一种去氧胆酸有关物质及其制备方法和检测方法技术

本发明专利技术属于化学制药领域，具体而言涉及一种去氧胆酸有关物质H及其制备方法和检测方法。本发明专利技术提供了一种如式H所示的去氧胆酸的杂质以及其制备方法，此外，本发明专利技术还提供了该杂质H的检测方法，对去氧胆酸的质量控制具有重要作用。重要作用。重要作用。重要作用。

【技术实现步骤摘要】
一种去氧胆酸有关物质及其制备方法和检测方法


[0001]本专利技术属于化学制药领域，具体而言涉及一种去氧胆酸有关物质H及其制备方法和检测方法。

技术介绍

[0002]随着我国人均可支配收入和消费水平的提高，人们对医疗美容的需求也日益增多。从美容的角度来看，身体局部脂肪沉积是影响美观的，特别是脸部的脂肪沉积。例如，有双下巴或深颊，会使脸可能看起来更大。为了克服这个问题，以减脂为目的的运动方案和饮食控制方案层出不穷，但效果有限。
[0003]目前有效的去除颏下脂肪(双下巴)的主要手段有包括脂肪吸除手术、抽脂手术、脂肪吸除手术切口等在内的外科手术疗法。然而，外科疗法的局限性在于它们需要几个星期才能痊愈，某些患者(例如，糖尿病患者)的治愈期更长，并且存在产生副作用的风险，包括出血过多、内部器官损伤、细菌感染、瘢痕或疼痛等。
[0004]Kythera公司开发的去氧胆酸皮下注射制剂在欧洲获批上市，商品名：Belkyra，是含去氧胆酸的透明无色、无菌溶液，去氧胆酸的结构式如下：
[0005][0006]任何影响药物纯度的物质统称为杂质，药物杂质一般包括：有机杂质、无机杂质及残留溶剂。有机杂质主要指由生产工艺引入或物质降解而产生的杂质，有机杂质的化学结构一般与活性成分类似或具渊源关系，故通常又可称之为有关物质。“有关物质”是指“在既定工艺进行生产和正常贮藏过程中可能含有或产生并需要控制的杂质，改变生产工艺时需另考虑增修订有关项目”。
[0007]出于人用药安全考虑，在药物活性成分的产品商业化之前，国内和国际药品监管机构都会建立很低的杂质质控限度。通常已知杂质的质控限度为0.15％，但未知杂质的质控限度通常会小于0.10％。杂质的研究是药品研发的一项重要内容，它包括选择合适的分析方法，准确地分辨与测定杂质的含量并综合药学、毒理、临床研究的结果确定杂质的合理限度。
[0008]中间体12(结构如下式12)是去氧胆酸的制备过程中的关键中间体，中间体12经过水解步骤能够制备得到去氧胆酸。因此对中间体12的质量控制，特别是中间体12中基因毒杂质的检测至关重要，目前对中间体12中的基因毒杂质的检测方法鲜有报道。
[0009]
技术实现思路

[0010]本专利技术的目的在于提供一种去氧胆酸有关物质H(结构见下式H)及其制备方法和检测方法。该有关物质H能够用作药品研发过程中的标准品和对照品，该去氧胆酸有关物质H的制备方法简单，纯度高、收率好。该有关物质H检测方法可以检测去氧胆酸中间体12中杂质H的含量和纯度，也可以检测式H化合物本身的纯度，该方法操作灵敏、专属、快速、准确。
[0011][0012]有关物质H是中间体12生产过程中可能产生的副产物，其环氧结构为基因毒性警示结构，根据ICH M7采用TTC法计算该杂质限度，TTC为1.5μg/天，去氧胆酸日剂量为100mg，故去氧胆酸中基因毒杂质限度为15ppm，中间体12到去氧胆酸的收率按40％计算，该杂质在中间体12中限度为6ppm。
[0013]本专利技术提供了一种式H化合物或其盐、水合物、立体异构体，式H化合物结构式如下：
[0014][0015]在一些实施方案中，式H化合物的纯度为95％以上；在一些实施方案中，式H化合物的纯度为97％以上；在一些实施方案中，式H化合物的纯度为98％以上；在一些实施方案中，式H化合物的纯度为99％以上。
[0016]本专利技术还提供了一种式H化合物的制备方法，其反应路线如下：
[0017][0018]进一步地，所述制备方法包括如下步骤：
[0019]在非质子溶剂的存在下，将中间体9与氧化剂混合，视情况进行搅拌反应，反应完成后，进行柱层析分离，制得式H化合物。
[0020]在上述式H化合物制备方法的一些实施方案中，所述非质子溶剂选自二氯甲烷、氯仿、四氯化碳中的一种，所述氧化剂为间氯过氧苯甲酸、过氧苯甲酸中的一种。
[0021]另外，本申请还提供了式H化合物用作标准品或者对照品的应用。本申请还提供了式H化合物在去氧胆酸中间体12或去氧胆酸的杂质检查时作为标准品的用途。
[0022]本专利技术还进一步地提供了一种去氧胆酸有关物质H的检测方法，
[0023][0024]其包括以下步骤：
[0025]a)将有关物质H对照品溶于溶剂中，配制成一定浓度的有关物质H对照品溶液，对有关物质H对照品溶液浓度记为Cs(ng/ml)；
[0026]b)在常压下，采用高效液相色谱
‑
质谱分析方法测定有关物质H对照品溶液中主峰峰面积As；
[0027]c)将中间体12溶于溶剂中，配制成一定浓度的中间体12的供试品溶液，中间体12的供试品溶液浓度记为Ci(mg/ml)；
[0028]d)在常压下，采用高效液相色谱
‑
质谱分析方法测定中间体12供试品溶液中有关物质H的峰面积Ai；
[0029]e)按照以下公式
①
、
②
计算去氧胆酸中间体12中有关物质H的浓度和含量。
[0030]①
去氧胆酸中间体12中有关物质H的浓度计算公式为：
[0031][0032]②
去氧胆酸中间体12中有关物质H的含量计算公式为：
[0033][0034]上式
①
、
②
中：
[0035]Cs：对照品溶液的浓度(ng/ml)，Ci：样品溶液的浓度(mg/ml)，
[0036]Ai：样品溶液中杂质峰面积，A
S
：对照品溶液中主峰峰面积，
[0037]P：对照品含量(如含量为99.8％，带入0.998进行计算)。
[0038]在上述有关物质H的检测方法的一些实施方案中，其中，步骤a)和c)中，所述溶剂为乙腈。
[0039]在上述有关物质H的检测方法的一些实施方案中，其中，步骤a)中，所述有关物质H对照品溶液浓度范围为3.6030～36.0300ng/ml，优选地为18ng/ml。
[0040]在上述有关物质H的检测方法的一些实施方案中，其中，步骤c)中，所述中间体12供试品溶液浓度Ci的范围为1
‑
9mg/ml，优选地为3mg/ml。
[0041]在上述有关物质H的检测方法的一些实施方案中，其中，所述高效液相色谱
‑
质谱分析法的条件为：高效液相色谱仪、检测器为质谱检测器(MS)、色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，优选的色谱柱为Agilent Eclipse Plus C8色谱柱，进一步优选地色谱柱为Agilent Eclipse Plus C8 3.5μm 4.6
×
100mm或与其效能相当色谱柱；流动相A为水，流动相B为乙腈
‑
甲醇(80：20)，流动相C为20mmol/L甲酸铵溶液，按下表1进行线性梯度洗脱；柱温30℃，流速1.0ml/min，进样量20μl。离子源为电喷雾离子源(ESI)，正离子模式，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种式H化合物或其盐、水合物，式H化合物结构式如下：2.一种权利要求1所述的式H化合物的制备方法，其特征在于，中间体9与氧化剂反应，得到式H化合物，3.根据权利要求2所述的式H化合物的制备方法，其特征在于，所述氧化剂选自间氯过氧苯甲酸、过氧苯甲酸中的一种。4.根据权利要求2所述的式H化合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：在非质子溶剂的存在下，将中间体9与氧化剂混合，视情况进行搅拌反应，反应完成后，进行柱层析分离，制得式H化合物；所述非质子溶剂选自二氯甲烷、氯仿、四氯化碳中的一种，所述氧化剂为间氯过氧苯甲酸、过氧苯甲酸中的一种。5.一种权利要求1所述式H化合物的检测方法，其包括以下步骤：a)将有关物质H对照品溶于溶剂中，配制成一定浓度的有关物质H对照品溶液，对有关物质H对照品溶液浓度记为Cs；b)在常压下，采用高效液相色谱
‑
质谱分析方法测定有关物质H对照品溶液中主峰峰面积As；c)将中间体12溶于溶剂中，配制成一定浓度的中间体12的供试品溶液，中间体12的供试品溶液浓度记为Ci；d)在常压下，采用高效液相色谱
‑
质谱分析方法测定中间体12供试品溶液中有关物质H的峰面积Ai；
e)按照以下公式
①
、
②
计算去氧胆酸中间体12中有关物质H的浓度和含量；
①
去氧胆酸中间体12中有关物质H的浓度计算公式为：
②
去氧胆酸中间体12中有关物质H的含量计算公式为：上式
①

【专利技术属性】
技术研发人员：王露露，周春燕，马琼，林成刚，卢月月，
申请(专利权)人：南京迈诺威医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：