利用液相芯片检测流感病毒的方法技术

技术编号:3780533 阅读:240 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了一种利用液相芯片检测流感病毒的方法。该检测方法对所有流感病毒A型、流感病毒B型的Non?Structural核酸序列及流感病毒A型的H1、H2、H3、H5、H7、H9和N1、N2亚型进行同源性分析,设计出针对相应基因片段的引物和特异性探针;采用一种改良的巢式PCR方法即使用不同长度的嵌套式引物进行PCR扩增;特异性探针5’端进行氨基化处理,与荧光编码的微球进行偶联;将PCR扩增产物与偶联有特异性探针的混合微球温育杂交,最后用Luminex?100进行检测。本发明专利技术的检测方法具有较高的特异性及灵敏度,并且检测速度快,能够对流感病毒的流行进行识别和监控。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种检测病毒的方法,特别涉及一种。(二)
技术介绍
流行性感冒(简称流感)是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病。自2005年,家 禽及人感染流感病毒的病例在世界各地不断发生,禽流感继SARS之后给全世界人民造成 了巨大的恐慌。控制流感流行的一个关键问题就是及时、准确的鉴别诊断,这就需要非常准 确并且灵敏的诊断方法。 流感病毒属于正粘病毒(Orthomyxovirus),按核蛋白的可溶性补体结合抗原 的不同,流感病毒可分为甲(A)、乙(B)、丙(C)三型。A型流感病毒又根据表面血凝素 (Hemagglutinin HA)及神经氨酸酶(Neuraminidase NA)抗原性的不同再分为若干亚型,目 前已知的HA有16个亚型(H1-H16) ,NA有9个亚型(Nl-N9)。由于HA、NA的抗原决定簇容 易发生某些改变,导致流感病毒的不断流行,所以鉴别流感病毒的具体亚型是十分重要的。 目前有三种流感病毒诊断方法ELISA(酶联免疫吸附法)、细胞培养法和分子法。 每种方法都有它们各自的优势和缺点 (l)ELISA (Enzyme Linked ImmunoSorbant A本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用液相芯片检测流感病毒的方法,其特征在于:包括如下步骤:  (1)利用生物信息学知识和相关的生物信息学软件,对Genbank中能够检索到的所有流感病毒A型、流感病毒B型的Non Structural核酸序列及流感病毒A型的H1、H2、H3、H5、H7、H9的Hemagglutinin靶基因序列和N1、N2亚型的Neuraminidase靶基因序列进行同源性分析,找出保守区域,设计出针对相应基因片段的引物和特异性探针;  (2)采用一种改良的巢式PCR方法即使用不同长度的嵌套式引物进行PCR扩增:将巢式PCR的内外引物加以改变,缩短外引物长度(15~20bp),同时通过在特异性内引物5’端...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:汪朝晖王华林张凯宁张国宁李艳艳
申请(专利权)人:山东艾克韦生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:88[中国|济南]

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