【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医学材料，具体涉及一种靶向成纤维细胞的抗纤维化纳米材料及其制备方法和应用。
技术介绍
1、肩周炎作为一种常见的肌肉骨骼疾病，以肩关节活动受限和疼痛为特征，该疾病影响总人口的2％-5％，并且可持续数年，导致残疾并增加身体和精神负担。在患有糖尿病等全身性疾病的患者中，肩周炎的发生率可达20％。研究报道，关节囊纤维化、增厚、僵硬是肩周炎的典型表现。从微观上看，这些变化是由活化的成纤维细胞驱动的，成纤维细胞是一组非血液造血结构细胞，参与维持组织结构、发育和损伤后修复；但是，一旦异常激活，成纤维细胞变得更具迁移、增殖和收缩能力，主要负责合成细胞外基质和重塑组织，导致肩关节囊中胶原蛋白合成过多，最终导致进行性有限的被动rom(关节活动范围)。然而，成纤维细胞激活的病理机制仍不清楚，如何治疗/预防肩周炎仍然是一个挑战。
2、对于肩周炎，目前流行的治疗方法有：患者通过口服或注射抗炎药物消除炎症，以阻止纤维化过程；通过体育锻炼来软化僵硬的关节囊，但只有部分患者对前述治疗方法有反应。研究统计，在三分之一的病例中，肩周炎无法恢复并慢性进展，而在这个阶段，唯一有效的方法就是手术。此外，与类固醇、透明质酸、蜂毒等种类丰富的抗炎药物相比，临床上仍缺乏基于其他机制(比如直接抗纤维化)发挥有效预防/治疗肩周炎作用的药物。
3、因此，寻找并开发新型治疗剂以提供更多治疗选择是本领域亟需解决的问题。
技术实现思路
1、针对上述提出的现有技术缺乏基于其他机制(比如直接抗纤维化)发
2、为达到上述目的，本专利技术公开了一种靶向成纤维细胞的抗纤维化纳米材料，所述纳米材料包括mir-122上调剂、plga纳米微球和成纤维细胞膜，所述mir-122上调剂包埋于所述plga纳米微球内，所述成纤维细胞膜包覆于所述plga纳米微球外部；其中，所述成纤维细胞膜由成纤维细胞经激活和培养后提取得到。
3、优选地，所述mir-122上调剂包括：mir-122、mir-122模拟体、mir-122类似物、mir-122修饰物中的至少一种。
4、优选地，所述mir-122类似物为agomir-122，所述agomir-122的核苷酸序列为：5’-uggagugugacaaugguguuug-3’。
5、本专利技术另一方面还提供了一种靶向成纤维细胞的抗纤维化纳米材料的制备方法，包括以下步骤：
6、s1，制备包埋药物分子的plga纳米微球：
7、将mir-122上调剂与含有plga的二氯甲烷溶液混合，超声处理，形成一次乳化液；所述一次乳化液加入到1％胆酸钠溶液中，超声处理，形成二次乳化液；所述二次乳化液加入到1％胆酸钠溶液中，搅拌3h-5h，得到所述包埋药物分子的plga纳米微球；
8、s2，收集成纤维细胞膜：
9、成纤维细胞进行激活、培养处理，在成纤维细胞80％融合的情况下，收获细胞并匀浆；匀浆液在4℃、2000g条件下离心10min，去除细胞核；分离液在4℃，21000g条件下离心30min，分离得到成纤维细胞膜；
10、s3，用所述成纤维细胞膜包封包埋有药物分子的plga纳米微球：
11、将步骤s1产物与步骤s2得到的成纤维细胞膜混合，通过挤出法得到成纤维细胞膜包封的包埋有药物分子的plga纳米微球，即所述抗纤维化纳米材料。
12、优选地，使用200nm孔径的滤器挤压，混合所述包埋有药物分子的plga纳米微球和成纤维细胞膜。
13、优选地，所述mir-122上调剂包括agomir-122。
14、本专利技术另一方面还提供了前述抗纤维化纳米材料、前述制备方法制得的抗纤维化纳米材料在制备预防、改善和/或治疗关节纤维化相关疾病的药物中的应用。
15、优选地，所述关节纤维化相关疾病包括：肩周炎、冻结肩。
16、本专利技术另一方面还提供了mir-122上调剂在制备预防、改善和/或治疗关节纤维化相关疾病的药物中的应用。
17、本专利技术另一方面还提供了mir-122作为靶点在制备用于预防、改善和/或治疗关节纤维化相关疾病的筛药模型中的应用。
18、相对于现有技术，本专利技术的有益效果至少包括：
19、1、本专利技术首次发现mir-122可以抑制成纤维细胞的活力、增殖能力和成纤维能力等，并基于此发现，提供mir-122作为靶点在制备用于预防、改善和/或治疗关节纤维化相关疾病的筛药模型中的应用，以及mir-122上调剂在制备预防、改善和/或治疗关节纤维化相关疾病的药物中的应用，填补了目前治疗肩周炎的药物中没有直接抗纤维化药物的市场空白。
20、2、本专利技术经实验证实了mir-122类似物agomir-122的抗纤维化作用，将其包埋于plga纳米颗粒中，构建得到agomir-122@np纳米材料；进一步用激活的成纤维细胞的细胞膜包封agomir-122@np，得到的agomir-122@mnp纳米材料更容易被激活的成纤维细胞吸收，并且能够逃脱巨噬细胞的吞噬，因而能高效靶向激活的成纤维细胞以抑制成纤维细胞的纤维化。此外，本专利技术还通过使用预防性和治疗性小鼠模型，确认了agomir-122@mnp材料不仅可以抑制关节纤维化的形成，还可以改善已有的关节纤维化。
21、3、本专利技术纳米材料制备工艺简单，来源易得，有利于临床推广和应用。
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1.一种靶向成纤维细胞的抗纤维化纳米材料，其特征在于，所述纳米材料包括miR-122上调剂、PLGA纳米微球和成纤维细胞膜，所述miR-122上调剂包埋于所述PLGA纳米微球内，所述成纤维细胞膜包覆于所述PLGA纳米微球外部；
2.如权利要求1所述的靶向成纤维细胞的抗纤维化纳米材料，其特征在于，所述miR-122上调剂包括：miR-122、miR-122模拟体、miR-122类似物、miR-122修饰物中的至少一种。
3.如权利要求3所述的靶向成纤维细胞的抗纤维化纳米材料，其特征在于，所述miR-122类似物为Agomir-122，所述Agomir-122的核苷酸序列为：5’-UGGAGUGUGACAAUGGUGUUUG-3’。
4.一种靶向成纤维细胞的抗纤维化纳米材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，使用200nm孔径的滤器挤压，混合所述包埋有药物分子的PLGA纳米微球和成纤维细胞膜。
6.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述miR-122上调剂包括Agomir
7.权利要求1-3中任一项所述抗纤维化纳米材料、权利要求4-6中任一项所述制备方法制得的抗纤维化纳米材料在制备预防、改善和/或治疗关节纤维化相关疾病的药物中的应用。
8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述关节纤维化相关疾病包括：肩周炎、冻结肩。
9.miR-122上调剂在制备预防、改善和/或治疗关节纤维化相关疾病的药物中的应用。
10.miR-122作为靶点在制备用于预防、改善和/或治疗关节纤维化相关疾病的筛药模型中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种靶向成纤维细胞的抗纤维化纳米材料，其特征在于，所述纳米材料包括mir-122上调剂、plga纳米微球和成纤维细胞膜，所述mir-122上调剂包埋于所述plga纳米微球内，所述成纤维细胞膜包覆于所述plga纳米微球外部；
2.如权利要求1所述的靶向成纤维细胞的抗纤维化纳米材料，其特征在于，所述mir-122上调剂包括：mir-122、mir-122模拟体、mir-122类似物、mir-122修饰物中的至少一种。
3.如权利要求3所述的靶向成纤维细胞的抗纤维化纳米材料，其特征在于，所述mir-122类似物为agomir-122，所述agomir-122的核苷酸序列为：5’-uggagugugacaaugguguuug-3’。
4.一种靶向成纤维细胞的抗纤维化纳米材料的制备方法，其特征在于，包括以...
【专利技术属性】
技术研发人员：孙亚英，陈疾忤，罗智文，彭振，
申请(专利权)人：上海市第一人民医院，
类型：发明
国别省市：
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