一种用于检测尘螨组分特异性抗体的试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及一种用于检测尘螨组分特异性抗体的试剂盒，属于抗体检测试剂盒技术领域。本发明专利技术所述试剂盒包括：包被有生物素

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测尘螨组分特异性抗体的试剂盒


[0001]本专利技术涉及过敏源检测试剂盒
，具体涉及一种用于检测尘螨组分特异性抗体的试剂盒。

技术介绍

[0002]螨类(mites)是一种普遍存在的生物，由于它们体积很小，如果不用显微镜就看不到它们；实际上，在各种自然条件或人类的生活环境中都可出现它的踪迹。目前，在变态反应学中，最值得注意的螨是在人类居住环境中能诱导人体过敏反应的螨。随着人们居住环境的现代化，与螨类有关的过敏性疾病发病率迅速增加。这些螨主要是尘螨(house dust mites)和仓储螨(storage mites)。而尘螨主要包括粉尘螨、屋尘螨、埋内宇尘螨和粗脚粉螨。仓储螨中主要为热带无爪螨。全世界范围内，居室内最常见的螨类是粉尘螨和屋尘螨。
[0003]尘螨过敏是最常见的过敏性疾病之一，尘螨过敏可表现为过敏性鼻炎、过敏性哮喘、特应性皮炎、过敏性结膜炎及胃肠道功能障碍等。
[0004]IgE抗体介导的I型超敏反应性疾病(即过敏性疾病)相当普遍。过敏性疾病是患者吸入或摄食入含有致敏成分的物质(称为过敏原或变应原，Allergen)后触发机体的B细胞产生免疫球蛋白E(Immunoglobulin E，IgE)，IgE以其Fc段与肥大细胞或嗜碱性粒细胞的表面相应的FcεRI结合，使机体处于对该过敏原的致敏状态。当相同过敏原再次进入致敏机体时，可与肥大细胞或嗜碱性粒细胞表面的IgE发生特异性结合，当过敏原与致敏细胞表面的两个或两个以上相邻的IgE结合时，发生FcεRI交联，使肥大细胞和嗜碱性粒细胞活化，导致细胞脱颗粒并释放储存在细胞浆颗粒里的炎性介质——组胺，并通过花生四烯酸途径合成新介质——白三烯、免疫反应性前列腺素和IL4、IL5等细胞因子及趋化因子，从而引发过敏反应(或称变态反应，Allergy)的疾病症状，IgE抗体在过敏性疾病的发生过程中起关键作用。过敏性疾病的特征是患者体内循环血液中的过敏原特异性IgE(sIgE)抗体浓度较正常状况下高，sIgE抗体浓度越高，患过敏性疾病的概率越大。
[0005]近年来，变应原特异性免疫治疗(specific immunotherapy，SIT)被广泛用于治疗尘螨致敏的过敏性鼻炎、哮喘等过敏性疾病。SIT是唯一可以影响过敏性疾病自然进程的病因治疗方法(Jean,Bousquet,and,et al.Allergen immunotherapy:Therapeutic vaccines for allergic diseases A WHO position paper[J].Journal of Allergy&Clinical Immunology,1998)。SIT是指在确定患者发生过敏反应的过敏原后，使用高纯度的标准化变应原疫苗，从低浓度小剂量开始逐渐递增，增强患者对抗原的耐受力，使再次接触变应原时不再产生过敏反应或得以减轻的一种治疗方法。
[0006]IgG4是免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)的一种亚型，sIgG/sIgG4在SIT作用过程中发挥“阻滞抗体”的作用。sIgG/sIgG4能阻碍IgE的合成，降低IgE的数量，还可与IgE竞争肥大细胞、嗜碱性粒细胞等表面的Fc受体，阻止IgE介导的肥大细胞脱颗粒反应的发生，减少组胺、白三烯等炎症介质的释放，使哮喘患儿的气道炎症得到改善，提高肺功能，降低气道的高反应性，改善哮喘的症状。经过一段时间的SIT治疗后，即使停止治疗仍对机体
有长期的疗效。体外实验还表明这部分抗体能通过抑制致敏原IgE复合物与抗原递呈细胞的结合而降低致敏原特异性T细胞反应，成功的SIT通常伴随血清sIgG/sIgG4抗体的显著上升。有研究表明，不同人群对屋尘螨变应原组分变应原存在差异性，使用不同变应原组分进行特异性免疫治疗SIT时，其临床效果也不同(M Guimares Junqueir de Queir
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s,Silva D A O,Alves R,et al.Mite
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specific immunotherapy using allergen and/orbacterial extracts in atopic patients in Brazil.[J].J Investig Allergol Clin Immunol,2007,18(2):84
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92.)。
[0007]过敏原组分诊断使用单体过敏原来鉴定引起过敏的特定分子，可以提高过敏诊断和脱敏治疗的准确性。在过敏原的鉴定、分子诊断方面我国目前的研究和产业化水平与欧美发达国家相比有一定差距，表现在深度和广度上。迄今为止我国可工业化应用的过敏原组分非常少，用于组分诊断的试剂盒更是空白。目前，过敏原组分诊断产品在全球范围内数量很少、项目不全，且并未在国内批准上市，例如，赛默飞世尔(Thermo Fisher)公司的尘螨组分检测的ImmunoCAP仅有4种尘螨组分的产品：Der p 1、Der p 2、Der p 10、Der p 23，对于其他尘螨组分的特异性抗体无法检测出来；且其检测方式通量低，一个CAP只能检测一种组分。这些均不利于开展个体化尘螨组分SIT。
[0008]因此，检测多种尘螨组分特异性抗体sIgE能够确定过敏患者具体过敏的组分，有利于更精准的判断尘螨过敏；检测多种尘螨组分特异性抗体sIgG/sIgG4，有利于为患者实施精准的免疫治疗提供依据，并对后续的尘螨脱敏治疗起到指示性作用。
[0009]但目前并没有一种高效的检测过敏原组分和尘螨组分特异性抗体的试剂盒。

技术实现思路

[0010]本专利技术的目的在于提供一种用于检测尘螨组分特异性抗体的试剂盒。本专利技术所述试剂盒性能可靠，灵敏度高，线性范围宽，可配合全自动仪器使用，能提高检测灵敏度及可靠性，并降低成本；本申请所述试剂盒能够高效、高通量地检测尘螨过敏原组分及多种尘螨组分特异性抗体，包括IgE、sIgG和sIgG4。
[0011]本专利技术提供了一种用于检测尘螨组分特异性抗体的试剂盒，所述试剂盒包括：包被有生物素
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多聚链霉亲和素
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生物素
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尘螨抗原的硝酸纤维素膜、洗涤液、碱性磷酸酶标记的尘螨组分特异性抗体的二抗溶液和底物溶液；
[0012]所述生物素
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多聚链霉亲和素
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生物素
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尘螨抗原的硝酸纤维素膜的结构为：硝酸纤维素膜上依次包被固化生物素、多聚链霉亲和素和生物素标记的尘螨抗原；所述尘螨抗原包括：尘螨蛋白Der f1、尘螨蛋白Der f2、尘螨蛋白Derp 1、尘螨蛋白Derp 2、尘螨蛋白Derp 5、尘螨蛋白Derp 7、尘螨蛋白Derp 10、尘螨蛋白Derp 11、尘螨蛋白Derp 20、尘螨蛋白Derp 21、尘螨蛋白Derp 23、尘螨蛋白Blo t 5、尘螨蛋白Blo t 10、尘螨蛋白Blo t 21、屋尘螨、粉尘螨和热带无爪螨，每种尘螨抗本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于检测尘螨组分特异性抗体的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：包被有生物素
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多聚链霉亲和素
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生物素
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尘螨抗原的硝酸纤维素膜、洗涤液、碱性磷酸酶标记的尘螨组分特异性抗体的二抗溶液和底物溶液；所述生物素
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多聚链霉亲和素
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生物素
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尘螨抗原的硝酸纤维素膜的结构为：硝酸纤维素膜上依次包被固化生物素、多聚链霉亲和素和生物素标记的尘螨抗原；所述尘螨抗原包括：尘螨蛋白Der f1、尘螨蛋白Der f2、尘螨蛋白Der p 1、尘螨蛋白Der p 2、尘螨蛋白Der p 5、尘螨蛋白Der p 7、尘螨蛋白Der p 10、尘螨蛋白Der p 11、尘螨蛋白Der p 20、尘螨蛋白Der p 21、尘螨蛋白Der p 23、尘螨蛋白Blo t 5、尘螨蛋白Blo t 10、尘螨蛋白Blo t 21、屋尘螨、粉尘螨和热带无爪螨，每种尘螨抗原分别包被在硝酸纤维素膜的不同位置上；所述尘螨组分特异性抗体包括sIgE和sIgG，sIgG包括sIgG4。2.根据权利要求1所述的试...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴善东，沈华浩，刘奕，吴周杰，许素玲，雷薇，王溢飞，许普阳，周贤东，蔡伟跃，朱明芝，杨旭凯，
申请(专利权)人：杭州浙大迪迅生物基因工程有限公司，
类型：发明
国别省市：