农产品中药物残留荧光免疫定量POCT检测方法技术

本发明专利技术属于农产品检测技术领域，具体涉及一种农产品中药物残留荧光免疫定量POCT检测方法。现有检测农产品中农药残留的方法要么检测流程复杂，要么检测成本高，不易推广的问题，本发明专利技术提供了一种农产品中药物残留荧光免疫定量POCT检测方法，包括以下步骤：a、取一定量的样品，加入5倍量的提取液，提取5‑10min，制备成待测溶液；b、采用荧光免疫定量POCT分析仪检测，吸取100μl步骤a得到的待测溶液，加到试纸条的加样孔中，盖上盖子孵育6min；6min后将试纸条插入荧光免疫定量POCT分析仪的试纸条插槽中，进行读数；c、检测结果的判定。本发明专利技术的检测方法适用范围广，检测灵敏度高，适宜推广使用。

【技术实现步骤摘要】
农产品中药物残留荧光免疫定量POCT检测方法
本专利技术属于农产品检测
，具体涉及一种农产品中药物残留荧光免疫定量POCT检测方法。
技术介绍
随着社会经济水平的提高，农产品中对于农药残留的限制标准也越来越高。长期以来，随着药物大量生产和广泛使用，农药残留问题一直存在。到目前为止,世界上化学药物年产量近200万吨，约有1000多种人工合成化合物被用作杀虫剂、杀菌剂、杀藻剂、除虫剂、落叶剂等类药物。药物尤其是有机药物大量施用，造成严重的药物污染问题，成为对人体健康的严重威胁。使用的农药，有些在短时间内可以通过生物降解成为无害物质，但也有一些是无法降解的残留性较强的农药，如六六六、异狄氏剂等，这类农药会随着农产品的流通，危害人类健康。目前，世界各国对于农产品中农药的残留都提出了不同的要求，要求上市的农产品必须满足一定标准。因此，对于农产品中农药残留的检测至关重要。传统的农药残留检测方法有化学试剂法、液相色谱法等，这些方法检测农药残留要么使用的范围局限，无法用在农产品上，要么检测成本高，检测流程复杂。因此，急需开展一些检测流程短、操作简单、检测成本低的农产品中农药残留的检测方法。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题为：现有检测农产品中农药残留的方法要么检测流程复杂，要么检测成本高，不易推广的问题。本专利技术解决上述技术问题的技术方案为：提供了一种农产品中药物残留荧光免疫定量POCT检测方法。该方法包括以下步骤：a、样品前处理取农产品样品，粉碎后过40目筛，取一定量的样品，加入5倍量的提取液，漩涡振荡提取或摇床提取5-10min；提取结束后，在4000rpm离心2min，取100μl上清，加入600μl样品稀释液中，混匀，制备成待测溶液；b、样品上机检测取出荧光免疫定量POCT检测试纸条，采用荧光免疫定量POCT分析仪检测，待恒温孵育器温度升至37℃稳定后开始检测，取出荧光免疫定量POCT检测试纸条，水平放置于恒温孵育器加热板上，吸取100μl步骤a得到的待测溶液，加到试纸条的加样孔中，盖上盖子孵育6min；6min后将试纸条插入荧光免疫定量POCT分析仪的试纸条插槽中，进行读数；c、检测结果的判定若检测结果＜cutoff值，判断结果为阴性，表明药物残留量合格；若检测结果≥cutoff值，判断结果为阳性，表明药物残留量不合格。其中，上述农产品中药物残留荧光免疫定量POCT检测方法中，步骤a所述的农产品包括玉米、小麦、大麦、谷物或高粱中的至少一种。其中，上述农产品中药物残留荧光免疫定量POCT检测方法中，步骤a所述的样品为5ml，所述的提取液为25ml。其中，上述农产品中药物残留荧光免疫定量POCT检测方法中，步骤a所述的提取液为甲醇、乙醇、丙二醇或异丁醇中的至少一种。其中，上述农产品中药物残留荧光免疫定量POCT检测方法中，步骤b检测的药物残留包括六氯环己烷或异狄氏剂。其中，上述农产品中药物残留荧光免疫定量POCT检测方法中，步骤b检测的环境条件为室温25±3℃、湿度20％-80％。其中，上述农产品中药物残留荧光免疫定量POCT检测方法中，步骤c读数需要在2min内进行。本专利技术的有益效果为：本专利技术提供了一种采用荧光免疫定量POCT仪检测农产品中药物残留的方法，拓宽了荧光免疫定量POCT仪的使用范围，能够使其应用于农产品药物残留的检测上，同时采用该方法检测药物残留，检测结果准确，检测灵敏度提高了2-3个数量级，能够准确定量。并且检测流程很短，仅需前处理10min，检测6min即可完成样品的检测，极大的提高了检测效率。此外，本专利技术还提高了检测结果的线性范围，降低了六氯环己烷或异狄氏剂的检限，具有很好的实用价值。具体实施方式本专利技术提供了一种农产品中药物残留荧光免疫定量POCT检测方法，包括以下步骤：a、样品前处理取农产品样品，粉碎后过40目筛，取一定量的样品，加入5倍量的提取液，漩涡振荡提取或摇床提取5-10min；提取结束后，在4000rpm离心2min，取100μl上清，加入600μl样品稀释液中，混匀，制备成待测溶液；b、样品上机检测取出荧光免疫定量POCT检测试纸条，采用荧光免疫定量POCT分析仪检测，待恒温孵育器温度升至37℃稳定后开始检测，取出荧光免疫定量POCT检测试纸条，水平放置于恒温孵育器加热板上，吸取100μl步骤a得到的待测溶液，加到试纸条的加样孔中，盖上盖子孵育6min；6min后将试纸条插入荧光免疫定量POCT分析仪的试纸条插槽中，进行读数；c、检测结果的判定若检测结果＜cutoff值，判断结果为阴性，表明药物残留量合格；若检测结果≥cutoff值，判断结果为阳性，表明药物残留量不合格。本专利技术方法适用于检测的农产品样品主要包括玉米、小麦、大麦、谷物或高粱中的至少一种，但本专利技术的检测方法的适用范围并不限于此，还可以检测其余农产品，如土豆、番薯等，只是在检测这些水分含量相对较高的样品时，加入的提取液比例需要相应的调整。优选的，上述农产品中药物残留荧光免疫定量POCT检测方法中，步骤a所述的样品为5ml，所述的提取液为25ml。专利技术人经过大量的试验发现，当取5ml样品，采用25ml提取液进行提取时，效果最好，这可能是由于样品中的农药残留需要聚集到一定量才有利于检出。其中，上述农产品中药物残留荧光免疫定量POCT检测方法中，步骤a所述的提取液为甲醇、乙醇、丙二醇或异丁醇中的至少一种。优选采用乙醇或丙二醇。更优选的，提取液采用乙醇与丙二醇按体积比1-3:2-7进行混合。当采用乙醇和丙二醇的混合液提取时，能最大限度的将农产品的有效成分和药物残留都提取到提取液中，使检测结果更为准确。其中，上述农产品中药物残留荧光免疫定量POCT检测方法中，步骤b检测的药物残留包括六氯环己烷或异狄氏剂。本专利技术主要适用于检测农产品中的含氯化合物，尤其对于六氯环己烷或异狄氏剂，检测结果较为准确。对于其余药物残留，检测效果相对弱一点。其中，上述农产品中药物残留荧光免疫定量POCT检测方法中，步骤b检测的环境条件为室温25±3℃、湿度20％-80％。专利技术人经过大量的试验发现，检测时的环境温度和湿度也对检测结果有一定的影响，在室温25±3℃、湿度20％-80％时，检测结果更灵敏。其中，上述农产品中药物残留荧光免疫定量POCT检测方法中，步骤c读数需要在2min内进行，时间过长将导致结果不准确。在检测结果的判定时，所述的cutoff值可以根据需要进行设置，一般设置为药物残留的标准限定值。当低于该值时，表明样品中农药残留合格，高于或等于该值时，农药残留超标。本专利技术能快速的进行结果判定，判定方法简单有效。本专利技术采用荧光免疫定量POCT检测方法来测定农产品中的药物残留，尚属首例。因农产品中一般都含有较高的淀粉，在检测药物残留的时候，会干扰检测结果，使得测定结果不准确。而采用液相色谱检测农产品药物残留本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.农产品中药物残留荧光免疫定量POCT检测方法，其特征在于，包括以下步骤：/na、样品前处理/n取农产品样品，粉碎后过40目筛，取一定量的样品，加入5倍量的提取液，漩涡振荡提取或摇床提取5-10min；提取结束后，在4000rpm离心2min，取100μl上清，加入600μl样品稀释液中，混匀，制备成待测溶液；/nb、样品上机检测/n取出荧光免疫定量POCT检测试纸条，采用荧光免疫定量POCT分析仪检测，待恒温孵育器温度升至37℃稳定后开始检测，取出荧光免疫定量POCT检测试纸条，水平放置于恒温孵育器加热板上，吸取100μl步骤a得到的待测溶液，加到试纸条的加样孔中，盖上盖子孵育6min；6min后将试纸条插入荧光免疫定量POCT分析仪的试纸条插槽中，进行读数；/nc、检测结果的判定/n若检测结果＜cutoff值，判断结果为阴性，表明药物残留量合格；若检测结果≥cutoff值，判断结果为阳性，表明药物残留量不合格。/n

【技术特征摘要】
1.农产品中药物残留荧光免疫定量POCT检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
a、样品前处理
取农产品样品，粉碎后过40目筛，取一定量的样品，加入5倍量的提取液，漩涡振荡提取或摇床提取5-10min；提取结束后，在4000rpm离心2min，取100μl上清，加入600μl样品稀释液中，混匀，制备成待测溶液；
b、样品上机检测
取出荧光免疫定量POCT检测试纸条，采用荧光免疫定量POCT分析仪检测，待恒温孵育器温度升至37℃稳定后开始检测，取出荧光免疫定量POCT检测试纸条，水平放置于恒温孵育器加热板上，吸取100μl步骤a得到的待测溶液，加到试纸条的加样孔中，盖上盖子孵育6min；6min后将试纸条插入荧光免疫定量POCT分析仪的试纸条插槽中，进行读数；
c、检测结果的判定
若检测结果＜cutoff值，判断结果为阴性，表明药物残留量合格；若检测结果≥cutoff值，判断结果为阳性，表明药物残留量不合格。


2.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪劲能，
申请(专利权)人：无锡精检生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32