一种抗GPC3抗体和包含该抗体的药物组合物制造技术

本发明专利技术属于抗癌药物技术领域，具体涉及一种抗GPC3抗体和包括该抗体的药物组合物。所述抗GPC3抗体的轻链可变区和重链可变区分别含有SEQ ID NO 3、SEQ ID NO 4所示的氨基酸序列；或者分别含有与SEQ ID NO 3、SEQ ID NO 4所示的氨基酸序列至少有90％的一致性的序列。本发明专利技术提供的新型抗人GPC3抗体，通过增强抗体与FcγRIIIa(CD16A)的亲和力，增强了抗GPC3抗体的ADCC效应，进而大大提高该抗体对肿瘤尤其是肝细胞肿瘤的杀伤效果。是肝细胞肿瘤的杀伤效果。是肝细胞肿瘤的杀伤效果。

【技术实现步骤摘要】
一种抗GPC3抗体和包含该抗体的药物组合物


[0001]本专利技术属于抗癌药物
，具体涉及一种抗GPC3抗体和包括该抗体的药物组合物。

技术介绍

[0002]合磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican-3，GPC3)(SEQ ID NO 1)核心蛋白由相对分子质量为40KD的N-末端蛋白和30KD的膜结合的C-末端蛋白组成。C-末端通过糖基磷脂酰肌醇锚蛋白(glycosyl-phosphatidylinositol anchor，GPI)锚定在细胞表面，可结合肝素结合型蛋白，如生长因子，为细胞外基质成分，调控着细胞生长、增殖、分化、黏附和迁移等行为，还可能涉及到抑制或调节大部分中胚层组织和器官的生长。GPC3基因在不同的组织中表达差异很大，其在肝细胞癌组织中高表达，而在非肿瘤肝组织、肝细胞腺瘤、胆管癌、肝内胆管细胞癌、胆囊癌和肝脏转移性肿瘤中低表达甚至不表达。识别GPC3蛋白羧基端的单克隆抗体会产生抗体依赖性的细胞毒性(antibody-dependent cellular cytotoxicity，ADCC)。US9790267B2、US20100248359A1、WO2004022739、US9409994B2、CN104140974B和CN109988240A等专利中明确了抗GPC3抗体或者结合GPC3的蛋白片段，这些抗体或者结合片段通过重组表达人源化的抗体或者嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T-Cell,CAR-T)等形式用于癌症尤其是肝癌的治疗。以GPC3为靶点构建的CAR-T细胞是一种有效的细胞治疗手段，但是CAR-T细胞治疗技术有临床治疗的毒性问题。目前临床试验过程中，将CAR-T回输至患者体内后，常常发生一系列反应如发热、寒战、白细胞减少、肿瘤溶解综合征、细胞因子风暴、移植物抗宿主反应等，重则可能直接导致患者的死亡。另外，CAR-T技术的价格也十分的昂贵。开发抗GPC3治疗性抗体是一种更安全有效的形式。经过检索，针对GPC3抗体的研究主要集中在国外，如已在中国公开的专利文献中，美国的米德列斯公司的专利CN200880103166.9公开了一种针对磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3的单克隆抗体。美国政府(由卫生和人类服务部的部长所代表)则分别从特异性和亲和力等不同角度开发出不同序列的单克隆抗体专利(CN201280029201.3对磷脂酰肌醇蛋白聚糖3特异的人单克隆抗体及其用途)、(CN201380039993.7磷脂酰肌醇蛋白聚糖3的高亲和力单克隆抗体及其用途)。
[0003]但是截止申请日前，国内外均没有以抗GPC3治疗性抗体上市的药物。GC33为第一个进入临床研究的人源化抗体(Ishiguro T，etal.Anti-glypican 3antibody as a potential antitumor agent for human liver cancer.Cancer Res.2008；68(23)：9832-9838.)。GC33为对鼠源性母本抗体进行人源化改造后得到的抗体，GC33识别GPC3的羧基端(542-563)的多肽表位，主要通过抗体依赖的ADCC作用以及募集肿瘤浸润淋巴细胞(Tumor Infiltrating Lymphocyte,TIL)发挥抗肿瘤作用。但是，GC33抗体在二期临床研究中没有达到预设重点，临床研究失败。
[0004]GC33抗体采用了人IgG1的野生型Fc片段，该片段具有一定的ADCC和CDC效应，抗体在与肿瘤细胞表面的GPC3蛋白结合后，通过发挥抗体的ADCC和CDC效应对肿瘤进行杀伤。抗体Fc段主要与人Fc受体中的FcγRIIIa(CD16A)相互作用后发挥ADCC效应，但是野生型的
IgG1抗体发挥ADCC作用强度是不够的，尤其是对于低亲和力受体(含有F158亚型)的患者，抗体的ADCC发挥抗肿瘤的效应会进一步的减弱。大约有80％-90％的患者携带Fc低亲和力受体突变。抗体的ADCC效应没有充分的发挥是导致GC33临床失败的一个很重要的原因。

技术实现思路

[0005]为了解决现有技术中存在的上述问题，本专利技术的目的在于提供一种新型的抗GPC3抗体，该抗体通过进一步增强的ADCC效应杀伤细胞肿瘤。
[0006]本专利技术的另一个目的在于，提供含有所述抗GPC3抗体的药物组合物，该联合用药组合物将肿瘤细胞的特异性结合与阻断肿瘤的血管新生结合，实现更好的抗肿瘤活性。
[0007]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0008]一种抗GPC3抗体，所述抗GPC3抗体为抗人GPC3抗体，其轻链可变区和重链可变区分别含有SEQ ID NO 3、SEQ ID NO 4所示的氨基酸序列；或者分别含有与SEQ ID NO 3、SEQ ID NO 4所示的氨基酸序列至少有90％的一致性的序列。
[0009]优选地，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％；以及更优选为100％一致性的序列。
[0010]优选地，所述抗人GPC3抗体的重链恒定区含有SEQ ID NO 5所示的氨基酸序列，或者与SEQ ID NO 5所示的氨基酸序列有至少90％的一致性的序列。
[0011]优选地，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％；以及更优选为100％一致性的序列。
[0012]所述抗人GPC3抗体，通过对野生型Fc的突变改造，进一步增强了抗体与FcγRIIIa(CD16A)的亲和力，增强了抗GPC3抗体的ADCC效应，进而大大提高该抗体对肿瘤尤其是肝细胞肿瘤的杀伤效果。
[0013]本专利技术还提供含有抗GPC3抗体的药物组合物，该组合物包括有效量的抗人GPC3抗体和至少一种VEGF/VEGFR抑制剂。
[0014]优选地，所述VEGF/VEGFR抑制剂是抗体或者融合蛋白；进一步优选地，所述VEGF/VEGFR抑制剂选自Bevacizumab、Ranibizumab、Brolucizumab、Olinvacimab、Gentuximab、Alacizumab pegol、Aflibercept或Conbercept。
[0015]优选地，所述VEGF/VEGFR抑制剂是小分子化合物；进一步优选地，所述VEGF/VEGFR抑制剂选自Apatinib、Axitinib、Linifanib、Sorafenib、Vandetanib、Cabozantinib、Regorafenib、Pazopanib、Sunitinib、Lenvatinib、Tivozanib、Brivanib、Nintedanib、Motesanib、Cediranib或Fruquintinib。
[0016]优选地，组合物中抗人GPC3抗体与VEGF/VEGFR抑制剂的药物含量比为：当组合物中VEGF/VEGFR抑制剂是抗体或者融合蛋白时，该组合物包含60-1200mg的抗人GPC3抗体和60-1200mg的VEGF/VEGF本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗GPC3抗体，其特征在于，所述抗GPC3抗体的轻链可变区和重链可变区分别含有SEQ ID NO 3、SEQ ID NO 4所示的氨基酸序列；或者分别含有与SEQ ID NO 3、SEQ ID NO 4所示的氨基酸序列至少有90％的一致性的序列。2.根据权利要求1所述的抗GPC3抗体，其特征在于，所述抗GPC3抗体的重链恒定区含有SEQ ID NO 5所示的氨基酸序列，或者与SEQ ID NO 5所示的氨基酸序列有至少90％的一致性的序列。3.一种药物组合物，其特征在于，包含有效量的如权利要求1或2所述的抗GPC3抗体和至少一种VEGF/VEGFR抑制剂。4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，所述VEGF/VEGFR抑制剂是抗体或者融合蛋白；优选地，所述VEGF/VEGFR抑制剂选自Bevacizumab、Ranibizumab、Brolucizumab、Olinvacimab、Gentuximab、Alacizumab pegol、Aflibercept和Conbercept中的一种或多种。5.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，所述VEGF/VEGFR抑制剂是小分子化合物；优选地，所述VEGF/VEGFR抑制剂选自Apatinib、Axitinib、Linifanib、Sorafenib、Vandetanib、Cabozantinib、Regorafenib、Pazopanib、Sunitinib、Len...

【专利技术属性】
技术研发人员：张鹏，马琳，郭树华，
申请(专利权)人：苏州普乐康医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：