表皮生长因子的核酸构建体、生产方法及其组合物技术

本发明专利技术涉及一种核酸构建体，包括插入片段，其特征在于，所述插入片段从5

【技术实现步骤摘要】
truncated EGF-A peptides that restore LDL-R recycling in the presence of PCSK9 in vitro.Chemistry&biology,21(2),284-294.)，细胞内表达(Kim,D.G.,et al.(2015).Construction of chimeric human epidermal growth factor containing short collagen-binding domain moieties for use as a woundtissue healing agent.J Microbiol Biotechnol,25(1),119-126.)和分泌(Huang,B.R.,et al.(2001).Purification of recombinant hEGF expressed in yeast Pichia pastoris and the study on its characters.Zhongguo yi xue ke xue yuan xue 本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种核酸构建体，包括插入片段，其特征在于，所述插入片段从5
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端到3
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端包括编码亲和标签，内含肽，表皮生长因子的多核苷酸序列，其中所述亲和标签为GST亲和标签，内含肽为gp41-1蛋白。2.根据权利要求1所述的核酸构建体，所述插入片段从5
’
端到3
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端包括编码T7启动子，乳糖操纵子，GST亲和标签，gp41-1蛋白内含肽，表皮生长因子的多核苷酸序列。3.一种表达载体，其包含权利要求1-2任一项所述的核酸构建体。4.宿主细胞，其包含权利要求3所述的表达载体。5.根据权利要求4所述的宿主细胞，其为转化的大肠杆菌(Escherichia coli)。6.EGF表达载体的构建方法，包括：1)合成的DNA片段，该片段编码5'至3'端的NotI-终止密码子-EGF-gp41-1-凝血酶位点-SpeI；2)使用正向引物5'-AAAAAGCGGCCGCTTAGCGCAGTTC-3'和反向引物5'-AAAAAACTAGTCTGGTGCCACGCGGTAGTT-3'通过PCR延伸扩增合成的DNA片段；3)扩增的PCR产物通过PCR清洗试剂盒纯化，并用NotI和SpeI消化；4)消化的片段从1％的琼脂糖中纯化并连接到用相同的限制酶消化的pET42a(+)中。7.一种构建EGF表达载体的引物对为：正向引物5'-AAAAAGCGGCCGCTTAGCGCAGTTC-3'；反向引物5'-AAAAAACTAGTCTGGTGCCACGCGGTAGTT-3'。8.一种利用权利要求1-2任一项核酸构建体或权利要求3所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟树根，邝纬阳，林庭匡，
申请(专利权)人：梦芊科技知识产权有限公司，
类型：发明
国别省市：