【技术实现步骤摘要】
一种适于常温运输的RNA提取试剂盒及提取方法
[0001]本专利技术涉及核酸处理
,具体涉及一种适于常温运输的RNA提取试剂盒及提取方法。
技术介绍
[0002]随着检测技术的发展,病原核酸检测由于其高敏感和高特异的检测性能,已成为呼吸道病原诊断的主流检测手段。通过检测患者的鼻咽拭子、气道抽取物或痰液等呼吸道标本中病原体核酸,准确、快速地检测与区分普通呼吸道系统感染与恶性病原感染,对病原感染做出快速诊断,且能快速区分病原型别和亚型/系,为后续采取针对性的防控、治疗措施提供依据和指导。
[0003]核酸提取是病原核酸检测的第一步,提取产物的得率和质量直接影响到后续检测结果的准确性和可靠性。高纯度、高浓度的核酸样品是分子生物学实验过程中获得良好实验结果的重要条件之一。目前最常用的核酸提取方法有Trizol法、柱膜法和磁珠吸附法。Trizol法主要使用试剂为苯酚,苯酚对人体有害,且提取过程需反复用枪吹打或剧烈震荡、多次离心等处理,不利于自动化;柱膜法虽然快速简便,获得的核酸纯度高、不使用有毒溶剂,但也需多次离心操作, ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种适于常温运输的RNA提取试剂盒,其特征在于,其包括裂解结合液,所述裂解结合液含有如下组分:浓度为1
‑
5M的异硫氰酸胍、浓度为0.2
‑
3M的硫氰酸钠、0.01
‑
0.1M的三羟甲基氨基甲烷、0.001
‑
0.05M的亚氨基二琥珀酸四钠、质量分数为0.05
‑
1%的抗坏血酸钠、质量分数为0.1
‑
2%的甜菜碱、质量分数为1
‑
6%的吐温20、浓度为0.05
‑
0.5M的乙酸钠、质量分数为25
‑
55%的异丙醇。2.根据权利要求1所述的适于常温运输的RNA提取试剂盒,其特征在于,所述裂解结合液的组成为:浓度为2M的异硫氰酸胍、浓度为1M的硫氰酸钠、0.05M的三羟甲基氨基甲烷、0.01M的亚氨基二琥珀酸四钠、质量分数为0.10%的抗坏血酸钠、质量分数为0.5%的甜菜碱、质量分数为5%的吐温20、浓度为0.2M的乙酸钠、质量分数为45%的异丙醇。3.根据权利要求1或2所述的适于常温运输的RNA提取试剂盒,其特征在于,所述RNA提取试剂盒还包含磁珠悬液、第一洗涤液、第二洗涤液和洗脱液;所述磁珠悬液由以下成分组成:固含量20
‑
40mg/mL的超顺磁性氧化硅纳米磁珠,所述超顺磁性氧化硅纳米磁珠的粒径介于200
‑
500nm,分散于无核酸酶水中,磁珠悬液pH=4.0
‑
6.0;所述第一洗涤液由以下成分组成:20
‑
200mM的三羟甲基氨基甲烷、1
‑
50mM的亚氨基二琥珀酸四钠、100
‑
500mM的乙酸钠、0.1
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2%的吐温20、体积分数40
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60%的乙醇;所述第二洗涤液为体积分数60
‑
80%乙醇;所述洗脱液由以下成分组成:1
‑
10mM的亚氨基二琥珀酸四钠、1
‑
100mM的tris
‑
HCl缓冲液、0.01
‑
0.2%的DEPC。4.根据权利要求3所述的适于常温运输的RNA提取试剂盒,其特征在于,所述磁珠悬液的固含量为25mg/mL;所述第一洗涤液由以下成分组成:100mM的三羟甲基氨基甲烷、10mM的亚氨基二琥珀酸四钠、140mM的乙酸钠、0.50%的吐温20、55%的乙醇;所述第二洗涤液为7...
【专利技术属性】
技术研发人员:张胜有,叶竹青,
申请(专利权)人:苏州赛普生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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