LncRNAIFA调控ACTG1在猪卵巢颗粒细胞中表达的应用制造技术

本发明专利技术公开了lncRNA IFA调控ACTG1在猪卵巢颗粒细胞中表达的应用。本发明专利技术通过预测lncRNA IFA序列中与ACTG1的mRNA互补的序列，通过Pull down及实验检测了lncRNA IFA与ACTG1mRNA的结合；通过qPCR检测了lncRNA IFA与ACTG1在不同发育阶段卵泡的颗粒细胞中的表达量，在过表达和干扰lncRNA IFA后检测了ACTG1的表达水平，发现lncRNA IFA可以促进ACTG1的表达；在过表达和干扰ACTG1后通过CCK8、EdU、流式细胞术检测到ACTG1可以促进卵巢颗粒细胞的增殖、抑制凋亡，同时增强卵巢颗粒细胞的细胞活性，加快卵巢颗粒细胞的细胞周期进程，为ACTG1的表达调控机制研究积累了材料。料。料。

【技术实现步骤摘要】
LncRNA IFA调控ACTG1在猪卵巢颗粒细胞中表达的应用


[0001]本专利技术属于细胞工程和基因工程
，具体涉及lncRNA IFA调控ACTG1在猪卵巢颗粒细胞中表达的应用。

技术介绍

[0002]LncRNA通常指长度超过200个核苷酸连接的内源性细胞RNA分子，具有与mRNA类似的结构，但不具备蛋白编码的能力。LncRNA IFA(Inhibitor of Follicular Atresia，暂命名)为针对猪卵巢颗粒细胞进行RNA
‑
seq所获得的lncRNA。LncRNA IFA可以抑制卵巢颗粒细胞的凋亡、促进卵巢颗粒细胞的增殖与细胞周期进程，并增强卵巢颗粒细胞的细胞活性。
[0003]在真核细胞中，肌动蛋白具有多种重要的生物功能，除了提供结构框架来维系细胞的形状和极性外，还参与调控细胞的迁移、增殖及凋亡。ACTG1(肌动蛋白γ1)是肌动蛋白的一种，在细胞内表达量一般较高，起到维持细胞骨架，保持细胞形态与运动能力的作用。ASAP3的缺失会破坏ACTG1的稳定性，从而抑制癌细胞迁移；ACTG1在体本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种lncRNA IFA调控ACTG1在猪卵巢颗粒细胞中表达的方法，其特征在于：体外环境下，lncRNA IFA正调控ACTG1的表达；通过调节lncRNA IFA的表达水平，可实现猪卵巢颗粒细胞中ACTG1表达的调控；所述的lncRNA IFA核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。2.根据权利要求1所述的lncRNA IFA调控ACTG1在猪卵巢颗粒细胞中表达的方法，其特征在于：lncRNA IFA的表达水平上升，ACTG1表达量升高；lncRNA IFA的表达水平下降，ACTG1表达量降低。3.根据权利要求2所述的lncRNA IFA调控ACTG1在猪卵巢颗粒细胞中表达的方法，其特征在于：lncRNA IFA的表达水平上升通过基因过表达技术实现，采用的基因过表达载体通过如下方式制备得到：(1)提取猪卵巢颗粒细胞的RNA，将其逆转录成cDNA，以cDNA为模板进行PCR扩增，得到目的片段；(2)将目的片段连接到用限制性内切酶BamH I和Xba I酶切后的pcDNA3.1载体上，得到重组载体；步骤(1)中进行PCR扩增所用引物如下所示：lncRNA IFA F：5
’‑
GGCGATGCCTGGGTACATGG
‑3’
；lncRNA IFA R：5
’‑
GAGACCGCGTCCACTCCGCC
‑3’
。4.根据权利要求2所述的lncRNA IFA调控ACTG1在猪卵巢颗粒细胞中表达的方法，其特征在于：lncRNA IFA的表达水平下降通过RNA干扰技术实现；采用的siRNA的靶向序列为：5
’‑
TGACCTGGGCGACGTAGCA
‑3’
。5.ACTG1在猪卵巢颗粒细胞中的应用，其特征在于：体外环境下，所述ACTG1正调控猪卵巢颗粒细胞增殖、细胞凋亡、细胞活性、细胞周期进程中的任意一种或多种功能表型。6.根据权利要求5所述的ACTG1在猪卵巢颗粒细胞中的应用，其特征在于：增加外...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁晓龙，李加琪，李念，张哲，张豪，郭懿萱，李硕，胡梦婷，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：