一种小鼠小肠类器官的培养基及培养方法技术

本发明专利技术涉及类器官培养技术，具体而言，涉及一种小鼠小肠类器官的培养基及培养方法。该培养基包括：基础培养基、特异性添加因子、Wnt通路激活剂TWS119和BMP I型受体抑制剂LDN

【技术实现步骤摘要】
一种小鼠小肠类器官的培养基及培养方法


[0001]本专利技术涉及类器官培养技术，具体而言，涉及一种小鼠小肠类器官的培养基及培养方法。

技术介绍

[0002]长期以来，肠道上皮细胞被认为是代谢和免疫形态的重要调节因子，但是肠道的体外研究一直存在困难。目前尚缺乏理想的肠上皮体外研究模型。
[0003]细胞系及原代细胞/组织的培养均无法反映肠道的多样性和复杂性，两种方法均有诸多缺陷。而体外构建的肠道类器官提供了一个生理相关的细胞模型，包含所有类型的肠上皮细胞，并具有水、离子吸收和转运等生理功能，这些优势是单一细胞系所无法比拟的，基于3D类器官进行肠道上皮细胞生物学功能和肠道疾病建模的研究可缩短研究周期，减少实验动物的使用。
[0004]然而，在现有技术中，小鼠小肠类器官培养条件尚未统一，小鼠小肠类器官在培养过程中尤其是原代的通常不宜培养成功且生长十分缓慢。而常规添加的生长因子，如WNT 3a，价格昂贵，并且这样的生长因子在不同批次之间的效果不一致，导致对小鼠小肠类器官的培养效果差异巨大，稳定性较差。
[0005]另外，在常规的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种小鼠小肠类器官的培养基，其特征在于，所述培养基包括：基础培养基、特异性添加因子、Wnt通路激活剂TWS119和BMP I型受体抑制剂LDN
‑
193189。2.根据权利要求1所述一种小鼠小肠类器官的培养基，其特征在于，所述Wnt通路激活剂TWS119在所述培养基中的浓度为10
‑
15nmol/L。3.根据权利要求2所述一种小鼠小肠类器官的培养基，其特征在于，所述BMP I型受体抑制剂LDN
‑
193189在所述培养基中的浓度为2
‑
5nmol/L。4.根据权利要求3所述一种小鼠小肠类器官的培养基，其特征在于，所述基础培养基为Advanced DMEM/F12；所述特异性添加因子包括Glutamax添加剂、HEPES缓冲液、N
‑
乙酰半胱氨酸、青链霉素、B27、R
‑
spondin1重组蛋白、Noggin蛋白以及EGF。5.根据权利要求4所述一种小鼠小肠类器官的培养基，其特征在于，所述培养基中，Glutamax添加剂的浓度为1
×
、HEPES缓冲液的浓度为1
×
、N
‑
乙酰半胱氨酸的浓度为0.75
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1.25mmol/L、青链霉素的浓度为1
×
、B27的浓度为1
×
、R
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spondin1重组蛋白的浓度为300
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500ng/mL、Noggin蛋白的浓度为80
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100ng/mL、EGF的浓度为30
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50ng/mL；溶剂为所述Advanced DMEM/F12基础培养基。6...

【专利技术属性】
技术研发人员：邢华杨，刘蕊，游明亮，蔡超杰，
申请(专利权)人：杭州艾名医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：