一种帕格甾醇Ａ和帕格甾醇Ｂ的合成方法，合成路线如下： ＊＊＊ 其中， 步骤（ａ）：式（１）所示猪去氧胆酸经甲酯化、对甲苯磺酸酯化、Ｓ↓［Ｎ］２亲核取代－Ｅ１消除反应三步一锅得式（２）所示△↑［５］－３β－羟基胆烷酸甲酯； 步骤（ｂ）：在有机溶剂中，式（２）所示△↑［５］－３β－羟基胆烷酸甲酯先在臭氧作用下氧化开环，再在还原剂作用下转变成式（３）所示５，６－断－３β－羟基－５－酮－６－醛基胆烷酸甲酯； 步骤（ｃ）：在有机溶剂中，式（３）所示５，６－ 断－３β－羟基－５－酮－６－醛基胆烷酸甲酯与中性氧化铝反应，经过分子内醇醛缩合，转变成式（４）所示Ｂ－失碳－３β，５β－二羟基－６β－甲醛基胆烷酸甲酯； 步骤（ｄ）：在有机溶剂中，式（４）所示Ｂ－失碳－３β，５β－二羟基－６β－甲醛基 胆烷酸甲酯在酸性催化剂、脱水剂作用下，转变成式（５）所示Ｂ－失碳－３β，５β－二羟基－６β－二甲氧基甲基胆烷酸甲酯； 步骤（ｅ）：在有机溶剂中，式（５）所示Ｂ－失碳－３β，５β－二羟基－６β－二甲氧基甲基胆烷酸甲酯，在咪唑、叔丁基二甲 基氯硅烷的作用下，经硅基化得式（６）所示Ｂ－失碳－３β－叔丁基二甲基硅氧基－５β－羟基－６β－二甲氧基甲基胆烷酸甲酯；步骤（ｆ）：在有机溶剂中，式（６）所示Ｂ－失碳－３β－叔丁基二甲基硅氧基－５β－羟基－６β－二甲氧基甲基胆烷酸甲酯与异丙基溴化镁和胺络合剂混合溶液作用下，经异丙基化得式（７）所示Ｂ－失碳－３β－叔丁基二甲基硅氧基－５β－羟基－６β－二甲氧基甲基胆甾－２４－酮； 步骤（ｇ）：在有机溶剂中，式（７）所示Ｂ－失碳－３β－叔丁基二甲基硅氧基－５β－羟基－６β－二 甲氧基甲基胆甾－２４－酮经Ｌｏｍｂａｒｄｏ’ｓ试剂作用，得式（８）所示Ｂ－失碳－２４－高－△↑［２４（２８）］－３β－叔丁基二甲基硅氧基－５β－羟基－６β－二甲氧基甲基胆甾烷；或者在有机溶剂中，式（７）所示Ｂ－失碳－３β－叔丁基二甲基硅氧基－５β－羟基－６β－二甲氧基甲基胆甾－２４－酮，与Ｗｉｔｔｉｇ试剂反应在碱作用下得式（８）所示Ｂ－失碳－２４－高－△↑［２４（２８）］－３β－叔丁基二甲基硅氧基－５β－羟基－６β－二甲氧基甲基胆甾烷； 步骤（ｈ）：在丙酮－水溶剂中，式 （８）所示Ｂ－失碳－２４－高－△↑［２４（２８）］－３β－叔丁基二甲基硅氧基－５β－羟基－６β－二甲氧基甲基胆甾烷经有机酸催化，脱去保护基后得式（９）所示帕格甾醇Ｂ； 步骤（ｉ）：在有机溶剂中，式（９）所示帕格甾醇Ｂ在碱的作用下，经分 子内脱水得式（１０）所示帕格甾醇Ａ。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及高效合成抗结核杆菌化合物帕格甾醇A和帕格留醇B的方法， 具体地说，是一种从猪去氧胆酸高效合成帕格甾醇A和帕格甾醇B的方法。
技术介绍
天然产物是一直是结构多样性和高生物活性化合物的不竭源泉。在寻找新 的抗结核杆菌化合物的过程中，两个具有新颖结构的结核杆菌抑制剂一帕格甾 醇A和B引起我们的关注。2007年Xiamei Wei报道以抗结核杆菌活性为导向，从 50Kg加勒比海波多黎各岛(Puerto Rico)的拉帕格尔拉海湾(La Parguera)海绵体 OSW"zm ze一的甲醇一氯仿提取液中，分离纯化得到3.5mg帕格甾醇 A(Parguesterol A， 0.007% yieW)和4.5mg帕格甾醇B (Parguesterol B， 0.009% yield),经2D NMR、 IR、 UV和MS波谱分析，确定其结构分别为B-失碳-24-高 一A柳,24,-6P一 甲 醛 基 _3|3- 羟 基 胆 甾 烷 (B-nor-24-homo-A5(6)，24(2S-6P-formyl-3p-hydroxylcholestane)和B-失碳-24-高 -△24(28)-6P-甲醛基二羟基胆甾烷(B-n0r-24-h0m0-A24(28)-6|3-formyl-3p,5p:dihydroxylcholestane)。由于它们来源于波多黎各岛(Puerto Rico)的拉帕格 尔拉海湾(La Parguera)的海绵体(Sve"zea zed)中，命名为帕格甾醇A和B (Parguesterol A and B)。帕格甾醇A和帕格甾醇B是具有罕见5(6—7)abeo-AB环的全新结构甾体化 合物。独特的结构决定其独特的生物学活性，帕格甾醇A和帕格甾醇B对结核 杆菌具有抑制作用，其最小抑制浓度MIC分别为7.8ug/ml和11.2ug/ml (Xiamei Wei; Abimael D. Rodriguez; Yuehong Wang. Novel ring B abeo-sterols as growth inhibitors of聊co6"c/eh画/wZ^cw/oy/>s isolated from a Caribbean Sea sponge, Sve認az柳'.refra/zecf醒丄成2007, 48, 8851-8854.)。Parguesterol A Parguesterol BFig. 1帕格甾醇A和帕格甾醇B的结构由于帕格甾醇在天然海绵中含量极微，不可能通过提取大量获得，不能得 到足够量的样品来进行抗结核杆菌体内活性实验和新药研究。迄今为止，帕格甾醇A和帕格甾醇B的合成未见报道。帕格甾醇A和帕格甾醇B罕见的化学结 构和抗结核杆菌特性，引起我们的研究兴趣。我们的研究目标是建立帕格甾醇A 和帕格甾醇B的原子经济的、高效的合成方法，为合成不同侧链的帕格甾醇类 似物提供方法学和物质基础，建立帕格甾醇的构效关系，最终研发出具有新颖 的5(6—7)abeo—AB环甾体结构的抗结核病新药。具有5(6—7)abeo—AB环甾体结构的化合物在自然界中极为罕见。文献中仅 有几例报道。1998年，Lin首次从台湾杉(Taiwaniacryptomerioides)叶中提取分离 得到4个具有5(6—7)abeo—AB环甾体结构的新化合物一台湾甾醇A—D(见Fig. 2) (Taiwaniasterols A-D)，其生物活性和合成未见报道(Lin W.; Fang, J.; Cheng， Y. /^ytoc^m〖sf^;. 1998,48,1391—1398.) 。 2001年Miyamoto从2.0kg日本福冈县 奥鲁海湾海绵OSte〃^to 的丙酮提取液中分离得到3.6mg又一个具有 5(6—7)abeo—AB环甾体结构的奥鲁甾醇(见Fig,2) (Orostanal， 1.8x10—4% yield), 具有诱导人急性前髓白细胞(H L-60)凋亡的活性(Tomoftimi Miyamoto; Ryuichi Higuchi. Orostanal, a novel abeo-sterol inducing apoptosis in leukemia cell from a marine sponge, Stelletta hiwasaensis. re/ra^^/rw2丄e".， 2001, 42， 6349-6351.) 。 2002 年刘波报道了奥鲁甾醇的合成(Bo Liu， Wei-Shan Zhou. The first stereoselective synthesis of orostanal, a novel abeo-sterol inducing apoptosis in leukemia cells. Tetrahedron Letters, 2002,43， 4187—4189)。Taiwaniasterol D OrostanalFig. 2. 5(6—7)abeo—AB环甾体结构化合物5(6—7)abeo—AB环甾体结构的构建是合成的关键之一 。 2001年Miyamoto报道以胆固醇为原料，通过臭氧化反应和醇醛縮合反应构 建5(6—7)abeo—AB环甾体结构。其方法是胆固醇在一78。C下，经臭氧化A^ 双键开环得到5,6-断-3p-羟基-5-酮-6-醛胆固醇，然后在LDA作用下，进行分子 内醇醛縮合得具有5(6—7)abeo—AB环甾体结构的化合物KPN-2001,两步反应 的收率为 32.9% (Tomofumi Miyamoto; Ryuichi Higuchi. Orostanal,a novel abeo-sterol inducing apoptosis in leukemia cell from a marine sponge, Stelletta hiwasaensis. r欲a/z^ira"Z饥，2001, 42, 6349-6351.)。KPN-20012002年，刘波对构建5(6—7)abeo—AB环甾体结构进行了改进A5_3p — 羟基胆垸酸甲酯在一78t:下，以甲醇一二氯甲烷混合溶液为溶剂，臭氧化开环 得5,6-断-3p-羟基-5-酮-6-醛胆烷酸甲酯，在室温下，经中性三氧化二铝催化，分 子内醇醛缩合得具有5(6—7)abeo—AB环甾体结构的化合物B-失碳-3(3,5p-二羟 基-6|3-甲醛基胆烷酸甲酯，两步反应的收率为72%，收率大大提高。其特点是以 中性三氧化二铝代替强碱LDA，反应条件更为温和，试剂价格降低，便于操作， 收率提高。7.COOMe \^COOMe r 、703'CH2GI2-MeOH(4:1) f^t^> AI203,benZena合成帕格甾醇的另一关键问题是^4(28)—甾体侧链的构建，而^24(28)—甾体化合物(24 —亚甲基甾体化合物)的合成文献上仅见几例。1956年，Idler以^5-3卩-乙酰基胆烷酸酰氯为原料，与二异丙基镉试剂亲核加成以46%的收率得关键中 间体24 —酮胆甾烷，再与溴化甲基三苯基膦反应得^24(28)_胆甾烷，最后脱去 乙酰基以32%的总收率合成2本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种帕格甾醇Ａ和帕格甾醇Ｂ的合成方法，合成路线如下： ＊＊＊ 其中， 步骤（ａ）：式（１）所示猪去氧胆酸经甲酯化、对甲苯磺酸酯化、Ｓ↓［Ｎ］２亲核取代－Ｅ１消除反应三步一锅得式（２）所示△↑［５］－３β－羟基胆烷酸甲酯； 步骤（ｂ）：在有机溶剂中，式（２）所示△↑［５］－３β－羟基胆烷酸甲酯先在臭氧作用下氧化开环，再在还原剂作用下转变成式（３）所示５，６－断－３β－羟基－５－酮－６－醛基胆烷酸甲酯； 步骤（ｃ）：在有机溶剂中，式（３）所示５，６－ 断－３β－羟基－５－酮－６－醛基胆烷酸甲酯与中性氧化铝反应，经过分子内醇醛缩合，转变成式（４）所示Ｂ－失碳－３β，５β－二羟基－６β－甲醛基胆烷酸甲酯； 步骤（ｄ）：在有机溶剂中，式（４）所示Ｂ－失碳－３β，５β－二羟基－６β－甲醛基 胆烷酸甲酯在酸性催化剂、脱水剂作用下，转变成式（５）所示Ｂ－失碳－３β，５β－二羟基－６β－二甲氧基甲基胆烷酸甲酯； 步骤（ｅ）：在有机溶剂中，式（５）所示Ｂ－失碳－３β，５β－二羟基－６β－二甲氧基甲基胆烷酸甲酯，在咪唑、叔丁基二甲 基氯硅烷的作用下，经硅基化得式（６）所示Ｂ－失碳－３β－叔丁基二甲基硅氧基－５β－羟基－６β－二甲氧基甲基胆烷酸甲酯；步骤（ｆ）：在有机溶剂中，式（６）所示Ｂ－失碳－３β－叔丁基二甲基硅氧基－５β－羟基－６β－二甲氧基甲基胆烷酸甲酯与异丙基溴化镁和胺络合剂混合溶液作用下，经异丙基化得式（７）所示Ｂ－失碳－３β－叔丁基二甲基硅氧基－５β－羟基－６β－二甲氧基甲基胆甾－２４－酮； 步骤（ｇ）：在有机溶剂中，式（７）所示Ｂ－失碳－３β－叔丁基二甲基硅氧基－５β－羟基－６β－二 甲氧基甲基胆甾－２４－酮经Ｌｏｍｂａｒｄｏ’ｓ试剂作用，得式（８）所示Ｂ－失碳－２４－高－△↑［２４（２８）］－３β－叔丁基二甲基硅氧基－５β－羟基－６β－二甲氧基甲基胆甾烷；或者在有机溶剂中，式（７）所示Ｂ－失碳－３β－叔丁基二甲基硅氧基－５β－羟基－６β－二甲氧基甲基胆甾－２４－酮，与Ｗｉｔｔｉｇ试剂反应在碱作用下得式（８）所示Ｂ－失碳－２４－高－△↑［２４（２８）］－３β－叔丁基二甲基硅氧基－５β－羟基－６β－二甲氧基甲基胆甾烷； 步骤（ｈ）：在丙酮－水溶剂中，式 （８）所示Ｂ－失碳－２４－高－△↑［２４（２８）］－３β－叔丁基二甲基硅氧基－５β－羟基－６β－二甲氧基甲基胆甾烷经有机酸催化，脱去保护基后得式（９）所示帕格甾醇Ｂ； 步骤（ｉ）：在有机溶剂中，式（９）所示帕格甾醇Ｂ在碱的作用下，经分 子内脱水得式（１０）所示帕格甾醇Ａ。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：周向东，马婷，徐长荣，
申请(专利权)人：中国人民解放军第三军医大学，
类型：发明
国别省市：85
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。