双特异性抗CCL2抗体制造技术

本发明专利技术涉及与人CCL2上两个不同表位结合的双特异性抗CCL2抗体，其药物组合物，它们的制备，和用作治疗癌症、炎性疾病、自身免疫疾病和眼科疾病的药物的用途。和眼科疾病的药物的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】双特异性抗CCL2抗体


[0001]本专利技术涉及与人CCL2上两个不同表位结合的双特异性抗CCL2抗体，其药物组合物，其制备，及用作治疗癌症、炎性疾病、自身免疫病及眼科疾病的药物的用途。

技术介绍

[0002]CCL2/CCR2轴是募集未成熟髓样细胞进入肿瘤的主要介质。CCL2被恶性细胞超表达，并与细胞外基质(ECM)结合，建立了趋化梯度。一旦它们到达肿瘤，髓源性抑制细胞(myeloid
‑
derived suppressive cell，MDSC)通过分泌/上调抗炎细胞因子/受体而反过来抑制抗肿瘤T细胞反应的启动，从而促成原致肿瘤环境。以此方式，MDSC可降低或甚至削弱任何T细胞活化疗法的功效(Meyer等人，2014)。因此，对这些未成熟髓样细胞募集的特异性抑制将提高检查点抑制剂、T细胞双特异性抗体(TCB)或其他癌症免疫疗法(CIT)的功效。此外，CCL2也与促进血管生成、转移和肿瘤生长有关，有建议指出中和CCL2可能有助于多种抗肿瘤干预措施。
[0003]与其受体相反，靶向CCL2将特异性抑制不期望的CCL2介导的作用，从而避免那些可能通过相同受体(CCR2)但不同配体(例如CCL7、CCL8、CCL13)发出的信号，这些信号参与其他免疫细胞群，例如Th1和NK细胞的募集。
[0004]在临床上，在一些针对中和由不同炎性疾病(例如类风湿性关节炎(Haringman等人，Arthritis Rheum.2006Aug；54(8):2387
‑
92)、特发性肺纤维化(Raghu等人，Eur Respir J.2015Dec；46(6)：1740
‑
50)、糖尿病肾病(Menne等人，Nephrol Dial Transplant(2017)32：307
‑
315)和癌症(Sandhu等人，Cancer Chemother Pharmacol.2013Apr；71(4)：1041
‑
50))引起的升高的水平的研究中，CCL2是优选的抗体靶标。然而，其高合成速率与观察到的高体内抗体
‑
抗原解离常数(KD)已被证明是阻碍常规抗体以临床可行剂量抑制游离CCL2的主要障碍(Fetterly等人，J Clin Pharmacol.2013Oct；53(10):1020
‑
7)。
[0005]CCL2中和似乎与血清CCL2水平升高的患者更明显相关，这已在多种类型的癌症中观察到，例如乳腺癌(BC)、卵巢癌(OvCa)、结直肠癌(CRC)、胰腺癌和前列腺癌。然而，即使在这些适应症范围内的患者未表现出这种血清学但其肿瘤被髓系免疫细胞高度浸润，由于如上所述CCL2在肿瘤环境中起到的多种作用，患者可能从此新颖的治疗方法中获益。
[0006]Igawa等人，Immunological Reviews 270(2016)132
‑
151描述扫除(Sweeping)技术，其中，生成的抗体携带pH依赖性CDR(用于酸性内体中的抗体
‑
抗原解离，导致抗原降解)及具有优化等电点(pI)的工程化Fc部分，并增强与FcγRIIb的结合(有利于免疫复合物的细胞摄取)，并与新生儿Fc受体具有中等亲和力，以维持可接受的药物代谢动力学特征。

技术实现思路

[0007]本专利技术涉及与人CCL2上两个不同表位结合的双特异性抗CCL2抗体，其药物组合物，其制备，及用作治疗癌症、炎性疾病、自身免疫病及眼科疾病的药物的用途。
[0008]本专利技术的一个实施例为一种双特异性抗体，其包含与人CCL2上的第一表位(特异
性地)结合的第一抗原结合位点及与人CCL2上的第二不同表位(特异性地)结合的第二不同抗原结合位点，其中，该双特异性抗体包含人IgG同种型的Fc结构域。
[0009]本专利技术的一个实施例为一种双特异性抗体，其包含与人CCL2上的第一表位(特异性地)结合的第一抗原结合位点及与人CCL2上的第二表位(特异性地)结合的第二不同抗原结合位点，
[0010]其中，
[0011]A)i)所述第一抗原结合位点包含
[0012]VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:33的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:34的氨基酸序列；以及(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:35的氨基酸序列；
[0013]以及VL结构域，其包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:36的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列；以及(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:38的氨基酸序列；并且
[0014]ii)所述第二抗原结合位点包含
[0015]VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:41的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列；以及(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:43的氨基酸序列；
[0016]以及VL结构域，其包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:44的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:45的氨基酸序列；以及(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:46的氨基酸序列；
[0017]或者
[0018]B)i)所述第一抗原结合位点包含
[0019]VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:33的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:34的氨基酸序列；以及(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:35的氨基酸序列；
[0020]以及VL结构域，其包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:36的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列；以及(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:38的氨基酸序列；并且
[0021]ii)所述第二抗原结合位点包含
[0022]VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:17的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:18的氨基酸序列；以及(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:19的氨基酸序列；
[0023]以及VL结构域，其包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种双特异性抗体，其包含与人CCL2上的第一表位结合的第一抗原结合位点以及与人CCL2上的第二不同表位结合的第二不同抗原结合位点，其中所述双特异性抗体包含人IgG同型的Fc结构域。2.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其中A)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:33的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:34的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:35的氨基酸序列；和VL结构域，其包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:36的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:38的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:41的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:43的氨基酸序列；和VL结构域，其包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:44的氨基酸序列；(e)CDR
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L2，其包含SEQ ID NO:45的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:46的氨基酸序列；或者B)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:33的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:34的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:35的氨基酸序列；和VL结构域，其包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:36的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:38的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:17的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:18的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:19的氨基酸序列；和VL结构域，其包含：(d)CDR
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L1，其包含SEQ ID NO:20的氨基酸序列；(e)CDR
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L2，其包含SEQ ID NO:21的氨基酸序列；和(f)CDR
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L3，其包含SEQ ID NO:22的氨基酸序列；或者C)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:33的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:34的氨基酸序列；和(c)CDR
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H3，其包含SEQ ID NO:35的氨基酸序列；和VL结构域，其包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:36的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:38的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列；(b)CDR
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H2，其包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列；和(c)CDR
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H3，其包含SEQ ID NO:11的氨基酸序列；和VL结构域，其包含：(d)CDR
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L1，其包含SEQ ID NO:12的氨基酸序列；(e)CDR
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L3，其包含SEQ ID NO:14的氨基酸序列；或者D)i)所述第一抗原结合位点包含
VH结构域，其包含：(a)CDR
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H1，其包含SEQ ID NO:17的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:18的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:19的氨基酸序列；和VL结构域，其包含：(d)CDR
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‑
L3，其包含SEQ ID NO:22的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:41的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:43的氨基酸序列；和VL结构域，其包含：(d)CDR
‑
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‑
L2，其包含SEQ ID NO:45的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:46的氨基酸序列；或者E)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:25的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:26的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:27的氨基酸序列；和VL结构域，其包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:28的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:29的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:30的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:41的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:43的氨基酸序列；和VL结构域，其包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:44的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:45的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:46的氨基酸序列；或者F)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:49的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:50的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:51的氨基酸序列；和VL结构域，其包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:52的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:53的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:54的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:41的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:43的氨基酸序列；和VL结构域，其包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:44的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:45的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:46的氨基酸序列；或者G)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:11的氨基酸序列；和VL结构域，其包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:12的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:13的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:14的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:17的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含
SEQ ID NO:18的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:19的氨基酸序列；和VL结构域，其包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:20的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:21的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:22的氨基酸序列；或者H)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:11的氨基酸序列；和VL结构域，其包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:12的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:13的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:14的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:25的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:26的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:27的氨基酸序列；和VL结构域，其包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:28的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:29的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:30的氨基酸序列；或者I)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列；和VL结构域，其包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:25的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:26的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:27的氨基酸序列；和VL结构域，其包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:28的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:29的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:30的氨基酸序列。3.根据权利要求2所述的双特异性抗体，其中A)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:39的氨基酸序列，其中所述VH结构域包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:33的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:34的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:35的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:40的氨基酸序列，其中所述VL结构域包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:36的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:38的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:47的氨基酸序列，其中所述VH结构域包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:41的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:43的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:48的氨基酸序列，其中所述VL结构域包含：(d)CDR
‑
L1，
其包含SEQ ID NO:44的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:45的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:46的氨基酸序列；或者B)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:39的氨基酸序列，其中所述VH结构域包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:33的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:34的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:35的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:40的氨基酸序列，其中所述VL结构域包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:36的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:38的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列，其中所述VH结构域包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:17的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:18的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:19的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:24的氨基酸序列，其中所述VL结构域包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:20的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:21的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:22的氨基酸序列；或者C)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:39的氨基酸序列，其中所述VH结构域包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:33的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:34的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:35的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:40的氨基酸序列，其中所述VL结构域包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:36的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:38的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:15的氨基酸序列，其中所述VH结构域包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:11的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:16的氨基酸序列，其中所述VL结构域包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:12的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:13的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:14的氨基酸序列；或者D)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列，其中所述VH结构域包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:17的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:18的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:19的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:24的氨基酸序列，其中所述VL结构域包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:20的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:21的氨基酸序列；和(f)
CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:22的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:47的氨基酸序列，其中所述VH结构域包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:41的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:43的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:48的氨基酸序列，其中所述VL结构域包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:44的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:45的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:46的氨基酸序列；或者E)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:31的氨基酸序列，其中所述VH结构域包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:25的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:26的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:27的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:32的氨基酸序列，其中所述VL结构域包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:28的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:29的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:30的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:47的氨基酸序列，其中所述VH结构域包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:41的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:43的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:48的氨基酸序列，其中所述VL结构域包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:44的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:45的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:46的氨基酸序列；或者F)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:55的氨基酸序列，其中所述VH结构域包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:49的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:50的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:51的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:56的氨基酸序列，其中所述VL结构域包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:52的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:53的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:54的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:47的氨基酸序列，其中所述VH结构域包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:41的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:43的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:48的氨基酸序列，其中所述VL结构域包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:44的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:45的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:46的氨基酸序列；或者
G)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:15的氨基酸序列，其中所述VH结构域包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:11的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:16的氨基酸序列，其中所述VL结构域包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:12的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:13的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:14的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列，其中所述VH结构域包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:17的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:18的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:19的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:24的氨基酸序列，其中所述VL结构域包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:20的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:21的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:22的氨基酸序列；或者H)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:15的氨基酸序列，其中所述VH结构域包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:11的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:16的氨基酸序列，其中所述VL结构域包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:12的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:13的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:14的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:31的氨基酸序列，其中所述VH结构域包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:25的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:26的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:27的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:32的氨基酸序列，其中所述VL结构域包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:28的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:29的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:30的氨基酸序列；或者I)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:7的氨基酸序列，其中所述VH结构域包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列，其中所述VL结构域包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:31的氨基酸序列，其中所述VH结构域包含：(a)CDR
‑
H1，其
包含SEQ ID NO:25的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:26的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:27的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:32的氨基酸序列，其中所述VL结构域包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:28的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:29的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:30的氨基酸序列。4.根据权利要求1至3中任一项所述的双特异性抗体，其中所述包含人IgG同型的Fc结构域的双特异性抗体为包含人IgG1同型的恒定重链结构域的双特异性抗体。5.根据权利要求4所述的双特异性抗体，其中当由20mg/kg的各双特异性抗体和0.1mg/kg人CCL2所组成的预形成的免疫复合物以10ml/kg的单剂量向FcRn转基因小鼠施用时，与施用包含含有突变L234A、L235A、P329G((Kabat EU编号)的人IgG1同型的Fcγ受体沉默恒定重链结构域的双特异性抗体后的人CCL2体内清除率(ml/天/kg)相比，施用包含人野生型IgG1同型的恒定重链结构域的双特异性抗体后，人CCL2的体内清除率(ml/天/kg)高至少两倍。6.一种(分离的)双特异性抗体，其包含与人CCL2上的第一表位(特异性地)结合的第一抗原结合位点以及与人CCL2上的第二表位(特异性地)结合的第二抗原结合位点，其中i)所述第一抗原结合位点与抗体一样结合CCL2上的相同表位，所述抗体包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:39的氨基酸序列，其中所述VH结构域包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:33的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:34的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:35的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:40的氨基酸序列，其中所述VL结构域包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:36的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:38的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点与抗体一样结合CCL2上的相同表位，所述抗体包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:47的氨基酸序列，其中所述VH结构域包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:41的氨基酸序列；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:43的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:48的氨基酸序列，其中所述VL结构域包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:44的氨基酸序列；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:45的氨基酸序列；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:46的氨基酸序列。7.根据权利要求6所述的双特异性抗体，其中当由20mg/kg的各双特异性抗体和0.1mg/kg人CCL2所组成的预形成的免疫复合物以10ml/kg的单剂量向FcRn转基因小鼠施用时，与施用包含含有突变L234A、L235A、P329G((Kabat EU编号)的人IgG1同型的Fcγ受体沉默恒定重链结构域的双特异性抗体后的人CCL2体内清除率(ml/天/kg)相比，施用包含人野生型IgG1同型的恒定重链结构域的双特异性抗体后，人CCL2的体内清除率(ml/天/kg)高至少15倍，特别地高至少20倍。8.一种(分离的)双特异性抗体，其包含与人CCL2上的第一表位(特异性地)结合的第一抗原结合位点以及与人CCL2上的第二表位(特异性地)结合的第二抗原结合位点，其中
i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:57的氨基酸序列SHYGXS，其中X为I或T；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:58的氨基酸序列GX1IX2IFX3TANYAQKFQG，其中X1为V、I或H，X2为P或H，且X3为H或G；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:59的氨基酸序列YDAHYGELDF；和VL结构域，其包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:60的氨基酸序列RASQHVSDAYLA；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:61的氨基酸序列DASDRAE；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:62的氨基酸序列HQYIHLHSFT；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:76的氨基酸序列HTYMH；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:77的氨基酸序列RIDPXNHNTKFDPKFQG，其中X为D或E；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:78的氨基酸序列GVFGFFXH，其中X为D或E；和VL结构域，其包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:79的氨基酸序列KAX1EDIYNRX2A，其中X1为F或T且X2为R或L；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:80的氨基酸序列GATSLEH；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:81的氨基酸序列QQFXSAPYT，其中X为W或R。9.一种(分离的)双特异性抗体，其包含与人CCL2上的第一表位(特异性地)结合的第一抗原结合位点以及与人CCL2上的第二表位(特异性地)结合的第二抗原结合位点，其中i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:57的氨基酸序列SHYGXS，其中X为I或T；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:58的氨基酸序列GX1IX2IFX3TANYAQKFQG，其中X1为V、I或H，X2为P或H，且X3为H或G；(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:59的氨基酸序列YDAHYGELDF；(d)FR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:63的氨基酸序列QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTF；(e)FR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:64的氨基酸序列WVRQAPGQGLEWMG；(f)FR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:65的氨基酸序列RVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAR；和(g)FR
‑
H4，其包含SEQ ID NO:66的氨基酸序列WGQGTLVTVSS；和VL结构域，其包含：(h)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:60的氨基酸序列RASQHVSDAYLA；(i)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:61的氨基酸序列DASDRAE；和(j)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:62的氨基酸序列HQYIHLHSFT；(k)FR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:67的氨基酸序列EIVLTQSPATLSLSPGERATLSC；(l)FR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:68的氨基酸序列WYQQKPGQAPRLLIY；(m)FR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:69的氨基酸序列GVPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYC；和(n)FR
‑
L4，其包含SEQ ID NO:70的氨基酸序列GQGTKVEIK；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:76的氨基酸序列HTYMH；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:77的氨基酸序列RIDPXNHNTKFDPKFQG，其中X为D或E；(c)CDR
‑
H3，其包含
SEQ ID NO:78的氨基酸序列GVFGFFXH，其中X为D或E；(d)FR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:82的氨基酸序列QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGLTIS；(e)FR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:83的氨基酸序列WVRQAPGQGLEWMG；(f)FR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:84的氨基酸序列RVTITADTSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAR；和(g)FR
‑
H4，其包含SEQ ID NO:85的氨基酸序列WGQGTTVTVSS；和VL结构域，其包含：(h)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:79的氨基酸序列KAX1EDIYNRX2A，其中X1为F或T且X2为R或L；(i)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:80的氨基酸序列GATSLEH；(j)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:81的氨基酸序列QQFXSAPYT，其中X为W或R；(k)FR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:86的氨基酸序列DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC；(l)FR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:87的氨基酸序列WYQQKPGKAPKLLIH；(m)FR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:88的氨基酸序列GVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYC；和(n)FR
‑
L4，其包含SEQ ID NO:89的氨基酸序列FGGGTKVEIK。10.一种(分离的)双特异性抗体，其包含与人CCL2上的第一表位(特异性地)结合的第一抗原结合位点以及与人CCL2上的第二表位(特异性地)结合的第二抗原结合位点，其中A)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:71的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:75的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:90的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:93的氨基酸序列；或者B)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:71的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:75的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:91的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:93的氨基酸序列；或者C)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:71的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:75的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:90的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:94的氨基酸序列；或者D)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:72的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:75的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含
VH结构域，其包含SEQ ID NO:90的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:94的氨基酸序列；或者E)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:73的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:75的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:90的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:93的氨基酸序列；或者F)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:73的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:75的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:90的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:94的氨基酸序列；或者G)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:73的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:75的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:92的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:93的氨基酸序列；或者H)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:73的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:75的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:91的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:93的氨基酸序列；或者I)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:72的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:75的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:90的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:93的氨基酸序列；或者J)i)所述第一抗原结合位点包含
VH结构域，其包含SEQ ID NO:72的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:75的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:92的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:93的氨基酸序列；或者K)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:72的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:75的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:91的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:93的氨基酸序列；或者L)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:74的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:75的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:90的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:93的氨基酸序列；或者M)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:74的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:75的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:90的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:94的氨基酸序列；或者N)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:74的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:75的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:92的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:93的氨基酸序列；或者O)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:74的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:75的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:91的氨基酸序列；
和VL结构域，其包含SEQ ID NO:93的氨基酸序列；或者P)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:71的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:75的氨基酸序列；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域，其包含SEQ ID NO:92的氨基酸序列；和VL结构域，其包含SEQ ID NO:93的氨基酸序列。11.一种(分离的)双特异性抗体，其包含与人CCL2上的第一表位(特异性地)结合的第一抗原结合位点以及与人CCL2上的第二表位(特异性地)结合的第二抗原结合位点，其中A)i)所述第一抗原结合位点包含VH结构域序列，其与SEQ ID NO:71的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性，其中所述VH结构域包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:57的氨基酸序列SHYGXS，其中X为I；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:58的氨基酸序列GX1IX2IFX3TANYAQKFQG，其中X1为V，X2为P，且X3为H；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:59的氨基酸序列YDAHYGELDF；和VL结构域序列，其与SEQ ID NO:75的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性，其中所述VL结构域包含：(d)CDR
‑
L1，其包含SEQ ID NO:60的氨基酸序列RASQHVSDAYLA；(e)CDR
‑
L2，其包含SEQ ID NO:61的氨基酸序列DASDRAE；和(f)CDR
‑
L3，其包含SEQ ID NO:62的氨基酸序列HQYIHLHSFT；并且ii)所述第二抗原结合位点包含VH结构域序列，其与SEQ ID NO:90的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性，其中所述VH结构域包含：(a)CDR
‑
H1，其包含SEQ ID NO:76的氨基酸序列HTYMH；(b)CDR
‑
H2，其包含SEQ ID NO:77的氨基酸序列RIDPXNHNTKFDPKFQG，其中X为D；和(c)CDR
‑
H3，其包含SEQ ID NO:7...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯舒，J，
申请(专利权)人：豪夫迈，
类型：发明
国别省市：