一种TaqDNA聚合酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种TaqDNA聚合酶突变体及其应用。所述TaqDNA聚合酶突变体在氨基酸序列SEQ ID NO.1的基础上发生如下突变：E9K、L15S、D18R、H20E、H21E、K31E和R37D等。本发明专利技术通过点诱变获得TaqDNA聚合酶突变体，与野生型TaqDNA聚合酶不同，具备高效、稳定的逆转录酶活性，能够以RNA底物为高效转化cDNA，并在标准反应条件下扩增该cDNA，无需额外添加逆转录酶，能够显著提高通过实时荧光定量PCR检测目标核糖核酸(RNA)的效率。酸(RNA)的效率。酸(RNA)的效率。

【技术实现步骤摘要】
一种Taq DNA聚合酶突变体及其应用
[0001]本申请是申请号为202210764015.X专利申请的分案申请(原申请的申请日为2022年06月29日，专利技术名称为一种Taq DNA聚合酶突变体及其应用)。


[0002]本专利技术属于基因工程
，涉及一种Taq DNA聚合酶突变体及其应用。

技术介绍

[0003]实时RT
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PCR是一种用于检测样品中RNA的方法，通过在qPCR反应中产生扩增子时检测随时间增加的荧光信号。目前，RT
‑
PCR最广为人知的应用是在诊断实验室检测期间检测患者样本中的病毒遗传物质，例如SARS
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CoV2(COVID
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19)的存在。RT
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PCR是用于分子生物学、医学和法医学研究的RNA靶标的检测标准。
[0004]Taq DNA聚合酶通常在分子生物学中用于在聚合酶链式反应(PCR)中扩展核酸扩增子。在PCR中，指定的DNA片段(扩增子)通过三个步骤的重复循环进行扩增：变性、退火和扩增子的延伸/扩展。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种Taq DNA聚合酶突变体，其特征在于，所述Taq DNA聚合酶突变体在氨基酸序列SEQ ID NO.1的基础上发生L156S突变。2.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子含有编码权利要求1所述的Taq DNA聚合酶突变体的核酸序列。3.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体含有权利要求2所述的核酸分子；优选地，所述表达载体包括质粒载体或病毒载体。4.一种重组细胞，其特征在于，所述重组细胞含有权利要求2所述的核酸分子或权利要求3所述的表达载体。5.权利要求1所述的Taq DNA聚合酶突变体在制备逆转录反应试剂中的应用。6.一种逆转录试剂盒，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱振宇，孙大鹏，
申请(专利权)人：武汉爱博泰克生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：