一种骨肉瘤分子标记物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种骨肉瘤分子标记物及其应用，该骨肉瘤分子标记物为纺锤体和中心粒相关蛋白1，所述纺锤体和中心粒相关蛋白1的氨基酸序列如SEQ ID No：1所示。经组织测序发现具有SEQ ID No：1氨基酸序列的纺锤体和中心粒相关蛋白1在骨肉瘤组织中的表达量明显高于正常骨组织，在敲低该蛋白后，骨肉瘤增殖及侵袭迁移受到明显抑制且凋亡增加，从而使得该分子标志物可以作为骨肉瘤的标记物，在骨肉瘤发生早期起到辅助诊断骨肉瘤的作用，使患者可以得到及时治疗，防止了骨肉瘤转移的问题。防止了骨肉瘤转移的问题。防止了骨肉瘤转移的问题。

【技术实现步骤摘要】
一种骨肉瘤分子标记物及其应用


[0001]本专利技术属于生物医学
，具体地说涉及一种骨肉瘤分子标记物及其应用。

技术介绍

[0002]骨肉瘤是骨恶性肿瘤中最多见的一种，骨肿瘤从间质细胞系发展而来，肿瘤迅速生长是由于肿瘤经软骨阶段直接或间接形成肿瘤骨样组织和骨组织，骨肿瘤主要出现在较长的骨骼和少部分软组织，主要发病人群集中在10
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20岁的青少年，存在发病率和早期转移率高、治愈生存率低的特点，早期转移率高的主要表现体现在肺部转移早，肺转移灶对现有化疗药物不敏感，是骨肿瘤致死率高的一大重要原因。目前，骨肉瘤的诊断手段主要包括X
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射线、核磁共振、血管造影、断层摄影灯，但这些手段往往存在较为严重的滞后性，导致患者病情延误，错过最佳治疗时机。
[0003]因此，寻找一种可早期诊断骨肉瘤的手段成为当前亟待解决的技术问题，随着生物医学的不断发展，分子诊断和靶向治疗为了骨肉瘤的诊疗提供了新的思路，分子标记物的存在或量变起到协助判断肿瘤性质的作用，为肿瘤的诊断和治疗提供指导，目前，可用于协助诊断骨肉瘤的标记物并不多，有必要寻找更多的标志物以为骨肉瘤的临床诊断提供参考。

技术实现思路

[0004]为此，本专利技术所要解决的技术问题在于现有技术中诊断骨肉瘤的手段存在一定滞后性，从而提出一种骨肉瘤诊疗分子标记物及其应用。
[0005]为解决上述技术问题，本专利技术的技术方案为：本专利技术提供一种骨肉瘤分子标记物，所述骨肉瘤分子标记物为纺锤体和中心粒相关蛋白1，所述纺锤体和中心粒相关蛋白1的氨基酸序列如SEQ ID No：1所示。
[0006]作为优选，所述纺锤体和中心粒相关蛋白1在骨肉瘤组织中高表达。
[0007]本专利技术还提供一种所述的分子标记物在制备骨肉瘤辅助诊断产品中的应用。
[0008]作为优选，所述骨肉瘤的细胞系为143B、HOS。
[0009]作为优选，所述辅助诊断产品为试剂盒或试纸。
[0010]本专利技术还提供一种所述的分子标记物作为靶标在筛选抗骨肉瘤药物中的应用。
[0011]本专利技术另一方面提供一种抑制所述分子标记物表达的shRNA，所述shRNA的基因序列如SEQ ID No：2所示。
[0012]本专利技术还提供一种所述的shRNA在制备治疗骨肉瘤的药物中的应用。
[0013]作为优选，所述药物为化合物，所述药物用于抑制骨肉瘤细胞的增殖或转移。
[0014]本专利技术的上述技术方案相比现有技术具有以下优点：（1）本专利技术提供的骨肉瘤分子标记物，该骨肉瘤分子标记物为纺锤体和中心粒相关蛋白1，所述纺锤体和中心粒相关蛋白1的氨基酸序列如SEQ ID No1所示。经组织测序发现具有SEQ ID No1氨基酸序列的纺锤体和中心粒相关蛋白1在骨肉瘤组织中的表达量明显
高于正常骨组织，在敲低该蛋白后，骨肉瘤增殖及侵袭迁移受到明显抑制且凋亡增加，从而使得该分子标志物可以作为骨肉瘤的标记物，在骨肉瘤发生早期起到辅助诊断骨肉瘤的作用，使患者可以得到及时治疗，防止了骨肉瘤转移的问题。
[0015]（2）本专利技术提供的shRNA，其可以抑制纺锤体和中心粒相关蛋白1的表达，进而可以用于治疗骨肉瘤的药物。
附图说明
[0016]为了使本专利技术的内容更容易被清楚的理解，下面根据本专利技术的具体实施例并结合附图，对本专利技术作进一步详细的说明，其中图1（a）是骨肉瘤及正常骨组织中基因表达的情况；图1（b）是高表达SPICE1骨肉瘤患者和低表达SPICE1骨肉瘤患者的总生存期的K
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M曲线；图1（c）是高表达SPICE1骨肉瘤患者和低表达SPICE1骨肉瘤患者的非进展生存期的K
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M曲线；图2（a）
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（b）是CCK
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8实验检测HOS细胞及143B细胞敲低组及对照组增殖情况检测结果；图3是平板克隆形成实验检测HOS细胞及143B细胞敲低组及对照组克隆形成情况的检测结果；图4是流式凋亡实验检测HOS细胞及143B细胞敲低组及对照组细胞情况的检测结果；图5是迁移实验检测HOS细胞及143B细胞敲低组及对照组迁移情况的检测结果；图6是侵袭实验检测HOS细胞及143B细胞敲低组及对照组侵袭情况的检测结果；图7是shRNA重组表达载体及对照组的病毒敲低q
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PCR检测结果；图8是shRNA重组表达载体及对照组的病毒敲低western blotting检测结果。
具体实施方式
[0017]实施例1本实施例提供一种骨肉瘤分子标记物，具体地，该骨肉瘤分子标记物为纺锤体和中心粒相关蛋白1（Spindle and centriole
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associated protein 1, SPICE1），SPICE1是一种定位于有丝分裂中的纺锤形微管和整个细胞周期中的中心粒的蛋白质，且SPICE1是有丝分裂中中心粒复制、两极纺锤体形成和染色体聚集所需的调节因子，其氨基酸序列如SEQ ID No：1所示：MSFVRVNRCGPRVGVRKTPKVKKKKTSVKQEWDNTVTDLTVHRATPEDLVRRHEIHKSKNRALVHWELQEKALKRKWRKQKPETLNLEKRRLSIMKEILSDQYQMQDVLEKSDHLIAAAKELFPRRRTGFPNVTVAPDSSQGPIVVNQDPITQSIFNESVIEPQALNDVDGEEEGTVNSQSGESENENELDNSLNSQSNTNTDRFLQQLTEENFELISKLWTDIQQKIATQSQITPPGTPSSALSSGEQRAALNATNAVKRLQTRLQPEESTETLDSSYVVGHVLNSRKQKQLLNKVKRKPNLHALSKPKKNISSGSTTSADLPNRTNSNLDVLKHMIHEVEHEMEEYERWTGREVKGLQSSQGLTGFTLSLVSSLCRLVRYLKESEIQLRKEVETRQQLEQVLGDHRELIDALTAEILRLREENAATQARLQQYMVTTDEQLISLTHAIKNCPVINNRQEIQASESGATGRRVMDSPERPVVNANVSVPLMFREEVAEFPQEELPVKLSQVPDPPDNMNLAKN
FPAHIFEPAVLLTPPRQKSNLKFSPLQDVLRRTVQTRPAPRLPPTVEIIEKEQNWEEKTLPIDTDIQNSSEENRLFTQRWRVSHMGEDLENKTQAPFVNLSQPLCNSHSNTQQSRSPTFSEELPVLGDGQQLRTNESLIQRKDIMTRIADLTLQNSAIKAHMNNIIEPRGEQGDGLRELNKQESASDMTSTFPVAQSLTPGSMEERIAELNRQSMEARGKLLQLIEQQKLVGLNLSPPMSPVQLPLRAWTEGAKRTIEVSIPGAEAPESSKCSTVSPVSGINTRRSSGATGNSCSPLNATSGSGRFTPLNPRAK本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种骨肉瘤分子标记物，其特征在于，所述骨肉瘤分子标记物为纺锤体和中心粒相关蛋白1，所述纺锤体和中心粒相关蛋白1的氨基酸序列如SEQ ID No：1所示。2.根据权利要求1所述的骨肉瘤分子标记物，其特征在于，所述纺锤体和中心粒相关蛋白1在骨肉瘤组织中高表达。3.一种如权利要求1或2所述的分子标记物在骨肉瘤辅助诊断产品中的应用。4.根据权利要求3所述的应用，所述骨肉瘤的细胞系为143B、HOS。5.根据权利要求3所述的应用，...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘志礼，童未来，刘家明，谢新生，
申请(专利权)人：南昌大学第一附属医院，
类型：发明
国别省市：