一种检测α1-抗胰蛋白酶的免疫比浊试剂盒及其制备方法技术

本发明专利技术涉及医学免疫领域，特别涉及一种检测α1

【技术实现步骤摘要】
一种检测
α1‑
抗胰蛋白酶的免疫比浊试剂盒及其制备方法


[0001]本专利技术涉及医学免疫领域，特别涉及一种检测α1
‑
抗胰蛋白酶的免疫比浊试剂盒及其制备方法。

技术介绍

[0002]α1
‑
抗胰蛋白酶(α
‑1‑
antitrypsin,α
‑1‑
AT，AAT)，又称α
‑1‑
蛋白酶抑制剂(α1
‑
protease inhibitor,α1
‑
PI)，是由394个氨基酸组成的一种单链糖蛋白，含糖10％
‑
20％，主要由肝脏合成。α1
‑
抗胰蛋白酶是丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族中的一员，是一种蛋白酶抑制剂，其生物学作用在于抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、透明质酸酶、纤溶酶、弹力蛋白酶等，对凝血酶、尿激酶等其他酶也有抑制作用，是一种广谱蛋白酶抑制剂，所以也叫做α1
‑
蛋白酶抑制剂(A1PI)或α1
‑
抗蛋白酶(A1AP)，因为它可以抑制各种蛋白酶(而不仅仅是胰蛋白酶)。α1
‑
抗胰蛋白酶也是一种急性时相反应蛋白，在炎症性疾患时，α1
‑
抗胰蛋白酶可透过毛细血管进入组织液，在炎症局部往往浓度很高，对急性炎性疾病有一定限制作用。
[0003]含量升高常见于感染性疾病(细菌性，病毒性)、急性肝炎、肝硬化、胶原病、妊娠、脑外伤、外科手术后、系统性红斑狼疮、药物(雌激素，口服避孕药，肾上腺类固醇，前列腺素等)、斑疹伤寒、烧伤恢复期等。含量降低主要表现为AAT缺乏症、新生儿呼吸窘迫综合征、重症肝炎、急性胰腺炎、肺气肿、十二指肠球部溃疡、肾病综合征、蛋白丧失性胃肠症、甲状腺功能亢进症、弥散性血管内凝血、营养不良、未成熟肾移植早期排斥反应等。
[0004]目前，α1
‑
抗胰蛋白酶检测的主要方法有：血清胰蛋白酶抑制容量试验、单向免疫扩散法、火箭免疫电泳法和酶联免疫法。其中，血清胰蛋白酶抑制容量试验存在：操作过程较复杂，易受血清中非抗胰蛋白酶的干扰，结果不够稳定，不宜用于开发临床检测试剂盒的问题；单向免疫扩散法分析结果耗时较长，且特异性和精确度不高；火箭免疫电泳法的精确度和特异性较差，并且需要特殊的电泳设备，因此很少应用；酶联免疫法的操作过程复杂，需要较多时间。
[0005]免疫比浊法具有操作简单、快捷、灵敏，可采用自动生化分析仪快速高通量测定的优点，因此，开发出适合大中小医院以及基层单位临床应用的血清α1
‑
抗胰蛋白酶定量检测试剂，将有助于疾病诊断、治疗和预后。

技术实现思路

[0006]有鉴于此，本专利技术提供了一种检测α1
‑
抗胰蛋白酶的免疫比浊试剂盒及其制备方法。该试剂盒稳定性好、抗干扰能力强、保存期长、检测结果准确性高、线性检测范围宽，易于在临床进行推广。
[0007]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0008]本专利技术提供了一种检测α1
‑
抗胰蛋白酶的免疫比浊试剂盒，该试剂盒包括R1试剂、R2试剂和校准品；
[0009]R1试剂包括：NaCl、EDTA、PEG8000、防腐剂、缓冲剂和水；
[0010]R2试剂包括：抗α1
‑
抗胰蛋白酶抗体、NaCl、防腐剂、缓冲剂和水。
[0011]作为优选，R1试剂中各组分浓度为：
[0012][0013]优选地，R1试剂中各组分浓度为：
[0014][0015]作为优选，R2试剂中各组分浓度为：
[0016][0017]优选地，R2试剂中各组分浓度为：
[0018][0019]在本专利技术中，缓冲剂为磷酸盐缓冲剂、磷酸盐
‑
柠檬酸缓冲剂、MOPS缓冲剂、HEPES缓冲剂中的一种。
[0020]作为优选，R1试剂或R2试剂的pH值为6.8～7.8。
[0021]作为优选，防腐剂为PC300。
[0022]作为优选，校准品为已知浓度的α1
‑
抗胰蛋白酶溶液。
[0023]作为优选，校准品中α1
‑
抗胰蛋白酶溶液的浓度为0～800mg/dL。
[0024]作为优选，抗α1
‑
抗胰蛋白酶抗体为抗人α1
‑
抗胰蛋白酶抗体。
[0025]本专利技术还提供了上述免疫比浊试剂盒的制备方法，包括如下步骤：
[0026]将NaCl、EDTA、PEG8000、防腐剂、缓冲剂溶于水中，调节pH值，过滤，得到R1试剂；
[0027]将抗α1
‑
抗胰蛋白酶抗体、NaCl、防腐剂、缓冲剂溶于水中，调节pH值，过滤，得到R2试剂；
[0028]将R1试剂、R2试剂和校准品组装成试剂盒。
[0029]本专利技术提供了一种检测α1
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抗胰蛋白酶的免疫比浊试剂盒及其制备方法。该试剂盒包括R1试剂、R2试剂和校准品；R1试剂包括：NaCl、EDTA、PEG8000、防腐剂、缓冲剂和水；R2试剂包括：抗α1
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抗胰蛋白酶抗体、NaCl、防腐剂、缓冲剂和水。本专利技术的有益效果在于：
[0030]1)本专利技术采用免疫比浊法，通过优化反应体系，提升试剂测值准确性；R1试剂采用两种稳定剂，优化各稳定剂的配比，显著改善了试剂的稳定性。
[0031]2)优选的稳定剂NaCl含量，显著扩大了试剂的线性范围。
[0032]3)优选的稳定剂EDTA含量，显著增强了试剂的精密度。
[0033]本专利技术采用创新之处如下：
[0034]1)通过优化稳定剂NaCl与增凝剂PEG8000的含量配比，显著提升试剂的线性范围。
[0035]2)优化R1/R2试剂pH及稳定剂EDTA用量可显著改善试剂的准确度。
附图说明
[0036]图1本专利技术检测试剂盒与对照试剂盒检测结果的相关性关系图；
[0037]图2本专利技术试剂盒AAT浓度检测值与理论值的线性关系图。
具体实施方式
[0038]本专利技术公开了一种检测α1
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抗胰蛋白酶的免疫比浊试剂盒及其制备方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术。本专利技术的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。
[0039]本专利技术中所用试剂或仪器均可由市场购得。
[0040]下面结合实施例，进一步阐述本专利技术：
[0041]实施例1本专利技术所述试剂盒
[0042]一、试剂盒的组成
[0043]1)R1试剂的组分含量：
[0044]pH7.4的缓冲液50mM本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测α1
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抗胰蛋白酶的免疫比浊试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括R1试剂、R2试剂和校准品；所述R1试剂包括：NaCl、EDTA、PEG8000、防腐剂、缓冲剂和水；所述R2试剂包括：抗α1
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抗胰蛋白酶抗体、NaCl、防腐剂、缓冲剂和水。2.根据权利要求1所述的免疫比浊试剂盒，其特征在于，所述R1试剂中各组分浓度为：3.根据权利要求1所述的免疫比浊试剂盒，其特征在于，所述R2试剂中各组分浓度为：4.根据权利要求1所述的免疫比浊试剂盒，其特征在于，所述缓冲剂为磷酸盐缓冲剂、磷酸盐
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柠檬酸缓冲剂、MOPS缓冲剂、HEPES缓冲剂中的一种。5.根据权利要求4所述的免疫比浊试剂盒，其特征在于，所述R1试剂或R2试剂的pH值为6.8～7.8。6.根据权利要求1所述的免疫比浊试剂盒，其特征在于，所述防腐剂为PC...

【专利技术属性】
技术研发人员：王靖雯，
申请(专利权)人：北京安图生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：