CD300LD抑制剂在制备预防、诊断或治疗肿瘤产品中的用途制造技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，特别是涉及CD300LD抑制剂在制备预防、诊断或治疗肿瘤产品中的用途，CD300LD抑制剂通过调节其下游信号通路中的S100A8/A9来调节PMN

【技术实现步骤摘要】
CD300LD抑制剂在制备预防、诊断或治疗肿瘤产品中的用途


[0001]本专利技术涉及生物
，特别是涉及CD300LD抑制剂在制备预防、诊断或治疗肿瘤产品中的用途。

技术介绍

[0002]PD1、CTLA4等免疫检查点阻断疗法仅在部分病人中具有较好治疗效果，因此寻找新的免疫检查点以进一步促进肿瘤免疫治疗是领域内的重大挑战。多型核髓源抑制细胞(PMN
‑
MDSC)是一类病理诱导产生的、广泛存在于各种肿瘤中的中性粒细胞，能够抑制T细胞和NK等效应细胞功能，促进肿瘤发展、浸润和转移，在肿瘤免疫调节上发挥关键作用。针对PMN
‑
MDSC的特异性靶向药物可进一步推进肿瘤的免疫治疗，但目前其特异性的免疫检查点分子仍有待发现。

技术实现思路

[0003]鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供CD300LD抑制剂在制备预防、诊断或治疗肿瘤产品中的用途，用于解决现有技术中的问题。
[0004]为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术首先提供CD300LD基因作为靶标在制备肿瘤预防、诊断或治疗药物中的用途。
[0005]本专利技术还提供CD300LD基因和PD1共同作为靶标在制备肿瘤预防、诊断或治疗药物中的用途。
[0006]本专利技术还提供CD300LD抑制剂在制备至少具备以下功效之一的产品中的用途：
[0007]1)预防、诊断、治疗肿瘤；
[0008]2)调节髓系细胞的活性和/或迁移；
[0009]3)调节T细胞活性；
[0010]4)调节CD300LD的下游信号通路。
[0011]本专利技术还提供一种组合物，所述组合物包括CD300LD抑制剂，所述组合物用于以下任一种或多种用途：
[0012]1)预防、诊断、治疗肿瘤；
[0013]2)调节髓系细胞的活性和/或迁移；
[0014]3)调节T细胞活性；
[0015]4)调节CD300LD的下游信号通路。
[0016]如上所述，本专利技术的CD300LD抑制剂在制备预防、诊断或治疗肿瘤产品中的用途，具有以下有益效果：提供了一种PMN
‑
MDSC特异性的新免疫检查点分子——CD300LD，从而特异、高效地靶向调控PMN
‑
MDSC，为解决靶向调控PMN
‑
MDSC进行肿瘤免疫治疗提供新靶点和思路。
附图说明
[0017]图1显示为本专利技术实施例1中通过CD300LD基因的发现及其在免疫细胞中的基因表达图谱。A，PMN
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MDSC与中性粒细胞的差异表达基因。B和C，利用Crispr
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Cas9和B16
‑
F10肿瘤模型对髓系细胞表面受体进行体内筛选的筛选流程示意图(B)；筛选富集基因(C)，与荷瘤小鼠的骨髓相比，CD300LD gRNA在肿瘤中特异缺失。D，流式分析显示在正常小鼠免疫细胞中，CD300LD特异表达在白细胞中的髓系细胞里，尤其是在中性粒细胞(CD45
+
CD11b
+
Ly6G
+
)中特异性高表达(n＝3)。E，流式分析CD300LD在瘤内髓系细胞中的表达：巨噬细胞(CD45
+
CD11b
+
F4/80
+
)，单核髓来源抑制细胞M
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MDSC(CD45
+
CD11b
+
Ly6c
+
ly6G
‑
)，多型核髓来源抑制细胞PMN
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MDSC(CD45
+
CD11b
+
Ly6c
low
ly6G
+
)，结果显示CD300LD在PMN
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MDSC中特异性高表达。F，qRT
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PCR显示CD300LD在荷瘤小鼠PMN
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MDSC与正常小鼠中性粒细胞中的mRNA水平。G，Human Protein Atlas数据库分析显示CD300LD基因主要表达在血液/免疫组织，在细胞亚型上主要表达在中性粒细胞上。H，qRT
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PCR对健康人与结肠癌病人外周血粒细胞的CD300LD基因定量。双尾t检验，*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001。
[0018]图2显示为本专利技术实施例2中CD300LD敲除抑制多种肿瘤的发生发展。A&B，CD300LD KO小鼠的构建示意图(A)及genotyping结果(B)。C，流式分析CD300LD WT和KO小鼠中性粒细胞中CD300LD的表达。D
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F，CD300LD WT和KO小鼠黑色素瘤(B16
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F10)肿瘤模型的肿瘤生长曲线(D)、20天肿瘤大小(E)、以及小鼠生存曲线(F)(n＝11)。G，CD300LD WT和KO小鼠中TC
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1宫颈癌模型的肿瘤生长曲线(n＝6)。H，CD300LD WT和KO小鼠中MC
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38结肠癌模型的肿瘤生长曲线(n＝6)。I，CD300LD WT和KO小鼠中LLC肺癌模型的肿瘤生长曲线(n＝6)。双尾t检验，*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001。
[0019]图3显示为本专利技术实施例3中CD300LD敲除通过PMN
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MDSC抑制肿瘤的发展。A，通过LyzCre条件敲除髓系细胞内的CD300LD，可以明显抑制B16
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F10肿瘤的发展(n＝6)。B，通过S100A8Cre条件敲除髓系细胞内PMN
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MDSC的CD300LD，可以明显B16
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F10抑制肿瘤的发展(n＝9)。C，通过Ly6g抗体清除小鼠体内的PMN
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MDSC，在野生型小鼠中显著抑制B16
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F10肿瘤的发展，但在CD300LD敲除小鼠的B16
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F10肿瘤模型中没有明显效果。D
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F，分离野生型小鼠或CD300LD KO小鼠B16
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F10肿瘤中的巨噬细胞(D)﹑单核髓源抑制型细胞(E)﹑以及PMN
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MDSC(F)等细胞，以1：1的比例与B16
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F10细胞混合后分别接种于野生小鼠皮下，图中显示的是小鼠的生长曲线，只有多核型髓源抑制细胞的CD300LD存在与否导致肿瘤生长差别。双尾t检验，*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001。
[0020]图4显示为本专利技术实施例4中CD300LD敲除改善肿瘤免疫微环境(流式分析结果)。A，流式分析B16
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F10肿瘤中白细胞(CD45
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.CD300LD基因作为靶标在制备肿瘤预防、诊断或治疗药物中的用途。2.CD300LD基因和PD1共同作为靶标在制备肿瘤预防、诊断或治疗药物中的用途。3.CD300LD抑制剂在制备至少具备以下功效之一的产品中的用途：1)预防、诊断或治疗肿瘤；2)调节髓系细胞的活性和/或迁移；3)调节T细胞活性；4)调节CD300LD的下游信号通路。4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，所述CD300LD抑制剂的靶标为CD300LDExon2，和/或，所述CD300LD抑制剂选自核酸分子、蛋白分子或小分子化合物。5.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，所述肿瘤为CD300LD过表达的肿瘤；优选的，所述肿瘤选自肠癌、肺癌、肝癌、乳腺癌、食管癌、头颈癌、皮肤癌、肾癌、白血病、宫颈癌、结肠癌，肝细胞肝癌，卵巢浆液性囊腺癌，子宫内膜癌，甲状腺癌，皮肤黑色素瘤，肺腺癌，头颈鳞状细胞癌，多形成性胶质细胞瘤，前列腺癌，胸腺癌，脑低级别胶质瘤，直肠腺癌，嗜铬细胞瘤和副神经节瘤，食管癌，肾透明细胞癌，膀胱尿路上皮癌，肾乳头状细胞癌，胰腺癌，胃癌，肾嫌色细胞癌，乳腺浸润癌，肺鳞癌，肉瘤或急性髓细胞样白血病。6.根据权利要求3所述的用途，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗敏，赵允，卢智刚，
申请(专利权)人：中国科学院分子细胞科学卓越创新中心，
类型：发明
国别省市：