【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药领域，更具体地，本专利技术涉及sema3c-(nrp1/nrp2)～gas6-axl及其在制备甲突眼病治疗药物中的应用。
技术介绍
1、甲突眼病(thyroid eye disease，ted)，是一种复杂的自身免疫性疾病，伴有视力威胁和眼眶容貌影响，对患者及其家属造成相当大的身心负担。活动期ted患者一般呈现炎症，当进展到以纤维化为特征的非活动期时，患者会出现眼球运动异常甚至视力丧失，给其生活质量产生极大影响。目前的治疗，包括类固醇治疗，针对活动性ted的放射治疗，以及针对非活动性ted的眼眶减压手术，都不能预防纤维化进展，还有可能留下一些与健康相关的全身性不良反应。因此，纤维化仍然是ted非活动期患者和临床医生面临的主要难题。
2、ted纤维化发病机制的现有研究表明，眼眶成纤维细胞(orbital fibroblasts,ofs)受到分泌因素的刺激，例如转化生长因子-β(tgfβ)，或细胞-细胞与免疫细胞的直接接触或浸润，从而产生过多的细胞外基质(extracellular matrix,ecm)，而ecm的过度生成进而产生了大量的胶原纤维。作为一种自身免疫性疾病，在与of相互作用时，免疫应答已被证明参与纤维化的整个过程。据记载，ted中的ofs导致t细胞募集是炎症开始的关键步骤。t细胞被认为通过分泌共刺激分子，粘附分子和细胞因子(包括ifnγ，il-1β和tnfα)等导致炎症的进展。巨噬细胞作为一种促纤维化细胞已被发现在皮下和内脏脂肪组织库中可以被激活，最终导致脂肪组织的纤维化。除此之外，
3、本领域中，成熟可靠的甲突眼病治疗药物基本上没有，2020年fda批准了一种相关药物，但是并没有证据证明其能够缓解纤维化。因此，尽管纤维化是甲突眼病的重要病理特征，但却尚无fda批准的有效药物。
4、探究特异性抑制axl通路，是否能够通过抑制纤维化从而预防或治疗甲突眼病，对于深入了解甲突眼病在非活动期的机制，从而预防或治疗甲突眼病，提高患者的生活质量具有重要的意义。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种sema3c-(nrp1/nrp2)～gas6-axl通路及其在制备甲突眼病治疗药物中的应用。
2、在本专利技术的第一方面，提供sema3c-(nrp1/nrp2)～gas6-axl信号通路的调控剂(如下调剂或抑制剂)的用途，用于制备抑制(包括预防、缓解或治疗)眼眶脂肪组织纤维化症或抑制(包括预防、缓解或治疗)甲突眼病的药物组合物；
3、其中，所述的调控剂选自：抑制或下调dpp4+细胞中sema3c表达、活性或分泌的调控剂，抑制或下调m2巨噬细胞中nrp1/nrp2表达或活性的调控剂，抑制或下调sema3c与nrp1/nrp2结合的调控剂，抑制或下调dpp4+细胞与m2巨噬细胞相互作用的调控剂，抑制或下调gas6-axl作用于dpp4+细胞的调控剂；所述dpp4+细胞为具有纤维化分化潜能的眼眶脂肪组织细胞群。
4、在一种或多种实施方式中，所述dpp4+细胞为分离自svf细胞的dapi-/cd31-/cd45-/pdgfra+/dpp4+细胞。
5、在一种或多种实施方式中，所述dpp4+细胞存在于眼眶内脂肪组织。
6、在一种或多种实施方式中，所述dpp4+细胞存在于眼眶内脂肪组织来源的基质血管成分(svf)细胞中。
7、在一种或多种实施方式中，所述抑制甲突眼病甲突眼病。
8、在一种或多种实施方式中，所述sema3c-(nrp1/nrp2)～gas6-axl信号通路中，通路基因及通路蛋白来源于人或非人动物(如猴、小鼠、大鼠、兔、羊、猪等)；较佳地为人源的(如重组表达人源的基因/蛋白)。
9、在一种或多种实施方式中，所述dpp4+细胞或m2巨噬细胞来源于人或非人动物(如猴、小鼠、大鼠、兔、羊、猪等)；较佳地为人源的(如重组表达人源的基因/蛋白)。
10、在一种或多种实施方式中，所述抑制或下调dpp4+细胞中sema3c表达、活性或分泌的调控剂包括：敲除或沉默sema3c基因的试剂，抑制sema3c蛋白活性的试剂；较佳地，包括：针对sema3c基因的crispr基因编辑试剂、同源重组试剂或定点突变试剂、所述试剂将sema3c进行功能丧失性突变，特异性干扰sema3c基因表达的干扰分子，sema3c蛋白的小分子抑制剂；或
11、所述抑制或下调m2巨噬细胞中nrp1/nrp2表达或活性的调控剂包括：敲除或沉默nrp1/nrp2基因的试剂，抑制nrp1/nrp2蛋白活性的试剂；较佳地，包括：针对nrp1/nrp2基因的crispr基因编辑试剂、同源重组试剂或定点突变试剂、所述试剂将nrp1/nrp2进行功能丧失性突变，特异性干扰nrp1/nrp2基因表达的干扰分子，nrp1/nrp2蛋白的小分子抑制剂；或
12、所述抑制或下调sema3c与nrp1/nrp2结合的调控剂包括：竞争性结合于nrp1/nrp2的试剂，竞争性与sema3c结合的试剂，从而阻止或减少sema3c结合于nrp1/nrp2；下调sema3c表达、活性或分泌的调控剂(如下调剂或抑制剂)；下调nrp1/nrp2表达或活性的调控剂；或
13、所述抑制或下调gas6-axl作用于dpp4+细胞的调控剂包括：下调gas6或axl表达、活性的调控剂；较佳地，包括：敲除或沉默gas6或axl基因的试剂，抑制gas6或axl蛋白活性的试剂；较佳地，包括：针对gas6或axl基因的gas6或axl基因编辑试剂、同源重组试剂或定点突变试剂、所述试剂将gas6或axl进行功能丧失性突变，特异性干扰gas6或axl基因表达的干扰分子，gas6或axl蛋白的小分子抑制剂；
14、所述抑制或下调dpp4+细胞与m2巨噬细胞相互作用的调控剂包括：抑制sema3c与nrp1/nrp2结合的调控剂，下调sema3c表达、活性或分泌的调控剂；下调nrp1/nrp2表达或活性的调控剂。
15、在一种或多种实施方式中，所述下调nrp1/nrp2表达或活性的调控剂为crispr基因编辑试剂，其敲除nrp1/nrp2；较佳地其sgrna序列为：其正向序列如seq id no:1所示，其反向序列如seq id no:2所示。
16、在一种或多种实施方式中，所述gas6或axl蛋白的小分子抑制剂为式(i)所示母核结构的化合物或其异构体、衍生物、溶剂合物或前体，或它们的药学上可接受的盐，组合物或药物组合物(tp0903)；
17、
18、在一种或多种实施方式中，眼眶内脂肪组织中dpp4+细胞表达sema3c，sema本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.SEMA3C-(NRP1/NRP2)～GAS6-AXL信号通路的调控剂的用途，用于制备抑制眼眶脂肪组织纤维化症或抑制甲突眼病的药物组合物；
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述抑制或下调DPP4+细胞中SEMA3C表达、活性或分泌的调控剂包括：敲除或沉默SEMA3C基因的试剂，抑制SEMA3C蛋白活性的试剂；较佳地，包括：针对SEMA3C基因的CRISPR基因编辑试剂、同源重组试剂或定点突变试剂、所述试剂将SEMA3C进行功能丧失性突变，特异性干扰SEMA3C基因表达的干扰分子，SEMA3C蛋白的小分子抑制剂；或
3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述下调NRP1/NRP2表达或活性的调控剂为CRISPR基因编辑试剂，其敲除NRP1/NRP2；较佳地其sgRNA序列为：其正向序列如SEQ ID NO:1所示，其反向序列如SEQ ID NO:2所示。
4.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述GAS6或AXL蛋白的小分子抑制剂为式(I)所示母核结构的化合物或其异构体、衍生物、溶剂合物或前体，或它们的药学上可接受的盐，组合物或药
5.如权利要求1所述的用途，其特征在于，眼眶内脂肪组织中DPP4+细胞表达SEMA3C，SEMA3C与NRP1/NRP2结合、招募表达NRP1/NRP2的M2巨噬细胞，M2巨噬细胞中GAS6作用于DPP4+细胞AXL受体使之纤维化分化，形成眼眶脂肪组织纤维化症或甲突眼病；较佳地，所述调控剂通过精细化的空间调控方式实施干预，或
6.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的甲突眼病包括：眼睑肿胀、眼睑退缩、上睑迟落、眼睑闭合不全、眼球突出、出现暴露性角膜炎、压迫性视神经病变、继发性青光眼、视功能减退或丧失、失明。
7.SEMA3C-(NRP1/NRP2)～GAS6-AXL信号通路的用途，用于筛选抑制眼眶脂肪组织纤维化症或甲突眼病的物质；较佳地，所述的SEMA3C-(NRP1/NRP2)～GAS6-AXL信号通路中，SEMA3C由眼眶内脂肪组织中DPP4+细胞表达，NRP1/NRP2由M2巨噬细表达，SEMA3C与NRP1/NRP2结合使得DPP4+细胞与M2巨噬细胞相互作用，M2巨噬细胞中GAS6作用于DPP4+细胞AXL受体使之纤维化分化，形成眼眶脂肪组织纤维化症或甲突眼病。
8.一种筛选抑制眼眶脂肪组织纤维化症或甲突眼病的物质的方法，其特征在于，所述方法包括：
9.一种眼眶脂肪组织纤维化症或甲突眼病的疾病模型体系，其特征在于，该疾病模型体系为细胞模型体系，包括DPP4+细胞及M2巨噬细胞，两者混合且相互作用；
10.一种制备眼眶脂肪组织纤维化症或甲突眼病的疾病模型体系的方法，其特征在于，所述疾病模型体系为细胞模型体系，所述方法包括：将DPP4+细胞及M2巨噬细胞进行混合，从而两者相互作用，形成细胞模型体系；或
...【技术特征摘要】
1.sema3c-(nrp1/nrp2)～gas6-axl信号通路的调控剂的用途，用于制备抑制眼眶脂肪组织纤维化症或抑制甲突眼病的药物组合物；
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述抑制或下调dpp4+细胞中sema3c表达、活性或分泌的调控剂包括：敲除或沉默sema3c基因的试剂，抑制sema3c蛋白活性的试剂；较佳地，包括：针对sema3c基因的crispr基因编辑试剂、同源重组试剂或定点突变试剂、所述试剂将sema3c进行功能丧失性突变，特异性干扰sema3c基因表达的干扰分子，sema3c蛋白的小分子抑制剂；或
3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述下调nrp1/nrp2表达或活性的调控剂为crispr基因编辑试剂，其敲除nrp1/nrp2；较佳地其sgrna序列为：其正向序列如seq id no:1所示，其反向序列如seq id no:2所示。
4.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述gas6或axl蛋白的小分子抑制剂为式(i)所示母核结构的化合物或其异构体、衍生物、溶剂合物或前体，或它们的药学上可接受的盐，组合物或药物组合物；
5.如权利要求1所述的用途，其特征在于，眼眶内脂肪组织中dpp4+细胞表达sema3c，sema3c与nrp1/nrp2结合、招募表达nrp1/nrp2的m2巨噬细胞，m2巨噬细胞中gas6作用于dpp4+细胞axl受体使之纤维化分化，形...
【专利技术属性】
技术研发人员：张芳，钱江，孙晓东，英慧，
申请(专利权)人：上海市第一人民医院，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。