可电离的胺类脂质和脂质纳米颗粒制造技术

本公开提供了可电离的胺类脂质及其盐(例如，其药学上可接受的盐)，所述可电离的胺类脂质及其盐用于递送生物活性剂，例如将生物活性剂递送至细胞以制备工程化细胞。本文公开的可电离的胺类脂质在基于脂质纳米颗粒的组合物的配制中用作可电离的脂质。的配制中用作可电离的脂质。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】可电离的胺类脂质和脂质纳米颗粒
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2019年4月25日提交的美国临时专利申请号62/838,551，以及2019年5月6日提交的美国临时专利申请号62/843,854的优先权益，每个临时专利申请的全部内容通过引用并入本文。
[0003]背景
[0004]用可电离的含胺脂质配制的脂质纳米颗粒可用作将生物活性剂，尤其是多核苷酸，诸如RNA、mRNA和向导RNA递送至细胞中的货物媒介物。含有可电离脂质的LNP组合物可促进寡核苷酸试剂递送穿过细胞膜，并且可用于将用于基因编辑的组分和组合物引入活细胞中。特别难以递送至细胞的生物活性剂包括蛋白质、基于核酸的药物及其衍生物，特别是包括相对大的寡核苷酸(诸如mRNA)的药物。用于将有前景的基因编辑技术递送到细胞中，诸如用于递送CRISPR/Cas9系统组分的组合物特别令人感兴趣(例如，编码核酸酶的mRNA和相关的向导RNA(gRNA))。
[0005]需要用于将CRISPR/Cas的蛋白质和核酸组分递送至细胞(诸如患者体内的细胞)的组合物。具体而言，用于递送编码CRISPR蛋白质组分的mRNA和用于递送CRISPR gRNA的组合物特别令人感兴趣。可稳定和递送RNA组分的具有用于体外和体内递送的有用特性的组合物也特别令人感兴趣。

技术实现思路

[0006]本公开提供了用于配制脂质纳米颗粒(LNP)组合物的含胺脂质。此类LNP组合物可具有有利于将核酸货物诸如CRISPR/Cas基因编辑组分递送至细胞的特性。
[0007]在一些实施方案中，所述脂质是具有式II的结构的化合物
[0008][0009]其中
[0010]X1为O、NR1或直接键，
[0011]X2为C2‑5亚烷基，
[0012]X3为C(＝O)或直接键，
[0013]R1为H或Me，
[0014]R3为C1‑3烷基，
[0015]R2为C1‑3烷基，或
[0016]R2与它所连接的氮原子及X2的1
‑
3个碳原子一起形成4元、5元或6元环，或
[0017]X1为NR1，R1和R2与它们所连接的氮原子一起形成5元或6元环，或
[0018]R2与R3和它们所连接的氮原子一起形成5元、6元或7元环，
[0019]Y1为C2‑
12
亚烷基，
[0020]Y2选自(呈任一取向)、(呈任一取向)和(呈任一取向)，
[0021]n为0至3，
[0022]R4为C1‑
15
烷基，
[0023]Z1为C1‑6亚烷基或直接键，
[0024]Z2为(呈任一取向)或不存在，前提是如果Z1为直接键，则Z2不存在；
[0025]R5为C5‑9烷基或C6‑
10
烷氧基，
[0026]R6为C5‑9烷基或C6‑
10
烷氧基，
[0027]W为亚甲基或直接键，并且
[0028]R7为H或Me，
[0029]或其盐，
[0030]前提是如果R3和R2为C2烷基，X1为O，X2为直链C3亚烷基，X3为C(＝O)，Y1为直链C6亚烷基，(Y2)
n
‑
R4为R4为直链C5烷基，Z1为C2亚烷基，Z2不存在，W为亚甲基，并且R7为H，则R5和R6不是C8烷氧基。
[0031]在某些实施方案中，所述脂质是具有式(I)的结构的化合物：
[0032][0033]X1为O、NR1或直接键，
[0034]X2为C2‑5亚烷基，
[0035]X3为C(＝O)或直接键，
[0036]R1为H或Me，
[0037]R3为C1‑3烷基，
[0038]R2为C1‑3烷基，或
[0039]R2与它所连接的氮原子及X2的1
‑
3个碳原子一起形成4元、5元或6元环，或
[0040]X1为NR1，R1和R2与它们所连接的氮原子一起形成5元或6元环，或
[0041]R2与R3和它们所连接的氮原子一起形成5元、6元或7元环，
[0042]Y1为C2‑
12
亚烷基，
[0043]Y2选自(呈任一取向)和
(呈任一取向)，
[0044]R4为C3‑
15
烷基，
[0045]Z1为C1‑6亚烷基或直接键，
[0046]Z2为(呈任一取向)或不存在，前提是如果Z1为直接键，则Z2不存在，
[0047]R5为C5‑9烷基或C6‑
10
烷氧基，
[0048]R6为C5‑9烷基或C6‑
10
烷氧基，
[0049]W为亚甲基或直接键，并且
[0050]R7为H或Me，
[0051]或其盐，
[0052]前提是如果R3和R2为C2烷基，X1为O，X2为直链C3亚烷基，X3为C(＝O)，Y1为直链C6亚烷基，Y2为R4为直链C4烷基，Z1为C2亚烷基，Z2不存在，W为亚甲基，并且R7为H，则R5和R6不是C8烷氧基。
[0053]在某些实施方案中，本专利技术涉及本文所述的任何化合物，其中所述化合物的质子化形式的pKa为约5.1至约9.0，例如约5.7至约7.6，或约6至约7.5。
[0054]在某些实施方案中，本专利技术涉及一种组合物，其包含本文所述的任何化合物和脂质组分，例如包含约50％(例如，约50％的脂质组分)的本文所述的化合物和脂质组分，例如胺类脂质，优选式(I)或式(II)的化合物。
[0055]在某些实施方案中，本专利技术涉及本文所述的任何组合物，其中所述组合物是LNP组合物。例如，本专利技术涉及一种LNP组合物，其包含本文所述的任何化合物和脂质组分。在某些实施方案中，本专利技术涉及本文所述的任何LNP组合物，其中所述脂质组分包含辅助脂质和PEG脂质。在某些实施方案中，本专利技术涉及本文所述的任何LNP组合物，其中所述脂质组分包含辅助脂质、PEG脂质和中性脂质。在某些实施方案中，本专利技术涉及本文所述的任何LNP组合物，其还包含冷冻保护剂。在某些实施方案中，本专利技术涉及本文所述的任何LNP组合物，其还包含缓冲剂。
[0056]在某些实施方案中，本专利技术涉及本文所述的任何LNP组合物，其还包含核酸组分。在某些实施方案中，本专利技术涉及本文所述的任何LNP组合物，其还包含RNA或DNA组分。在某些实施方案中，本专利技术涉及本文所述的任何LNP组合物，其中所述LNP组合物具有约3
‑
10的N/P比率，例如N/P比率为约6
±
1，或N/P比率为约6
±
0.5。在某些实施方案中，本专利技术涉及本文所述的任何LNP组合物，其中所述LNP组合物具有约6的N/P比率。
[0057]在某些实施方案中，本专利技术涉及本文所述的任何LNP组合物，其中所述RNA组分包含mRNA。在某些实施方案中，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种式II的化合物其中X1为O、NR1或直接键，X2为C2‑5亚烷基，X3为C(＝O)或直接键，R1为H或Me，R3为C1‑3烷基，R2为C1‑3烷基，或R2与它所连接的氮原子及X2的1
‑
3个碳原子一起形成4元、5元或6元环，或X1为NR1，R1和R2与它们所连接的氮原子一起形成5元或6元环，或R2与R3和它们所连接的氮原子一起形成5元、6元或7元环，Y1为C2‑
12
亚烷基，Y2选自(呈任一取向)、呈任一取向)和(呈任一取向)，n为0至3，R4为C1‑
15
烷基，Z1为C1‑6亚烷基或直接键，Z2为(呈任一取向)或不存在，前提是如果Z1为直接键，则Z2不存在；R5为C5‑9烷基或C6‑
10
烷氧基，R6为C5‑9烷基或C6‑
10
烷氧基，W为亚甲基或直接键，并且R7为H或Me，或其盐，前提是如果R3和R2为C2烷基，X1为O，X2为直链C3亚烷基，X3为C(＝O)，Y1为直链C6亚烷基，(Y2)
n
‑
R4为R4为直链C5烷基，Z1为C2亚烷基，Z2不存在，W为亚甲基，并且R7为H，则R5和R6不是C8烷氧基。2.如权利要求1所述的化合物，其中所述化合物是式I的化合物
其中X1为O、NR1或直接键，X2为C2‑5亚烷基，X3为C(＝O)或直接键，R1为H或Me，R3为C1‑3烷基，R2为C1‑3烷基，或R2与它所连接的氮原子及X2的1
‑
3个碳原子一起形成4元、5元或6元环，或X1为NR1，R1和R2与它们所连接的氮原子一起形成5元或6元环，或R2与R3和它们所连接的氮原子一起形成5元、6元或7元环，Y1为C2‑
12
亚烷基，Y2选自R4为C3‑
15
烷基，Z1为C1‑6亚烷基或直接键，Z2为(呈任一取向)或不存在，前提是如果Z1为直接键，则Z2不存在；R5为C5‑9烷基或C6‑
10
烷氧基，R6为C5‑9烷基或C6‑
10
烷氧基，W为亚甲基或直接键，并且R7为H或Me，或其盐，前提是如果R3和R2为C2烷基，X1为O，X2为直链C3亚烷基，X3为C(＝O)，Y1为直链C6亚烷基，Y2为R4为直链C4烷基，Z1为C2亚烷基，Z2不存在，W为亚甲基，并且R7为H，则R5和R6不是C8烷氧基。3.如权利要求1或权利要求2所述的化合物，其中X2为直链C2亚烷基。4.如权利要求1或权利要求2所述的化合物，其中X2为直链C3亚烷基。5.如权利要求1或权利要求2所述的化合物，其中X2为直链C4亚烷基。6.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中R3为C1烷基。7.如权利要求1
‑
5中任一项所述的化合物，其中R3为C2烷基。8.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中R2为C1烷基。
9.如权利要求1
‑
7中任一项所述的化合物，其中R2为C2烷基。10.如权利要求1
‑
7所述的化合物，其中R2与氮原子和X2的1
‑
2个碳原子一起形成5元环。11.如权利要求1
‑
7所述的化合物，其中R2与氮原子和X2的1
‑
3个碳原子一起形成6元环。12.如权利要求1
‑
5所述的化合物，其中R2和R3与氮原子一起形成5元环。13.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中X1为NH。14.如权利要求1
‑
12所述的化合物，其中X1为直接键。15.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中Y1为直链C3‑
10
亚烷基。16.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中Y1为直链C4‑8亚烷基。17.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中Y1为直链C5‑7亚烷基。18.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中R4为直链C4‑
14
烷基。19.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中R4为直链C6‑
12
烷基。20.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中Z1为直链C2‑4亚烷基。21.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中R5和R6各自独立地为直链C5‑9烷基。22.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中R5和R6各自独立地为直链C6‑8烷基。23.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中R5和R6各自独立地为直链C7‑9烷氧基。24.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中Y2为25.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中Y1为直链C7亚烷基，Y2为n＝1，并且R4为直链C
10
烷基。26.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中Z2为27.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中Z1、Z2和R5经选择以形成包括酯和缩醛的碳原子和氧原子在内的6
‑
18个原子的直链。28.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中若存在，Y1、Y2和R4经选择以形成包括酯的碳原子和氧原子在内的14
‑
24个原子的直链。29.如权利要求1所述的化合物，其中所述化合物选自：
或其盐。30.如权利要求1
‑
29中任一项所述的化合物，其中所述盐是药学上可接受的盐。31.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中所述化合物的质子化形式的pKa为约5.1至约8.0。32.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中所述化合物的质子化形式的pKa为约5.7至约7.6。33.如前述权利要求中任一项所述的化合物，其中所述化合物的质子化形式的pKa为约6至约7.6。34.一种组合物，其包含在脂质组分中的如前述权利要求中任一项所述的化合物。35.如权利要求34所述的组合物，其中所述组合物包含脂质组分，所述脂质组分包括约50％的如权利要求1
‑
31中...

【专利技术属性】
技术研发人员：S，
申请(专利权)人：英特利亚治疗股份有限公司，
类型：发明
国别省市：