诊断标志物GATA4在胰腺“炎癌转化”中的应用制造技术

本发明专利技术申请是202011531377.1的分案申请。本发明专利技术涉及诊断标志物GATA4在制备鉴别胰腺炎或胰腺癌炎症调节试剂或试剂盒中的应用，属于分子诊断技术领域。本发明专利技术通过在细胞中研究GATA4与“炎癌转化”的关系，分析GATA4的水平与CD68(巨噬细胞标记物)水平相关性，在胰腺癌组织中免疫荧光检测发现两者能共表达，从而提示GATA4可能参与胰腺癌发展过程中的炎症调节；用加入不同浓度LPS的诱导THP

【技术实现步骤摘要】
诊断标志物GATA4在胰腺“炎癌转化”中的应用
[0001]本申请是名为《诊断标志物GATA4在胰腺“炎癌转化”中的应用》的专利申请的分案申请，原申请的申请日为2020年12月22日，申请号为202011531377.1。


[0002]本专利技术涉及分子诊断
，具体地说，是诊断标志物GATA4在胰腺“炎癌转化”中的应用。

技术介绍

[0003]胰腺癌(Pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)恶性程度高，早期诊断难，现有治疗方法疗效差，因此其死亡率高，预后极差，其五年生存率仅有5％。虽然新的诊断和治疗方法的推出及应用使其它癌症的发病率和死亡率得到了控制，但是胰腺癌的发病率和死亡率却仍持续上升，2012年PDAC位列美国恶性肿瘤死亡率的第4位，而到2030年预测将会上升到第2位。深入研究胰腺癌发病的始动环节，从而早期诊断胰腺癌和/或采取措施预防胰腺癌的发生具有重要的科学意义和临床价值。
[0004]大量的研究表明，胰腺癌的发生与胰腺炎密切相关。流行病学调查显示急性或慢性胰腺炎患者相较正常人群其胰腺癌发病率增加5
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6倍，而遗传性慢性胰腺炎患者则增加70倍。本课题组在临床实践中发现一个急性胰腺炎高发家族中有两人已确诊为胰腺癌。病理学研究显示胰腺炎和胰腺癌都起源于腺泡细胞，其中胰腺癌起源于腺泡细胞导管样化生(acinar
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ductal metaplasiaADM)，这一病理变化在急性胰腺炎时短暂形成，慢性胰腺炎及胰腺癌时持续存在，胰腺炎症越重、持续时间越长，其病理结局越相似于胰腺癌，提示胰腺炎症可能促进胰腺癌的发生和发展。另外低级别胰腺上皮内瘤变(pancreatic intraepithelial neoplasiaPanIN)至高级别的PanIN进而最终变为胰腺癌均与慢性炎症信号密切关联。2016年TosteP.等人在Mol Cancer Research上发表文章指出在成年小鼠胰腺癌发病过程中需要KRAS基因突变及炎症过程同时参与。此外，尽管抗炎和抗氧化应激药物对胰腺癌的疗效结果不一，但仍有大量研究表明其应用对胰腺癌起着预防和/或治疗作用。如研究显示高剂量维生素C、E和硒的摄入能降低参与者患胰腺癌的风险。细胞及动物实验表明非甾体类抗炎药(non
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steroidal anti
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inflammatory drugs NSAIDs)如阿司匹林及抗炎药姜黄素在胰腺癌的预防和/或治疗中起作用。炎症除了与PDAC发生密切相关外，炎症信号通路也与PDAC的生长和转移密切相关。炎症因子如IL6和IL8能促进胰腺肿瘤细胞的迁移、侵袭和血管生成。
[0005]以上流行病学研究、动物模型及病人资料均提示胰腺炎与胰腺癌的发生发展存在密切的关系。研究胰腺“炎癌转化”的分子机制并进而预防和治疗胰腺癌具有重要的理论意义和临床应用价值。
[0006]关于本专利技术诊断标志物GATA4在胰腺“炎癌转化”中的应用目前还未见报道。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的是针对现有技术的不足，提供诊断标志物GATA4在胰腺“炎癌转化”中的应用。
[0008]为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案是：
[0009]本专利技术先提供了GATA4作为胰腺“炎癌转化”诊断标志物在制备鉴别胰腺炎与胰腺癌的试剂或试剂盒中的应用。
[0010]本专利技术还提供了GATA4作为胰腺“炎癌转化”诊断标志物在制备鉴别胰腺炎与胰腺炎向胰腺癌转化的试剂或试剂盒中的应用。
[0011]本专利技术还提供了GATA4的抑制剂在制备防治胰腺“炎癌转化”的药物中的应用。
[0012]优选地，所述“炎癌转化”均是指胰腺炎向胰腺癌单方向转化。
[0013]优选地，所述GATA4的抑制剂是降低GATA4表达量的物质。
[0014]优选地，所述GATA4的抑制剂选自小分子化合物或生物大分子。
[0015]优选地，所述生物大分子是以GATA4蛋白或其转录本为靶序列、且能够抑制GATA4蛋白表达或基因转录的小干扰RNA、dsRNA、shRNA、微小RNA、反义核酸；或能表达或形成所述小干扰RNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸的构建物。
[0016]本专利技术还提供了GATA4的抑制剂在制备防治胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的药物中的应用。
[0017]本专利技术还提供了GATA4作为胰腺“炎癌转化”诊断标志物在制备胰腺癌预后风险判断的试剂或试剂盒中的应用。
[0018]本专利技术优点在于：
[0019]1、本专利技术研究证实GATA4的表达水平在胰腺“炎癌转化”过程中的关键性作用，首次发现GATA4可作为胰腺“炎癌转化”的标志物，深入研究胰腺癌发病的始动环节，从而早期诊断胰腺癌和/或采取措施预防胰腺癌的发生，具有优异的准确度、特异度和灵敏度，具有重要的科学意义和临床价值。
[0020]2、独特的资源优势：拥有胰腺炎及胰腺癌完整随访资料，初步建立了胰腺炎症及胰腺癌患者的血样本和组织样本库，目前共计200余例；并已熟练构建急慢性胰腺炎和原位胰腺癌动物模型。
[0021]3、多学科交叉研究模式：充分发挥临床肿瘤学、生物信息学及分子生物学的研究特点，并进行有机结合，是转化医学多学科交叉研究模式的创新。
[0022]4、系统的深入研究：在既往研究基础上，以转录因子GATA4为切入点，解析胰腺“炎癌转化”的炎症动态基因调控网络，深度挖掘新的关键节点并进行功能研究，在已建立的模式动物和临床样本库中验证，体现了研究的系统性，连续性和深入性。
[0023]5、研究手段的多维性：有机整合临床肿瘤学、分子生物学以及生物信息学方法对胰腺炎恶性转化机制从分子水平到整体层面以及动物模型、临床样本进行多维研究，所得出的结论将更加可信。
附图说明
[0024]附图1是临床标本组织实验流程图。
[0025]附图2是实施例2结果：表明GATA4在胰腺癌组织及细胞中高表达，A：RT
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PC显示
GATA4在胰腺癌组织中表达增加；B：Western
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blot结果显示GATA4在胰腺癌组织中表达上调；C：免疫组化的结果显示GATA4在胰腺癌组织中表达上调；D：免疫荧光检测发现GATA4的水平与CD68水平正相关。
[0026]附图3实施例3结果，该实验用加入不同浓度LPS(0、50、100ng/ml)的诱导THP
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1分化的巨噬细胞培养基LMCM来诱导培养胰腺癌细胞，结果表明巨噬细胞培养基促进胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭，A:CCK
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8实验证实巨噬细胞培养基促进胰腺癌细胞增殖；B、C:克隆形成实验证实巨噬细胞培养基促进胰腺癌细胞克隆形成；以及Transwell细胞迁移及侵袭能力实验证实巨噬细胞培养基促进胰腺癌细胞迁移及侵袭能力增强。
[0027]附图4是实施例3结果：表明GATA4在胰腺癌细胞中高表达本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.GATA4作为诊断标志物在制备鉴别胰腺炎或胰腺癌炎症调节试剂或试剂盒中的应用。2.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨丽娟，蒋魏亮，陈聪颖，黄丽，沈杰，
申请(专利权)人：上海市第一人民医院，
类型：发明
国别省市：