一种检测肺炎克雷伯菌的试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种检测肺炎克雷伯菌的试剂盒及其应用。利用本发明专利技术所述试剂盒可对肺炎克雷伯菌进行特异性扩增，从而实现对肺炎克雷伯菌的快速定性或定量检测。本发明专利技术所述检测方法与传统的qPCR方法的阴阳性符合率达到97.5％，相关性较好，相关系数r达到0.981。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及生物医学检测领域，具体涉及一种检测肺炎克雷伯菌的试剂盒及其应用。

技术介绍

1、肺炎克雷伯菌(klebsiella pneumoniae)是肠杆菌科细菌中常见的病原菌之一，尤其在菌血症、尿道感染、下呼吸道感染等。由于抗生素选择有限以及高发病率和高死亡率，耐碳青霉烯的肺炎克雷伯菌(carbapenem resistant k.pneumoniae,crkp)遍及全球，成为对公共卫生的主要威胁。前期研究发现，由crkp引起的感染的死亡率为30％～55％，快速可靠地分辨crkp对其传播和流行病学监测至关重要。目前，临床上耐药细菌的检测主要通过纸片扩散法、etest试纸条和自动化微生物系统方法检测药敏试验的结果，或者采用pcr的方法检测耐药基因。常规药敏试验通常需要24h才能报告结果，而pcr的方法虽然用时短但较为繁琐，对实验室要求太高，不适合在临床推广。

2、胶乳增强免疫比浊法(particle-enhanced turbidimetric immunoassay,petia)是近年来出现的一种较为稳定、准确的体液蛋白均相免疫比浊检测方法。本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种检测肺炎克雷伯菌的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒除包括一对用于特异性扩增肺炎克雷伯菌的引物对外，还包括至少两种粒径的聚苯乙烯羧基微球，使其在线性范围内可以定量检测所述肺炎克雷伯菌；

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述引物对的正向引物和/或反向引物的5’端和/或3’端缀合有标记物；所述聚苯乙烯羧基微球偶联有能与标记物特异性结合的分子，以实现定性和/或定量检测；

3.如权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括扩增酶、醋酸镁、促凝剂、防腐剂、封闭剂、离子稳定剂、微球储存液和缓冲液中的一种或多种；

4.如权利要求1或2所述的...

【技术特征摘要】

1.一种检测肺炎克雷伯菌的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒除包括一对用于特异性扩增肺炎克雷伯菌的引物对外，还包括至少两种粒径的聚苯乙烯羧基微球，使其在线性范围内可以定量检测所述肺炎克雷伯菌；

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述引物对的正向引物和/或反向引物的5’端和/或3’端缀合有标记物；所述聚苯乙烯羧基微球偶联有能与标记物特异性结合的分子，以实现定性和/或定量检测；

3.如权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括扩增酶、醋酸镁、促凝剂、防腐剂、封闭剂、离子稳定剂、微球储存液和缓冲液中的一种或多种；

4.如权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述聚苯乙烯羧基微球的粒径为88±5nm和309±5nm；

5.一种用于特异性扩增肺炎克雷伯菌的引物对，其特征在于，所述引...

【专利技术属性】
技术研发人员：林巍靖，段小艳，
申请(专利权)人：上海云泽生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：