TAU结合化合物制造技术

本公开提供了抗tau抗体及其载体化(例如，载体化到AAV颗粒中)。还提供了使用抗tau抗体和/或AAV颗粒预防、治疗和/或诊断神经适应症的方法。的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】TAU结合化合物
[0001]相关申请的引用
[0002]本申请要求2020年4月15日提交的美国临时专利申请第63/010261号和2021年3月18日提交的美国临时专利申请第63/162976号的申请日权益，上面提到的申请的整个内容(包括列表中的任何序列和附图)都通过引用并入本文。
[0003]序列表
[0004]本申请包含序列表，该序列表已经以ASCII格式以电子方式提交并特此通过引用整体并入。创建于2021年4月13目的所述ASCII副本名称为135333_01920_2057_1308_SL.txt并且大小为714,773字节。


[0005]本公开提出了tau结合化合物和包含tau结合化合物的腺相关病毒(AAV)颗粒。

技术介绍

[0006]Tau蛋白病是一组以微管相关蛋白tau的功能障碍和/或聚集为特征的神经退行性疾病。Tau通常是已知基于其磷酸化程度与微管缔合的极易溶解的蛋白。Tau被视为细胞内运输过程的关键组分，尤其是在神经元细胞中，因为它们具有独特和扩展的结构。tau的过度磷酸化会阻抑其与微管的结合和微管组装活性。此外，tau的过度磷酸化使其易于错误折叠和聚集。在tau蛋白病中，tau变得过度磷酸化，错误折叠并聚集为成对螺旋丝(PHF)、扭带或直丝的神经原纤维缠结(NFT)。这些NFT在很大程度上被视为指示即将发生的神经元细胞死亡并且被认为会促成广泛的神经元细胞损失，导致多种行为和认知缺陷。
[0007]遗传定义的tau蛋白病是在证实tau基因中的突变会导致常染色体显性遗传tau蛋白病(称为与17号染色体相关的额颞叶痴呆和帕金森综合征(FTDP
‑
17))时描述的。这提供了tau变化可导致脑部神经退行性变化的证据。这些分子被视为更成淀粉样的，意味着它们更有可能变得过度磷酸化并且更有可能聚集成NFT(Hutton，M.等人，1998，Nature 393(6686)：702
‑
5)。
[0008]已经提出了几种方法用于治疗性干扰tau病理进展和防止后续的分子和细胞后果。考虑到NFT由过度磷酸化、错误折叠和聚集形式的tau组成，则在这些阶段的每个阶段的干扰都提供了可追求的目标。引入限制磷酸化、阻断错误折叠或防止聚集的试剂是有前景的策略。还有人提出引入抗tau抗体可防止tau病理的跨神经元扩散。
[0009]仍然需要用于tau蛋白病治疗、诊断和其他应用的抗tau抗体。本公开用本文所述的相关化合物和方法解决了这种需要。

技术实现思路

[0010]本公开至少部分涉及用于调节tau水平(例如tau的聚集和/或分布)和/或递送，例如载体化递送与tau结合的抗体(例如抗tau抗体，例如本文所述的抗tau抗体)的组合物和方法。在一些实施方案中，使用本文所述的抗tau抗体或包含编码抗tau抗体(例如本文所述
的抗tau抗体)的病毒基因组的分离的(例如重组的)AAV颗粒来降低或抑制tau的水平(例如聚集或分布)。在一些实施方案中，使用本文所述的抗tau抗体或包含编码抗tau抗体(例如本文所述的抗tau抗体)的病毒基因组的分离的(例如重组的)AAV颗粒来增加tau的降解。此类抑制和/或降解可用于治疗与tau表达相关的病症和/或神经病症，诸如tau蛋白病。
[0011]因此，在一个方面，本公开提供了一种与tau结合的分离的(例如重组的)抗体，所述抗体包含：重链可变区(VH)，所述重链可变区包含表1、表6、表2A
‑
2C、表4或表5的HC CDR序列中的任一者的重链互补决定区1(HC CDR1)、重链互补决定区2(HC CDR2)和/或重链互补决定区3(HC CDR3)中的一个、两个或三个；和/或轻链可变区(VL)，所述轻链可变区包含表1、表6、表2A
‑
2B、表4或表5的LC CDR序列中的任一者的轻链互补决定区1(LC CDR1)、轻链互补决定区2(LC CDR2)和/或轻链互补决定区3(LC CDR3)中的一个、两个或三个。
[0012]在另一个方面，本公开提供了一种与人tau结合的分离的(例如重组的)抗体，其中所述抗体结合与参考抗体结合相同或基本上相同的表位，所述参考抗体包含VH和VL，所述VH包含HC CDR1、HC CDR2和HC CDR3，所述VL包含轻链LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3，其中：HC CDR1、HC CDR2、HC CDR3、LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3分别包含SEQ ID NO：315、341、410、474、529和571的氨基酸序列；HC CDR1、HC CDR2、HC CDR3、LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3分别包含SEQ ID NO：314、341、410、1154、529和571的氨基酸序列；或HC CDR1、HC CDR2、HC CDR3、LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3分别包含SEQ ID NO：316、341、410、475、530和571的氨基酸序列。
[0013]在另一个方面，本公开提供了一种与人tau结合的分离的(例如重组的)抗体，其中所述抗体与参考抗体竞争结合，其中所述参考抗体包含VH和VL，所述VH包含HC CDR1、HC CDR2和HC CDR3，所述VL包含轻链LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3，其中：HC CDR1、HC CDR2、HC CDR3、LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3分别包含SEQ ID NO：315、341、410、474、529和571的氨基酸序列；HC CDR1、HC CDR2、HC CDR3、LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3分别包含SEQ ID NO：314、341、410、1154、529和571的氨基酸序列；或HC CDR1、HC CDR2、HC CDR3、LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3分别包含SEQ ID NO：316、341、410、475、530和571的氨基酸序列。
[0014]在再另一方面，本公开提供了一种分离的(例如重组的)抗体，所述抗体与人tau蛋白的包含根据SEQ ID NO：920编号的残基409
‑
436的区域结合。在一些实施方案中，所述抗体包含VH，所述VH包含HC CDR1、HC CDR2和HC CDR3，其中：HC CDR1、HC CDR2、HC CDR3分别包含SEQ ID NO：1180、341和410的氨基酸序列；HC CDR1、HC CDR2、HC CDR3分别包含SEQ ID NO：1183、1184和410的氨基酸序列；或HC CDR1、HC CDR2、HC CDR3分别包含SEQ ID NO：1186、1187和1167的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体包含VL，所述VL包含LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3，其中：LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3分别包含SEQ ID NO：1181、1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种与tau结合的分离的例如重组的抗体，所述抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述重链可变区包含HC CDR1、HC CDR2和HC CDR3，所述轻链可变区包含LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3，其中：(i)所述HC CDR1、HC CDR2和HC CDR3分别包含SEQ ID NO:315、341和410的氨基酸序列；并且所述LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3分别包含SEQ ID NO:474、529和571的氨基酸序列；(ii)所述HC CDR1、HC CDR2和HC CDR3分别包含SEQ ID NO:314、341和410的氨基酸序列；并且所述LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3分别包含SEQ ID NO:1154、529和571的氨基酸序列；(iii)所述HC CDR1、HC CDR2和HC CDR3分别包含SEQ ID NO:316、341和410的氨基酸序列；并且所述LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3分别包含SEQ ID NO:475、530和571的氨基酸序列；(iv)所述HC CDR1、HC CDR2和HC CDR3分别包含SEQ ID NO:325、362和435的氨基酸序列；并且所述LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3分别包含SEQ ID NO:495、540和587的氨基酸序列；(v)所述HC CDR1、HC CDR2和HC CDR3分别包含SEQ ID NO:304、347和400的氨基酸序列；并且所述LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3分别包含SEQ ID NO:464、523和562的氨基酸序列；(vi)所述HC CDR1、HC CDR2和HC CDR3分别包含SEQ ID NO:299、343和395的氨基酸序列；并且所述LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3分别包含SEQ ID NO:460、518和557的氨基酸序列；或(vii)所述HC CDR1、HC CDR2和HC CDR3包含表1、表6、表2A
‑
2C、表4或表5的HC CDR序列中的任一者的氨基酸序列；并且所述LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3包含表1、表6、表2A
‑
2C、表4或表5的LC CDR序列中的任一者的氨基酸序列。2.一种与tau结合的分离的例如重组的抗体，所述抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述重链可变区包含HC CDR1、HC CDR2和HC CDR3，所述轻链可变区包含LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3，其中：(i)所述HC CDR1、HC CDR2、HC CDR3、LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3分别包含SEQ ID NO:1180、341、410、1181、1182和571的氨基酸序列；(ii)所述HC CDR1、HC CDR2、HC CDR3、LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3分别包含SEQ ID NO:1183、1184、410、1185、1182和571的氨基酸序列；或(iii)所述HC CDR1、HC CDR2、HC CDR3、LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3分别包含SEQ ID NO:1186、1187、1167、1188、528和571的氨基酸序列；任选地，其中所述抗体与人tau蛋白的包含根据SEQ ID NO:920编号的残基409
‑
436的区域结合。3.如权利要求2所述的抗体，其中所述抗体与所述人tau蛋白的包含根据SEQ ID NO:920编号的残基409
‑
436的所述区域结合，并且其中：(i)所述HC CDR1、HC CDR2和HC CDR3分别包含SEQ ID NO:1180、341和410的氨基酸序列；并且
(ii)所述LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3分别包含SEQ ID NO:1181、1182和571的氨基酸序列。4.如权利要求1
‑
3中任一项所述的抗体，其中：(i)所述VH包含SEQ ID NO:22、21、23、51、9或4的氨基酸序列，或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)所述VH包含对SEQ ID NO:22、21、23、51、9或4的氨基酸序列具有至少一个、两个或三个修饰但不超过30、20或10个修饰的氨基酸序列；(iii)所述VH包含由SEQ ID NO:168、167、169、197、155或150的核苷酸序列，或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的核苷酸序列编码的氨基酸序列；或(iv)所述VH包含表3或表4中提供的任何VH的氨基酸序列，或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的氨基酸序列；或对表3或表4中提供的任何VH的所述氨基酸序列具有至少一个、两个或三个修饰但不超过30、20或10个修饰的氨基酸序列。5.如权利要求1
‑
4中任一项所述的抗体，其中：(i)所述VL包含SEQ ID NO:94、93、95、122、83或78的氨基酸序列，或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)所述VL包含对SEQ ID NO:94、93、95、122、83或78的氨基酸序列具有至少一个、两个或三个修饰但不超过30、20或10个修饰的氨基酸序列；(iii)所述VL包含由SEQ ID NO:242、241、243、270、229或224的核苷酸序列，或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的核苷酸序列编码的氨基酸序列；或(iv)所述VL包含表3或表4中提供的任何VL的所述氨基酸序列，或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的氨基酸序列；或对表3或表4中提供的任何VL的所述氨基酸序列具有至少一个、两个或三个修饰但不超过30、20或10个修饰的氨基酸序列。6.如权利要求1
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5中任一项所述的抗体，其中：(i)所述VH包含SEQ ID NO:22的氨基酸序列或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性或对其具有至少一个、两个或三个修饰但不超过10个修饰的氨基酸序列，并且所述VL包含SEQ ID NO:94的氨基酸序列或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性或对其具有至少一个、两个或三个修饰但不超过10个修饰的氨基酸序列；(ii)所述VH包含SEQ ID NO:21的氨基酸序列或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性或对其具有至少一个、两个或三个修饰但不超过10个修饰的氨基酸序列，并且所述VL包含SEQ ID NO:93的氨基酸序列或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性或对其具有至少一个、两个或三个修饰但不超过10个修饰的氨基酸序列；(iii)所述VH包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性或对其具有至少一个、两个或三个修饰但不超过10个修饰的氨基酸序列，并且所述VL包含SEQ ID NO:95的氨基酸序列或与之具有至少90％、92％、
95％、96％、97％、98％或99％序列同一性或对其具有至少一个、两个或三个修饰但不超过10个修饰的氨基酸序列；(iv)所述VH包含SEQ ID NO:51的氨基酸序列或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性或对其具有至少一个、两个或三个修饰但不超过10个修饰的氨基酸序列，并且所述VL包含SEQ ID NO:122的氨基酸序列或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性或对其具有至少一个、两个或三个修饰但不超过10个修饰的氨基酸序列；(v)所述VH包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性或对其具有至少一个、两个或三个修饰但不超过10个修饰的氨基酸序列，并且所述VL包含SEQ ID NO:83的氨基酸序列或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性或对其具有至少一个、两个或三个修饰但不超过10个修饰的氨基酸序列；或者，(vi)所述VH包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性或对其具有至少一个、两个或三个修饰但不超过10个修饰的氨基酸序列，并且所述VL包含SEQ ID NO:78的氨基酸序列或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性或对其具有至少一个、两个或三个修饰但不超过10个修饰的氨基酸序列。7.如权利要求1
‑
6中任一项所述的抗体，其中：(i)编码所述VH的核苷酸序列包含SEQ ID NO:168、167、169、197、155或150的核苷酸序列，或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的核苷酸序列；和/或(ii)编码所述VL的核苷酸序列包含SEQ ID NO:242、241、243、270、229或224的核苷酸序列或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的核苷酸序列。8.如权利要求1
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7中任一项所述的抗体，所述抗体是全长抗体、双特异性抗体、Fab、F(ab')2、Fv或单链Fv片段(scFv)。9.如权利要求1
‑
8中任一项所述的抗体，所述抗体包含选自人IgG1、人IgG2、人IgG3和人IgG4、鼠IgG1、鼠IgG2a、鼠IgG2b、鼠IgG2c和鼠IgG3的重链恒定区；和/或选自κ或λ轻链恒定区例如人或小鼠κ或人或小鼠λ轻链恒定区的轻链恒定区。10.如权利要求1
‑
9中任一项所述的抗体，所述抗体包含：重链恒定区，所述重链恒定区包含表X中提供的重链恒定区的氨基酸序列或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的氨基酸序列；和/或轻链恒定区，所述轻链恒定区包含表X中提供的轻链恒定区的氨基酸序列或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的氨基酸序列。11.如权利要求1
‑
10中任一项所述的抗体，所述抗体结合：(1)tau蛋白的C端，例如根据SEQ ID NO:920编号的残基409
‑
436；(2)tau蛋白的微管结合结构域；(3)tau蛋白的富脯氨酸结构域；(4)包含至少一个、两个、三个或更多个磷酸化残基，例如根据SEQ ID NO:920编号的残基T212、T217、S396、S404、S409或其组合的tau蛋白；
(5)富集的成对螺旋丝tau蛋白(ePHF)；和/或，(6)包含由至少两种tau蛋白的复合物例如tau二聚体形成的区域的表位。12.如权利要求1
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11中任一项所述的抗体，所述抗体以小于约120nM的解离常数(K
D
)(例如，通过Octet测量的，例如，如实施例8中所述)与tau蛋白结合。13.如权利要求1
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12中任一项所述的抗体，所述抗体降低或抑制tau的聚集，例如以约1nM至约30nM的半数最大抑制浓度(IC50)抑制tau的聚集(例如，通过免疫耗竭测定(例如用tau RD生物传感器细胞)测量的，例如如实施例6中所述)。14.一种分离的例如重组的抗体，所述抗体与如前述权利要求中任一项所述的抗体竞争与tau的结合。15.一种分离的例如重组的抗体，所述抗体与同如前述权利要求中任一项所述的抗体的表位相同的表位、基本上相同的表位，或与如前述权利要求中任一项所述的抗体的表位重叠的表位结合。16.一种分离的例如重组的核酸，所述核酸编码如前述权利要求中任一项所述的抗体。17.一种编码抗体的分离的例如重组的核酸，所述抗体包含VH和VL，所述VH包含HC CDR1、HC CDR2和HC CDR3，所述VL包含LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3，其中：(i)所述HC CDR1、HC CDR2和HC CDR3分别包含SEQ ID NO:315、341和410的氨基酸序列；并且所述LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3分别包含SEQ ID NO:474、529和571的氨基酸序列；(ii)所述HC CDR1、HC CDR2和HC CDR3分别包含SEQ ID NO:314、341和410的氨基酸序列；并且所述LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3分别包含SEQ ID NO:1154、529和571的氨基酸序列；(iii)所述HC CDR1、HC CDR2和HC CDR3分别包含SEQ ID NO:316、341和410的氨基酸序列；并且所述LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3分别包含SEQ ID NO:475、530和571的氨基酸序列；(iv)所述HC CDR1、HC CDR2和HC CDR3分别包含SEQ ID NO:325、362和435的氨基酸序列；并且所述LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3分别包含SEQ ID NO:495、540和587的氨基酸序列；(v)所述HC CDR1、HC CDR2和HC CDR3分别包含SEQ ID NO:304、347和400的氨基酸序列；并且所述LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3分别包含SEQ ID NO:464、523和562的氨基酸序列；(vi)所述HC CDR1、HC CDR2和HC CDR3分别包含SEQ ID NO:299、343和395的氨基酸序列；并且所述LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3分别包含SEQ ID NO:460、518和557的氨基酸序列；或(vii)所述HC CDR1、HC CDR2和HC CDR3包含表1、表6、表2A
‑
2C、表4或表5的HC CDR序列中的任一者的氨基酸序列；并且所述LC CDR1、LC CDR2和LC CDR3包含表1、表6、表2A
‑
2C、表4或表5的任何LC CDR序列的氨基酸序列。18.如权利要求17所述的核酸，其中：(i)所述VH包含SEQ ID NO:22、21、23、51、9或4的氨基酸序列，或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性或对其氨基酸序列具有至少一个、两个或三
个修饰但不超过10个修饰的氨基酸序列；和/或(ii)所述VL包含SEQ ID NO:94、93、95、122、83或78的氨基酸序列或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性或对其氨基酸序列具有至少一个、两个或三个修饰但不超过10个修饰的氨基酸序列。19.如权利要求17或18所述的核酸，所述核酸包含：(i)表3或表4中提供的任何VH的核苷酸序列，或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的核苷酸序列；和/或(ii)表3或表4中提供的任何VL的核苷酸序列，或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的核苷酸序列。20.如权利要求17
‑
19中任一项所述的核酸，所述核酸包含：(i)SEQ ID NO:168、167、169、197、155或150的核苷酸序列，或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的核苷酸序列；和/或(ii)SEQ ID NO:242、241、243、270、229或224的核苷酸序列或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的核苷酸序列。21.如权利要求17
‑
20中任一项所述的核酸，其中所述抗体包含：(i)重链恒定区，所述重链恒定区包含表X中提供的重链恒定区的氨基酸，或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的氨基酸序列；和/或(ii)轻链恒定区，所述轻链恒定区包含表X中提供的轻链恒定区的氨基酸序列，或与之具有至少90％、92％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的氨基酸序列。22.如权利要求17
‑
21中任一项所述的分离的核酸序列，其中编码所述重链可变区和/或所述轻链可变区的所述核酸序列是密码子优化的。23.一种分离的例如重组的抗体，所述抗体由如权利要求17
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22中任一项所述的核酸编码。24.一种编码有效载荷的分离的核酸，其中所编码的有效载荷包含如权利要求1
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15或23中任一项所述的抗体，或由如权利要求17
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22中任一项所述的核酸编码的抗体。25.如权利要求24所述的核酸，所述核酸还编码信号序列和任选地第二信号序列，任选地，其中编码所述信号序列和/或所述第二信号序列(如果存在)的所述核苷酸序列包含表14中列出的信号序列中的任一者的核苷酸序列，或与之具有至少95％序列同一性的核苷酸序列。26.如权利要求24或25所述的核酸，其中：(i)编码信号序列的核苷酸序列相对于编码所述VH的所述核苷酸序列位于5'；和/或(ii)编码信号序列的核苷酸序列相对于编码所述VL的所述核苷酸序列位于5'。27.如权利要求24
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26中任一项所述的核酸，其中：(i)所编码的VH和VL的所述序列直接连接(例如，没有接头)；或(ii)所编码的VH和VL的所述序列经由接头连接，任选地，所述接头包含表15中提供的接头序列中的任一者的核苷酸序列，或与之具有至少95％序列同一性的核苷酸序列。28.如权利要求24
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27中任一项所述的核酸，其中所编码的有效载荷是全长抗体、双特异性抗体、Fab、F(ab')2、F...

【专利技术属性】
技术研发人员：T，
申请(专利权)人：沃雅戈治疗公司，
类型：发明
国别省市：