA聚合酶蛋白的氨基酸序列为S...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖晓文，李妍，曹文刚，王文朋，李刚，东昱汝，
申请(专利权)人：北京擎科生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：