RNA和DNA双外参实时定量荧光PCR检测方法及其应用技术

本发明专利技术涉及生物信息学领域，具体涉及一种ＲＮＡ和ＤＮＡ双外参实时定量荧光ＰＣＲ检测方法及其应用，包括如下步骤：选定外参基因；制备外参基因的ｍＲＮＡ与ＤＮＡ，配制外参基因的ｍＲＮＡ与ＤＮＡ的预混合液；在抽提样品时加入预混合液，收集样品中的总ｍＲＮＡ和ＤＮＡ部分；实时定量荧光ＰＣＲ，计算待测基因和外参基因ｍＲＮＡ和ＤＮＡ的拷贝数；数据处理和归一化。本发明专利技术还公开了上述方法在基因芯片分析基因表达技术中的应用。本发明专利技术改进了对基因转录水平检测的实验设计，可以得到某个基因的真实的转录水平而不是一个相对水平，为基因表达数据和基因拷贝数据的整合提供新的概念和框架。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种ＲＮＡ和ＤＮＡ双外参实时定量荧光ＰＣＲ检测方法，包括如下步骤：　１）配制外参基因的ｍＲＮＡ与外参基因的ＤＮＡ的预混合液；　２）将待测样品与步骤１）中制备的预混合液混合，分别抽提并且收集总ｍＲＮＡ和总ＤＮＡ；　３）总ｍＲ ＮＡ进行逆转录合成第一条ｃＤＮＡ链后与总ＤＮＡ分别进行实时定量荧光ＰＣＲ，然后计算扩增后待测基因的ｍＲＮＡ和ＤＮＡ的拷贝数以及外参基因的ｍＲＮＡ和ＤＮＡ的扩增产物的拷贝数。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陆长德，李园园，
申请(专利权)人：上海生物信息技术研究中心，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]