一种替考拉宁检测试剂组合及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种替考拉宁检测试剂组合及其制备方法和应用。具体地，所述试剂组合包括：(i)第一测试液，包括替考拉宁‑载体蛋白质复合物；和(ii)第二测试液，包括替考拉宁多抗。本发明专利技术的试剂组合可用于在免疫抑制比浊法中检测替考拉宁的浓度，特异性强，分析速度快，且准确度高。

【技术实现步骤摘要】
一种替考拉宁检测试剂组合及其制备方法和应用
本专利技术涉及医学检验领域，具体地，涉及一种替考拉宁检测试剂组合及其制备方法和应用。
技术介绍
替考拉宁(Teicoplanin)又名太古霉素，1975年首次发现，为游动放线菌属发酵产生的一种新型杀菌性糖肽类抗菌药物。它是特定的游动放线菌经发酵、提取后得到的一种万古霉素族糖肽类抗生素，为多个化学结构非常相似的化合物组成的抗生素混合物。临床上被广泛用于革兰氏阳性菌感染如金葡菌及链球菌属等敏感菌所致的严重感染，如心内膜炎、骨髓炎、败血症及呼吸道、泌尿道、皮肤、软组织等的感染。替考拉宁具有以下特点：1、侧链基团保护，分子空间结构致密，结合位点处于裂缝处，不易被水解失活；2、蛋白结合率高更有利于血药浓度稳定，提高杀菌疗效；3、生理pH条件下水溶性好；使得替考拉宁与同类别药物比较有明显的临床优势。替考拉宁药物谷浓度大于10mg/L，针对不同的病症，替考拉宁药物谷浓度有很大的区别。替考拉宁药物谷浓度小于10mg/L时，未达到有效治疗浓度；药物谷浓度在10～20mg/L是针对非复杂革兰氏阳性菌感染；药物谷浓度在20～60mg/L是针对复杂革兰氏阳性菌感染如严重金黄色葡萄球菌感染包括心内膜炎等；当替考拉宁药物谷浓度大于60mg/L时中毒风险高。而且不同患者对替考拉宁的吸收和代谢往往表现出很大的个体差异，及时使用相同的药物剂量，不同患者的替考拉宁血药浓度也常差异显著。因此，准确检测替考拉宁血药浓度对于提高个体化用药方案增加药物疗效以及控制替考拉宁药物毒性具有重要的参考价值。目前，检测替考拉宁血药浓度的方法主要有高效液相色谱法(HPLC)、荧光偏振免疫分析法(FPIA)、微生物法以及胶乳比浊法等。HPLC法能准确测定替考拉宁血药浓度，但是需要对临床样本进行前处理并且HPLC法测定一个样本通常需要近一个小时的时间，效率低下，操作繁琐，不适用于常规的临床检测。荧光偏振免疫分析法由于试剂成本高，临床上很难推广。微生物法需要进行细菌培样14-15h，耗时而且准确度不高。胶乳比浊法需要把抗体偶联到胶乳微球表面，操作复杂，试剂开发耗时费力。因此，急需提供特异性强、分析速度快、准确度高的替考拉宁检测方法和/或检测试剂。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种特异性强、分析速度快、准确度高的替考拉宁检测试剂组合。本专利技术第一方面，提供了一种替考拉宁检测试剂组合，所述试剂组合包括：(i)第一测试液，包括替考拉宁-载体蛋白质复合物；和(ii)第二测试液，包括替考拉宁多抗。在另一优选例中，所述替考拉宁-载体蛋白质复合物中，所述载体蛋白选自下组：血清白蛋白、血清γ球蛋白、甲状腺球蛋白、卵清蛋白或钥孔血蓝蛋白。在另一优选例中，所述替考拉宁-载体蛋白质复合物是可溶性的。在另一优选例中，所述替考拉宁-载体蛋白质复合物与所述替考拉宁多抗能够结合并产生不可溶复合物。在另一优选例中，所述第二测试液中不含所述载体蛋白的抗体。在另一优选例中，待检测的所述替考拉宁选自下组：替考拉宁TA2-1、替考拉宁TA2-2、替考拉宁TA2-3、替考拉宁TA2-4、替考拉宁TA2-5，或其组合。在另一优选例中，所述替考拉宁多抗选自：替考拉宁TA2-1多抗、替考拉宁TA2-2多抗、替考拉宁TA2-3多抗、替考拉宁TA2-4多抗、替考拉宁TA2-5多抗，或其组合。在另一优选例中，所述替考拉宁多抗是动物来源的，较佳地，哺乳动物，更佳地，兔子、羊、马、狗或鼠。在另一优选例中，第一测试液中，所述替考拉宁-载体蛋白质复合物的浓度为10μg/L-10mg/L，较佳地，50μg/L-5mg/L，更佳地，100μg/L-1mg/L，最佳地，200μg/L-1mg/L。在另一优选例中，所述替考拉宁多抗以抗血清形式加入所述第二测试液，且第二测试液中，所述抗血清的浓度为0.01-10g/L，较佳地，0.05-5g/L，更佳地，0.1-1g/L，最佳地，0.2-0.5g/L。在另一优选例中，第一测试液中替考拉宁-载体蛋白质复合物的摩尔浓度与第二测试液中替考拉宁多抗的摩尔浓度之比为1：5-20，较佳地，1：8-15，较佳地，1：9-12。在另一优选例中，所述第一测试液的溶剂为水或基本为水，较佳地，溶剂中水重量含量≥80％，更佳地，≥90％或≥95％。在另一优选例中，所述第二测试液的溶剂为水或基本为水，较佳地，溶剂中水重量含量≥80％，更佳地，≥90％或≥95％。在另一优选例中，所述第一测试液和/或第二测试液还包括促聚剂。在另一优选例中，所述促聚剂选自：聚乙二醇，较佳地，聚乙二醇35000、20000、12000、10000、8000、6000、4000、2000，或其组合，更佳地，聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、聚乙二醇8000，或其组合。在另一优选例中，第一测试液和/或第二测试液中，所述促聚剂含量各自独立地为1-200g/L，较佳地，10-100g/L，更佳地，20-80g/L。在另一优选例中，所述第一测试液和第二测试液各自独立地还包括：渗透压调节剂、助溶剂、pH调节剂、防腐剂，或其组合。在另一优选例中，所述渗透压调节剂选自：氯化钠、氯化钾，或其组合。在另一优选例中，第一测试液和/或第二测试液中，所述渗透压调节剂含量各自独立地为50-300mmol/L，较佳地，100-200mM。在另一优选例中，所述防腐剂选自：叠氮钠、Proclin300，硫柳汞、硫酸庆大霉素，或其组合。在另一优选例中，第一测试液和/或第二测试液中，所述防腐剂含量各自独立地为0.01-0.2wt％，较佳地，0.02-0.1wt％，更佳地，0.04-0.08wt％，以测试液总重量计。在另一优选例中，所述助溶剂选自：吐温20、吐温40、吐温60、吐温80，或其组合在另一优选例中，第一测试液和/或第二测试液中，所述助溶剂含量各自独立地为0.01-0.2v/v％，较佳地，0.02-0.1v/v％较佳地，0.04-0.08v/v％，以测试液总重量计。在另一优选例中，所述pH调节剂为三羟甲基氨基甲烷缓冲液、磷酸盐缓冲液、柠檬酸缓冲溶液，或其组合。在另一优选例中，所述第一测试液中所述pH调节剂为三羟甲基氨基甲烷缓冲液。在另一优选例中，所述三羟甲基氨基甲烷缓冲液浓度为10-50mmol/L，较佳地，20-40mmol/L，更佳地，25-30mmol/L。在另一优选例中，所述第一测试液的最终pH值为7-9，较佳地，7-8.5，更佳地，7.5-8.5。在另一优选例中，所述第二测试液中所述pH调节剂为磷酸盐缓冲液。在另一优选例中，所述磷酸盐缓冲液浓度为10-80mmol/L，较佳地，30-70mmol/L，更佳地，40-60mmol/L。在另一优选例中，所述第二测试液的最终pH值为6.5-9，较佳地，7-8.5，更佳地，7-8。在另一优选例中，所述第一测试液和本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种替考拉宁检测试剂组合，其特征在于，所述试剂组合包括：/n(i)第一测试液，包括替考拉宁-载体蛋白质复合物；和/n(ii)第二测试液，包括替考拉宁多抗。/n

【技术特征摘要】
1.一种替考拉宁检测试剂组合，其特征在于，所述试剂组合包括：
(i)第一测试液，包括替考拉宁-载体蛋白质复合物；和
(ii)第二测试液，包括替考拉宁多抗。


2.如权利要求1上述的检测试剂组合，其特征在于，所述替考拉宁-载体蛋白质复合物中，所述载体蛋白选自下组：血清白蛋白、血清γ球蛋白、甲状腺球蛋白、卵清蛋白或钥孔血蓝蛋白。


3.如权利要求1上述的检测试剂组合，其特征在于，待检测的所述替考拉宁选自下组：替考拉宁TA2-1、替考拉宁TA2-2、替考拉宁TA2-3、替考拉宁TA2-4、替考拉宁TA2-5，或其组合。


4.如权利要求1上述的检测试剂组合，其特征在于，第一测试液中，所述替考拉宁-载体蛋白质复合物的浓度为10μg/L-10mg/L，较佳地，50μg/L-5mg/L，更佳地，100μg/L-1mg/L，最佳地，200μg/L-1mg/L。


5.如权利要求1上述的检测试剂组合，其特征在于，所述替考拉宁多抗以抗血清形式加入所述第二测试液，且第二测试液中，所述抗血清的浓度为0.01-10g/L，较佳地，0.05-5g/L，更佳地，0.1-1g/L，最佳地，0.2-0.5g/L。


6.如权利要求1上述的检测试剂组合，其特征在于，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：周垂备，吴冯波，刘斌虎，
申请(专利权)人：上海云泽生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31