抑制ZNF32基因表达在制备结直肠癌药物中的应用制造技术

本发明专利技术公布了抑制ZNF32基因表达在制备结直肠癌治疗药物中的应用，发现ZNF32在结直肠癌中表达量较高，且与患者的不良预后有关，抑制ZNF32基因表达能够明显抑制结直肠细胞的生长繁殖、干性形成、克隆形成，并促进细胞凋亡，此外抑制ZNF32基因还能提高结直肠癌细胞的化疗敏感性，使化疗药物对结直肠癌细胞的DNA损伤作用更强。ZNF32不仅结直肠癌的基因治疗提供新的靶标和肿瘤治疗提供新的策略，而且能作为化疗后复发或手术后转移的结肠癌的预后标志物。志物。志物。

【技术实现步骤摘要】
抑制ZNF32基因表达在制备结直肠癌药物中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及抑制ZNF32基因表达在制备结直肠癌药物中的应用。

技术介绍

[0002]CRC(Colorectal Cancer,结肠直肠癌)是全球第三大常见的恶性肿瘤，其死亡率居全球恶性肿瘤的第四位。近年来，结直肠癌发病率呈逐年上升趋势。目前，结直肠癌的治疗方式包括外科手术、放疗、全身化疗、靶向治疗和免疫治疗。近年来，尽管结直肠癌的辅助化疗取得了长足的发展，肿瘤细胞仍不可避免地发生耐药从而导致治疗的失败，最终出现转移和复发。迄今为止，已经研究证实的肿瘤耐药机制主要有如下几点：(1)抑制抗肿瘤药物的累积和滞留，增加药物的外排；(2)抗肿瘤药物靶点和信号转导分子发生突变；(3)药物诱导的DNA损伤发生修复；(4)肿瘤微环境：在多种分子信号通路的介导下，损伤的肿瘤细胞从周围微环境中得到代偿和修复，并改变了原来的生物学特性。据统计，结直肠癌患者对全身化疗的反应率接近50％，但几乎所有患者均会产生耐药性。因此，发现和确定新型的药物靶点对有效治疗结直肠癌和克服其放化疗耐药有极其重要的意义。
[0003]ZNF32(Zinc fingerprotein 32，锌指蛋白32)定位于10q23
‑
q24染色体上[24]，具有Cys2
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His2锌指结构，是KLF(Kruppel
‑
Like Factor,Kr
ü
ppel样转录因子)家族重要成员之一，其具有维持线粒体膜电位并增强对氧化应激的细胞防御作用。此外，多项研究发现ZNF32在正常的生物学过程和恶性肿瘤的发生发展至关重要，也有研究表明ZNF32影响肿瘤耐药，但ZNF32是否参与结直肠癌发生发展中的作用以及耐药的分子机制尚未被揭示。

技术实现思路

[0004]为了证实ZNF32是否参与结直肠癌发生发展以及耐药的过程，本专利技术涉及抑制ZNF32基因表达在治疗结直肠癌中的应用，为结直肠癌带来新的治疗靶点及治疗手段。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术通过以下技术方案实现：
[0006]本专利技术的第一方面，提供了抑制ZNF32基因表达在制备结直肠癌治疗药物中的应用。
[0007]本专利技术第二方面，提供抑制ZNF32基因表达在制备诱导结直肠癌细胞凋亡药物中的应用。
[0008]本专利技术第三方面，提供抑制ZNF32基因表达在制备抑制结直肠癌细胞的干性药物中的应用。
[0009]本专利技术第四方面，提供抑制ZNF32基因表达在制备结直肠癌化疗药物敏感性促进剂中的应用。
[0010]在一个优选的实施方案中，所述结直肠癌化疗药物包括奥沙利铂或卡培他滨。
[0011]本专利技术第五方面，提供抑制ZNF32基因表达在制备结直肠癌化疗药物耐药性逆转剂中的应用。
[0012]在一个优选的实施方案中，所述结直肠癌化疗药物包括奥沙利铂或卡培他滨。
[0013]本专利技术第六方面，提供抑制ZNF32基因表达在制备抑制结直肠癌细胞的增殖药物中的应用。
[0014]本专利技术第七方面，提供抑制ZNF32基因表达在制备抑制结直肠癌细胞的克隆形成药物中的应用。
[0015]在一个优选的实施方案中，抑制ZNF32基因表达的方式/方法包括ZNF32的抗体、siRNA、shRNA、ZNF32的活性抑制剂以及敲除或敲低ZNF32基因的小分子物质。
[0016]本专利技术第八方面，提供一种结直肠癌治疗药物，包含对ZNF32基因表达具有抑制作用的因子。
[0017]本专利技术第九方面，提供一种结直肠癌治疗药物，为对ZNF32基因表达具有抑制作用的因子与至少一种结肠癌化疗药物的组合，所述结肠癌化疗药物包括奥沙利铂或卡培他滨。
[0018]本专利技术收集12例接受新辅助化疗的敏感和耐药结直肠癌新鲜组织，进行RNA转录组测序，筛选出耐药组织中显著高表达的基因ZNF32，进一步在公共数据库中进行验证了这一结论。通过蛋白印迹、实时定量PCR实验检测ZNF32基因在结直肠癌细胞系中的表达；CCK
‑
8、细胞干性形成、克隆形成、细胞流式等手段检测敲低ZNF32对结直肠癌细胞发生发展以及耐药的影响，证明ZNF32促进结直肠癌的生长增殖、干性形成、克隆形成，并从增殖、干性形成的角度证明其促进奥沙利铂和卡培他滨化疗耐药。
[0019]本专利技术的有益效果如下：
[0020]本申请发现ZNF32在结直肠癌中表达量较高，且与患者的不良预后有关，抑制ZNF32基因表达能够明显抑制结直肠细胞的生长繁殖、干性形成、克隆形成，并促进细胞凋亡，此外抑制ZNF32基因还能提高结直肠癌细胞的化疗敏感性，使化疗药物对结直肠癌细胞的DNA损伤作用更强。ZNF32不仅结直肠癌的基因治疗提供新的靶标和肿瘤治疗提供新的策略，而且能作为化疗后复发或手术后转移的结肠癌的预后标志物。
附图说明
[0021]图1为ZNF32在结直肠癌中表达结果与预后相关的结果图；
[0022]图2为ZNF32在结直肠癌细胞系中的表达结果图；
[0023]图3为敲低ZNF32后肿瘤细胞增殖和克隆形成的结果图；
[0024]图4为敲低ZNF32后细胞干性形成的结果图；
[0025]图5为敲低ZNF32后诱导结直肠癌细胞凋亡的结果图；
[0026]图6为敲低ZNF32后结肠癌细胞的化疗敏感性的结果图；
[0027]图7为敲低ZNF32后化疗药物对结肠癌细胞的DNA损伤的结果图。
具体实施方式
[0028]下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0029]此外，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本专利技术的描述中，“多个”的含义是两个或两个以上，除非另有明确具体的限定。
[0030]在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示意性实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本公开的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。
[0031]实验材料
[0032](1)临床病例组织：收集12例接受XELOX(Capecitabine+Oxaliplatin,卡培他滨+奥沙利铂)方案新辅助化疗的I
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III期结肠癌患者的新鲜组织，其中6例患者本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抑制ZNF32基因表达在制备结直肠癌治疗药物中的应用。2.抑制ZNF32基因表达在制备诱导结直肠癌细胞凋亡药物中的应用。3.抑制ZNF32基因表达在制备抑制结直肠癌细胞的干性药物中的应用。4.抑制ZNF32基因表达在制备结直肠癌化疗药物敏感性促进剂中的应用。5.抑制ZNF32基因表达在制备结直肠癌化疗药物耐药性逆转剂中的应用。6.抑制ZNF32基因表达在制备抑制结直肠癌细胞的增殖药物中的应用。7.抑制ZNF32基因表达在制备抑制结直肠癌细胞的克隆形成药物中的应用。8.根据权利要求1
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【专利技术属性】
技术研发人员：邓务国，隋思蕾，李振江，肖比苍，
申请(专利权)人：湖南灵康医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：