一种黑色素瘤治疗药物组合物及其应用制造技术

本发明专利技术公布了一种黑色素瘤治疗药物组合物及其应用，发现褪黑素与靶向BRAF抑制剂联合使用能够治疗黑色素瘤，具体表现为能够抑制黑色素瘤细胞增殖、细胞迁移和侵袭，而且能促进黑色素瘤细胞的凋亡和抑制黑色素瘤细胞的干性，因此褪黑素和靶向BRAF抑制剂组合使用，可作为治疗黑色素瘤的一种有前途的治疗策略。作为治疗黑色素瘤的一种有前途的治疗策略。作为治疗黑色素瘤的一种有前途的治疗策略。

【技术实现步骤摘要】
一种黑色素瘤治疗药物组合物及其应用


[0001]本专利技术属于分子生物检测
，具体涉及一种黑色素瘤治疗药物组合物及其应用。

技术介绍

[0002]黑色素瘤是最具威胁性的恶性肿瘤之一，具有很高的转移潜力。尽管近年来，随着组合免疫疗法的出现和广泛应用，黑色素瘤治疗取得了重大进展，但仍需要探索其他治疗方案以获得更好的临床效果，因为对免疫疗法的反应率虽然较高但并不是100％。这可能主要是由于为这些方法选择的抗原不能覆盖肿瘤中存在的全部黑色素瘤细胞的原因。黑色素瘤中癌症干细胞的研究促进了了这种长寿命肿瘤亚群对临床治疗耐药的发生。正常干细胞被认为可以通过几种机制来达到其长寿的目的，其中包括慢速分裂，抗凋亡机制以及可提供毒素保护的外排泵表达，因此探索针对黑色素瘤干细胞治疗的设计将为黑色素瘤的临床治疗提供新的希望。炎症是黑色素瘤肿瘤微环境的重要特征，以前的研究表明，最常见的炎症因素之一，可诱导型一氧化氮合酶(iNOS,Inducible NO synthases)是黑色素瘤肿瘤发生肿瘤生长、侵袭和转移的重要诱因，并且已证明抑制INOS的表达有助于黑色素瘤的治疗。
[0003]在黑色素瘤中最常发生的是BRAF突变，其中V600E是BRAF中最常见的突变，导致恶性黑色素瘤中MAPK(mitogen
‑
activated protein kinase)信号通路过度激活。有文献报道指出，MAPK信号通路参与BRAF的激活：BRAF磷酸化并激活MEK，进而磷酸化并激活ERK。这些反应调节细胞存活，增殖和分化。维拉非尼，一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的小分子抑制剂，上市初期显示了良好的临床反应。不幸的是，维拉非尼的临床应用具有很大的局限性：首先，患者要有BRAF V600突变(主要是V600E)；其次，单用一个靶向药，对多突变疾病的效果不佳，一般需要联合其他药物；还有最难解决的，是靶向药用药一段时间后会出现耐药性，对控制肿瘤复发的效果不佳。维拉非尼耐药性的发展大大削弱了该药在临床上的应用范围。此外，接受维拉非尼治疗的患者很容易出现继发于该药物的严重前葡萄膜炎。造成维拉非尼耐药性的原因，有理论认为，MAPK信号通路的重新激活，通过替代其他信号通路的激活而绕过致癌途径以及其他未知的机制被认为是激酶驱动型癌症发生耐药性的原因。
[0004]褪黑素(N
‑
乙酰基
‑5‑
甲氧基色胺)是松果体分泌的一种普遍存在的生理介质。众所周知，褪黑素是各种目标器官上昼夜节律和季节性生物节律的重要内源同步器。在功能上，褪黑素由于对卵巢癌，人黑色素瘤和乳腺癌等具有显着的抗肿瘤作用而被广泛研究。此外，褪黑素可以诱导癌细胞凋亡并抑制肿瘤转移，血管生成和炎症反应，这表明其潜在的临床应用。褪黑素已显示出通过增强常规抗癌药的功效并同时降低其副作用而在人癌细胞中起有效的联合治疗剂的作用。值得注意的是，褪黑素通过减少干细胞标志物的表达来降低癌细胞的增殖并降低自我更新和克隆形成能力。但是，与褪黑素调节基因表达相关的分子机制仍不清楚。因此，重要的是弄清楚该组合中涉及的潜在分子机制，并发现新的潜在治疗靶标。

技术实现思路

[0005]为了克服现有技术中的问题，本专利技术涉及褪黑素与BRAF抑制剂联合在制备治疗黑色素瘤药物的应用，发现褪黑素通过抑制人黑色素瘤中的iNOS/hTERT信号传导和癌干细胞性状来协同维拉非尼的抗肿瘤作用，因此将褪黑素和靶向BRAF的小分子抑制剂(维拉非尼)组合使用，可作为治疗黑色素瘤的一种有前途的治疗策略。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术通过以下技术方案实现：
[0007]本专利技术的第一方面，提供了褪黑素与BRAF抑制剂联合在制备治疗黑色素瘤药物中的应用。
[0008]本专利技术第二方面，提供了褪黑素与BRAF抑制剂联合在制备抑制黑色素瘤细胞增殖的制剂中的应用。
[0009]同时还提供了褪黑素与BRAF抑制剂联合在制备抑制黑色素瘤细胞迁移的制剂中的应用。
[0010]同时还提供了褪黑素与BRAF抑制剂联合在制备抑制黑色素瘤细胞侵袭的制剂中的应用。
[0011]在一个优选的实施方案中，所述褪黑素通过抑制NF
‑
κB信号通路增强BRAF抑制剂介导的对黑色素瘤细胞增殖、细胞迁移和侵袭的抑制。
[0012]本专利技术第三方面，提供褪黑素与BRAF抑制剂联合在制备促进黑色素瘤细胞凋亡的制剂中的应用。
[0013]在一个优选的实施方案中，所述褪黑素通过细胞色素c/caspase信号传导途径增强BRAF抑制剂介导的黑色素瘤细胞的凋亡。
[0014]本专利技术第四方面，提供褪黑素与BRAF抑制剂在制备抑制黑色素瘤细胞的干性药物中的应用。
[0015]在一个优选的实施方案中，所述褪黑素通过靶向hTERT增强BRAF抑制剂介导的对黑色素瘤细胞的干性抑制。
[0016]在一个优选的实施方案中，所述BRAF抑制剂为维拉非尼。
[0017]在一个优选的实施方案中，所述黑色素瘤包括BRAF突变型黑色素瘤细胞和BRAF野生型黑色素瘤细胞。
[0018]本专利技术第六方面，提供一种黑色素瘤治疗药物组合，包括褪黑素与BRAF抑制剂，所述BRAF抑制剂为维拉非尼。
[0019]本专利技术的有益效果如下：
[0020]本专利技术发现褪黑素与靶向BRAF抑制剂联合使用能够治疗黑色素瘤，具体表现为能够抑制黑色素瘤细胞增殖、细胞迁移和侵袭，而且能促进黑色素瘤细胞的凋亡和抑制黑色素瘤干细胞的干性，因此褪黑素和靶向BRAF抑制剂组合使用，可作为治疗黑色素瘤的一种有前途的治疗策略。
附图说明
[0021]图1为褪黑素增强维拉非尼对黑色素瘤细胞增殖的抑制结果图；
[0022]图2为联合使用维拉非尼和褪黑素增强细胞周期阻滞进而抑制黑色素瘤增殖的结果图；
[0023]图3为褪黑素增强了维拉非尼介导的抑制黑色素瘤细胞迁移和侵袭的能力的结果图；
[0024]图4为褪黑素增强了维拉非尼诱导的细胞凋亡的能力的结果图；
[0025]图5为褪黑素通过细胞色素c/caspase信号传导途径增强了维拉非尼的促凋亡能力的结果图；
[0026]图6为褪黑素通过抑制NF
‑
κB信号通路增强维拉非尼对iNOS表达的抑制的结果图；
[0027]图7为褪黑素在黑色素瘤治疗中增强了维拉非尼介导的iNOS表达抑制的结果图；
[0028]图8为褪黑素通过抑制NF
‑
κB信号通路增强了维拉非尼介导的iNOS表达抑制的结果图；
[0029]图9为褪黑素通过下调黑色素瘤细胞中的hTERT增强维拉非尼介导的对癌症干细胞性状的抑制的结果图；
[0030]图10为褪黑素和维拉非尼的联合使用介导的干性减弱可能是通过靶向hTERT通路的结果图；
[0031]图11为联合使用褪黑素和维拉非尼可抑制p65在hTERT启动子的结合影响其表达的结果图；
[0032]图12为褪黑素本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.褪黑素与BRAF抑制剂联合在制备治疗黑色素瘤药物中的应用。2.褪黑素与BRAF抑制剂联合在制备抑制黑色素瘤细胞增殖、细胞迁移和细胞侵袭的制剂中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述褪黑素通过抑制NF
‑
κB信号通路增强BRAF抑制剂介导的对黑色素瘤细胞增殖、细胞迁移和侵袭的抑制。4.褪黑素与BRAF抑制剂联合在制备促进黑色素瘤细胞凋亡的制剂中的应用。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述褪黑素通过细胞色素c/caspase信号传导途径增强BRAF抑制剂介导的黑色素瘤细胞的凋亡。6.褪黑素与BR...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓务国，郝娇娇，李振江，
申请(专利权)人：湖南灵康医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：