【技术实现步骤摘要】
一种前列腺癌类器官的培养基体系及培养方法
[0001]本专利技术涉及生物
,具体而言,涉及一种前列腺癌类器官的培养基体系及培养方法。
技术介绍
[0002]目前的前列腺癌培养基更多的是通过加入FBS血清的方式进行培养,对类器官的代谢组学影响较大。
[0003]上述培养方式引入了动物源性成分,也易造成药敏测试的假阳性结果。此外,对前列腺癌组织样本的原代细胞提取和类器官培养方法,目前是空缺的。
技术实现思路
[0004]本专利技术所要解决的技术问题是提供一种前列腺癌类器官的培养基体系及培养方法。
[0005]本专利技术解决上述技术问题的技术方案如下:
[0006]本专利技术提供一种前列腺癌类器官的培养基体系,所述培养基体系包括成球培养基和分化培养基;
[0007]所述成球培养基包括Advanced DMEM/F12基础培养基、B27、L
‑
谷氨酰胺、R
‑
Spondin
‑
1重组蛋白、Noggin蛋白、FGF basic、FGF
‑
10、EGF、ROCK抑制剂Y
‑
27632、A83
‑
01、p38MAPK抑制剂SB202190、烟酰胺、肝细胞生长因子;还包括Wnt 3a细胞因子、硫酸酯酶2重组蛋白;
[0008]所述分化培养基包括所述成球培养基和分化培养添加剂;所述分化培养基添加剂包括氯化锌和亚精胺。
[0009]进一步,所述成球培养基和所述分 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种前列腺癌类器官的培养基体系,其特征在于,所述培养基体系包括成球培养基和分化培养基;所述成球培养基包括Advanced DMEM/F12基础培养基、B27、L
‑
谷氨酰胺、R
‑
Spondin
‑
1重组蛋白、Noggin蛋白、FGF basic、FGF
‑
10、EGF、ROCK抑制剂Y
‑
27632、A83
‑
01、p38MAPK抑制剂SB202190、烟酰胺、肝细胞生长因子、Wnt 3a细胞因子、硫酸酯酶2重组蛋白;所述分化培养基包括所述成球培养基和分化培养添加剂;所述分化培养基添加剂包括氯化锌和亚精胺。2.根据权利要求1所述一种前列腺癌类器官的培养基体系,其特征在于,所述成球培养基还包括双氢睾酮和PGE2。3.根据权利要求2所述一种前列腺癌类器官的培养基体系,其特征在于,所述成球培养基还包括pH缓冲液、抗菌剂和抗氧化剂;所述pH缓冲液为HEPES,所述抗菌剂为Primocin抗生素,所述氧化剂为N
‑
乙酰半胱氨酸。4.根据权利要求3所述一种前列腺癌类器官的培养基体系,其特征在于,所述成球培养基中,HEPES的浓度为5
‑
10mM、B27的浓度为1
×
、L
‑
谷氨酰胺的浓度为1
×
、R
‑
Spondin
‑
1重组蛋白的浓度为100
‑
200ng/ml、Noggin蛋白的浓度为50
‑
100ng/ml、FGF basic的浓度为1
‑
2ng/ml、FGF
‑
10的浓度为10
‑
20ng/ml、EGF的浓度为50
‑
100ng/ml、ROCK抑制剂Y
‑
27632的浓度为10
‑
20μM、A83
‑
01的浓度为0.5
‑
2μM、双氢睾酮的浓度为1
‑
2nM、Primocin抗生素的浓度为50
‑
100μg/ml、p38MAPK抑制剂SB202190的浓度为10
‑
20μM、烟酰胺的浓度为10
‑
20mM、N
‑
乙酰半胱氨酸的浓度为1
‑
2mM、PGE2的浓度为1
‑
2μM、Wnt 3a细胞因子的浓度为10
【专利技术属性】
技术研发人员:游明亮,蔡超杰,邢华杨,
申请(专利权)人:杭州艾名医学科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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