诱导肝细胞分化为胆管细胞的培养方法及所使用的孵育液技术

本申请公开一种能诱导肝细胞分化为胆管细胞的孵育液及所使用的孵育液。孵育液包括：雷帕霉素，终浓度为1～20μM；表皮生长因子，终浓度为5～10ng/ml；DMSO，终浓度不超过0.1％；余量为基础培养基。进一步地，本申请还利用前述的孵育液提供一种诱导肝细胞分化为胆管细胞的培养方法：活化目标肝细胞；配制孵育液，用于诱导目标肝细胞分化为胆管细胞；利用所述孵育液对所述活化后的目标肝细胞进行预设天数的连续培养，所述预设天数为5～12天。本申请的孵育液成分简单，诱导方法操作简单、诱导成功率高，适用性广。适用性广。适用性广。

【技术实现步骤摘要】
诱导肝细胞分化为胆管细胞的培养方法及所使用的孵育液


[0001]本申请涉及细胞培养领域，尤其涉及一种诱导肝细胞分化为胆管细胞的培养方法及所使用的孵育液。

技术介绍

[0002]肝脏由两种类型的内皮层上皮细胞组成，肝细胞和胆管细胞，两者都由肝祖细胞分化。肝细胞是一种肝实质细胞，提供多种代谢功能，如糖生成、糖异生、尿素合成和脂质合成等。胆管细胞形成具有空腔结构的胆管，胆管连接肝和肠，分泌肝细胞产生的胆汁进入肠。尽管胆管细胞只占肝脏的一小部分，但胆管细胞的异常导致多种肝脏疾病的发生，包括原发性胆汁性肝硬化、原发性硬化性胆管炎、肝癌和酒精性肝。
[0003]然而对胆管细胞的研究仍未深入，其中一个原因是胆管细胞来源受限，既难于从通过分离获得原代细胞，也难以通过传代培养获得稳定的胆管细胞，诱导分化而得的胆管细胞存在功能缺陷。

技术实现思路

[0004]本申请的目的是，至少部分克服现有技术的不足，提供一种成分简单、成本可控、操作简易的诱导肝细胞分化为胆管细胞的培养方法及所使用的孵育液。
[0005]为达到以上技术目的，本申请采本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种能诱导肝细胞分化为胆管细胞的孵育液，其特征在于，其由以下组分组成：雷帕霉素，终浓度为1～20μM；表皮生长因子，终浓度为5～10ng/ml；DMSO，终浓度不超过0.1％；余量为基础培养基，所述基础培养基选自DMEM/F12细胞培养基、F12细胞培养基和William's E细胞培养基中的一种。2.如权利要求1所述的孵育液，其特征在于，所述雷帕霉素的质量与DMSO的体积比不超过1：1000。3.一种诱导肝细胞分化为胆管细胞的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：活化目标肝细胞；配制孵育液，用于诱导目标肝细胞分化为胆管细胞；利用所述孵育液对所述活化后的目标肝细胞进行预设天数的连续培养，所述预设天数为5～12天；其中，所述孵育液采用如权利要求1或2所述的能诱导肝细胞分化为胆管细胞的孵育液。4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述目标肝细胞来自肝祖细胞，肝癌细胞和胆管癌细胞中的其中一...

【专利技术属性】
技术研发人员：高毅，黎少，欧楚澎，彭青，李阳，
申请(专利权)人：广东乾晖生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：