L-丝氨酸生产菌及其构建方法技术

本发明专利技术公开了一种L

【技术实现步骤摘要】
L
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丝氨酸生产菌及其构建方法


[0001]本专利技术涉及基因工程
，具体涉及一种L
‑
丝氨酸生产菌及其构建方法。

技术介绍

[0002]L
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丝氨酸(L
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Ser)可以促进脂肪以及脂肪酸的合成，同时还是半胱氨酸和色氨酸等物质的合成前体，具有重要的生理功能，被广泛应用于食品、医药和化妆品等领域。目前L
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Ser的生产方法主要包括化学合成法、酶催化法和微生物发酵法；其中微生物发酵法原料来源广泛，能耗低，对环境友好，是L
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Ser生产研究的重点。
[0003]生物体中L
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Ser合成途径受到严谨的调控，且生成的L
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Ser很容易被降解，这些因素限制了L
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Ser的过量合成。因此，微生物发酵生产L
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Ser仍比较困难。
[0004]大肠杆菌作为一种重要的模式菌株，其生物化学性质、生理学性质及遗传背景等各方面均被广泛深入研究。但目前利用大肠杆菌生产L...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种L
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丝氨酸生产菌的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将大肠杆菌中的gpmA、sdaA、mtfA、pta、glyA、sdaC、serA、sstT、tdcC、aceA和cycA基因敲除，获得大肠杆菌工程菌；(2)将serB基因用sphⅠ和AaaI酶切处理，将serC基因用NcoⅠ和BglⅡ酶切处理，将酶切处理后的serB基因和serC基因整合到质粒PQE
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N上，获得第一重组表达载体；将pGEX
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kan质粒用ecoNⅠ和ZraⅠ双酶切，再将serAΔ197基因整合到双酶切处理后的质粒pGEX
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kan上，获得第二重组表达载体；(3)将获得的第一重组表达载体和第二重组表达载体导入到步骤(1)获得的大肠杆菌工程菌中，即构建得到L
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丝氨酸生产菌。2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤(1)中，基因敲除的顺序为：先敲除sstT、sdaC、tdcC、cycA基因，再敲除mtfA、glyA、pta、sdaA基因，再敲除aceA、gpmA基因，最后敲除serA基因。3.根据权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢沛，岳明瑞，曹华杰，郭永胜，
申请(专利权)人：新泰市佳禾生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：