抗CD24抗体的制备及其用途制造技术

本发明专利技术提供了抗CD24抗体、其抗原结合片段及其医药用途，还提供了包含所述抗体CDR区的嵌合抗体、人源化抗体、包含抗CD24抗体及其抗原结合片段的药物组合物，以及所述抗体在制备用于治疗疾病或病症的药物中的用途。本发明专利技术的抗体能够与CD24特异性结合，具有高吞噬活性和ADCC效应，展现出良好的抑制肿瘤生长的效果。展现出良好的抑制肿瘤生长的效果。展现出良好的抑制肿瘤生长的效果。

【技术实现步骤摘要】
抗CD24抗体的制备及其用途


[0001]本专利技术涉及生物医药领域，具体的涉及一种针对CD24的抗体或其抗原结合片段。

技术介绍

[0002]CD24也被称为热稳定抗原或小细胞肺癌簇4抗原，是一种高度糖基化的糖基磷脂酰肌醇(glycosyl
‑
phoshphafidyl
‑
inositol，GPI)锚定表面蛋白。CD24基因位于染色体6q21上，成熟的CD24是31个氨基酸组成的小的高度糖基化唾液酸糖蛋白，具有16个潜在的O
‑
糖基化位点和2个预测的N
‑
糖基化位点。CD24的糖基化高且和细胞类型相关，高度糖基化的CD24通过磷脂酰肌醇锚定在细胞膜内的脂质筏上，作为细胞连接位点上分子间相互作用的媒介，介导细胞间、细胞和基质间的黏附。此外CD24作为一种细胞黏附分子，还参与细胞的识别、活化、信号转导、细胞增殖与分化、细胞的伸展与运动等。
[0003]CD24主要表达于造血系统如B淋巴细胞、活化的T淋巴细胞，人的红细胞及胸腺细胞中不表达CD24。此外CD24还在恶性肿瘤中大量表达，如乳腺癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、前列腺癌、非小细胞肺癌、鼻咽癌、直肠癌(Molecular Mechanism of Tumor Cell Immune Escape Mediated by CD24/Siglec
‑
10[J].frontiers in Immunology，2020，11：1324)、胰腺癌(Expression of CD24in Adenocarcinomas of the Pancreas Correlates with Higher Tumor Grade[J]).Pancreatology 2004；4：454
‑
460)等。Barkal等人的研究表明CD24的表达与卵巢癌、乳腺癌患者的生存率密切相关，三阴性乳腺癌和卵巢癌细胞表面的CD24都高表达，而且肿瘤微环境中肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)上的唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素10(Siglec
‑
10)也高表达。研究发现CD24通过与Siglec10的相互作用，促进肿瘤发生免疫逃逸，主要是通过CD24与Siglec
‑
10结合后产生了“别吃我”信号，抑制了巨噬细胞的抗肿瘤功能，而通过CD24阻断抗体的作用能够在体内外模型中有效促进巨噬细胞的抗肿瘤活性(CD24 signalling through macrophage Siglec
‑
10 is a target for cancer immunotherapy[J].Nature，2019，572：392
‑
396)。CD24作为一种在多种癌症中高表达的“别吃我”信号，是肿瘤免疫治疗的潜在新靶点。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种新的抗CD24的抗体或其抗原结合片段，其能够与CD24特异性结合，具有高吞噬活性和ADCC效应、展现出良好的抑制肿瘤生长的效果，同时本专利技术所述抗体对正常细胞或生物体没有毒副作用，具有较好的安全性。
[0005]本专利技术提供一种抗CD24抗体或其抗原结合片段，其包含：
[0006]重链可变区，所述重链可变区包含至少1个如下HCDR：
[0007]HCDR1，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，或包含SEQ ID NO：1所示氨基酸序列；
[0008]HCDR2，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，或包含SEQ ID NO：2所示氨基酸序列；
[0009]HCDR3，其氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示，或包含SEQ ID NO：3所示氨基酸序列；
[0010]和/或
[0011]轻链可变区，所述轻链可变区包含至少1个如下LCDR：
[0012]LCDR1，其氨基酸序列如SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：21或SEQ ID NO：22所示，或包含SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：21或SEQ ID NO：22所示氨基酸序列；
[0013]LCDR2，其氨基酸序列如SEQ ID NO：5所示，或包含SEQ ID NO：5所示氨基酸序列；
[0014]LCDR3，其氨基酸序列如SEQ ID NO：6所示，或包含SEQ ID NO：6所示氨基酸序列。
[0015]在本专利技术一个优选的实施方案中，其中所述的重链可变区包含分别如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3；和/或，其中所述的轻链可变区包含分别如SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3。
[0016]在本专利技术一个优选的实施方案中，其中所述的重链可变区包含分别如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3；且其中所述的轻链可变区包含分别如SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3。
[0017]在本专利技术一个优选的实施方案中，其中所述的重链可变区包含分别如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3；且其中所述的轻链可变区包含分别如SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3。
[0018]在本专利技术一个优选的实施方案中，其中所述的重链可变区包含分别如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3；且其中所述的轻链可变区包含分别如SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3。
[0019]在本专利技术一个优选的实施方案中，其中所述的重链可变区包含分别如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3；且其中所述的轻链可变区包含分别如SEQ ID NO：22、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3。
[0020]在本专利技术一个优选的实施方案中，根据本专利技术提供的抗CD24抗体或其抗原结合片段，所述的重链可变区进一步包含鼠源IgG1、IgG2、IgG3、IgG4或其变体的重链FR区，和/或所述的轻链可变区进一步包含鼠源κ、λ链或其变体的轻链FR区。
[0021]在本专利技术一个优选的实施方案中，根据本专利技术提供的抗CD24抗体或其抗原结合片段，所述的重链可变区氨基酸序列如S本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抗CD24抗体或其抗原结合片段，其包含：重链可变区，所述重链可变区包含：HCDR1，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示；HCDR2，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示；HCDR3，其氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示；和轻链可变区，所述轻链可变区包含：LCDR1，其氨基酸序列如SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：21或SEQ ID NO：22所示；LCDR2，其氨基酸序列如SEQ ID NO：5所示；LCDR3，其氨基酸序列如SEQ ID NO：6所示；优选地，其中所述的重链可变区包含分别如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3；且所述的轻链可变区包含分别如SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；或者，所述的重链可变区包含分别如SEQ D NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3；且所述的轻链可变区包含分别如SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；或者，所述的重链可变区包含分别如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3；且所述的轻链可变区包含分别如SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；或者，所述的重链可变区包含分别如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3；且所述的轻链可变区包含分别如SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；或者，所述的重链可变区包含分别如SEQ D NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3；且所述的轻链可变区包含分别如SEQ ID NO：22、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3。2.如权利要求1所述的抗CD24抗体或其抗原结合片段，所述的重链可变区进一步包含鼠源IgG1、IgG2、IgG3、IgG4或其变体的重链FR区，和/或所述的轻链可变区进一步包含鼠源κ、λ链或其变体的轻链FR区；优选地，其中所述的重链可变区氨基酸序列如SEQIDNO：7所示，或与SEQ ID NO：7具有至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列一致性；和/或所述的轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO：8所示，或与SEQ ID NO：8具有至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列一致性。3.如权利要求1—2任一项所述的抗CD24抗体或其抗原结合片段，为鼠源抗体或其抗原结合片段，进一步包含鼠源IgG1、IgG2、IgG3、IgG4或其变体的重链恒定区，和/或进一步包含鼠源κ、λ链或其变体的轻链恒定区。4.如权利要求1—2任一项所述的抗CD24抗体或其抗原结合片段，为嵌合抗体或其抗原结合片段，进一步包含人源IgG1、IgG2、IgG3、IgG4或其变体的重链恒定区，优选包含人源IgG1、IgG4或其变体的重链恒定区；和/或进一步包含人源κ、λ链或其变体的轻链恒定区，优选包含人源κ或其变体的轻链恒定区；
更优选地，所述人源IgG1或其变体的重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO：9所示，或与SEQ ID NO：9具有至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列一致性；或者，所述人源IgG4或其变体的重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO：10所示，或与SEQ ID NO：10具有至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列一致性；和/或所述人源κ或其变体的轻链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO：11所示，或与SEQ ID NO：11具有至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列一致性。5.如权利要求1所述的抗CD24抗体或其抗原结合片段，为人源化抗体或其抗原结合片段，所述的重链可变区进一步包含人源IgG1、IgG2、IgG3、IgG4或其变体的重链FR区，优选包含人种系重链IGHV1—2*06或其变体的FR区；和/或所述的轻链可变区进一步包含人源κ、λ链或其变体的轻链FR区，优选包含人种系轻链IGKV2D
‑
29*02或其变体的FR区；更优选地，所述的重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO：12或SEQ ID NO：13所示，或与SEQ ID NO：12或SEQ ID NO：13具有至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列一致性；和/或所述的轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：16、SEQ ID NO：17或SEQ ID NO：18所示，或与SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：16、SEQ ID NO：17或SEQ ID NO：18具有至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列...

【专利技术属性】
技术研发人员：李朝辉，刘文慧，谢章明，吴敏，方杰，张骞，方和娣，吕裕斌，
申请(专利权)人：杭州邦顺制药有限公司，
类型：发明
国别省市：