一种测定CBZ-AEEA含量的方法技术

本发明专利技术一种测定CBZ

【技术实现步骤摘要】
一种测定CBZ
‑
AEEA含量的方法


[0001]本专利技术属于化学分析领域，具体涉及一种测定CBZ
‑
AEEA含量的方法。

技术介绍

[0002]CBZ
‑
AEEA生产过程中，不免产生各种杂质，其中以同系列的CBZ
‑
2A、CBZ
‑
3A、CBZ
‑
4A、CBZ
‑
6A、CBZ
‑
8A，以及CBZ
‑
β
‑
Ala为主，且由于CBZ
‑
AEEA与CBZ
‑
β
‑
Ala性质相近，不易分离。现有技术中，并无一种检测方法可以有效将CBZ
‑
AEEA与上述杂质分离，以测定CBZ
‑
AEEA的含量。

技术实现思路

[0003]为了解决上述问题，本专利技术提供一种测定CBZ
‑
AEEA含量的方法，该方法基于高效液相色谱仪，可有效将CBZ
‑
AEEA与CBZ
‑
β
‑
Ala分离，以及与其同系列杂质分离，从而准确测定CBZ
‑
AEEA的含量。
[0004]一种测定CBZ
‑
AEEA含量的方法，高效液相色谱条件为：色谱柱为Agilent ZORBAX SB
‑
C18，检测波长为210nm，柱温为35℃，流动相A为0.1%磷酸，流动相B为乙腈，流动相流速为1ml/min；洗脱程序：0
‑
5min内，流动相A由95%将至70%，流动相B由5%升至30%，5
‑
15min内，流动相A由70%将至50%，流动相B由30%升至50%，15
‑
25min内，流动相A由50%将至30%，流动相B由50%升至70%，25
‑
28min内，流动相A由30%将至0，流动相B由70%升至100%，28
‑
40min内，流动相A保持0，流动相B保持100%，40
‑
41min内，流动相A由0升至95，流动相B由100%降至5%，41
‑
45min内，流动相A保持95%，流动相B保持5%。
[0005]进一步的，进样量为3μL。
[0006]进一步的，待测样品浓度为5mg/mL。
[0007]进一步的，待测样品的稀释剂为乙腈。
[0008]进一步的，所述色谱柱规格为250
×
4.6mm,5μm。
[0009]进一步的，所述方法，具体包括以下步骤：（1）设置高效液相色谱条件；（2）绘制标准曲线：将CBZ
‑
AEEA标准品配置成不同浓度的试样，不同浓度的标准品试样进入高效液相色谱仪进行检测，得到不同浓度的主产品CBZ
‑
AEEA的峰对应的峰面积，绘制出标准曲线，得到回归方程；（3）检测待测样品：将待测样品稀释至5mg/mL，将待测样品进入高效液相色谱仪中进样检测，记录待测样品中CBZ
‑
AEEA峰的峰面积，并将其带入步骤（2）所得回归方程中，计算出CBZ
‑
AEEA的浓度，再根据计算浓度与实际稀释浓度计算出含量。
[0010]与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：本专利技术方法流动相A为0.1%磷酸，0.1%的磷酸可以减少拖尾，有助于分离物质，且本专利技术中流动相联合洗脱程序，在45分钟内，可以有效将CBZ
‑
AEEA与CBZ
‑
2A、CBZ
‑
3A、CBZ
‑
4A、CBZ
‑
6A、CBZ
‑
8A，以及CBZ
‑
β
‑
Ala分离，且CBZ
‑
AEEA与CBZ
‑
β
‑
Ala的分离度达1.3，CBZ
‑
AEEA与其他同系列的杂质的分离度大于2，从而实现准确检测待测样品中CBZ
‑
AEEA的含量。
附图说明
[0011]图1为CBZ
‑
AEEA与各杂质分离图。
具体实施方式
[0012]下面结合实施例对本专利技术作进一步的描述，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，并不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域的普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的其他所有实施例，都属于本专利技术的保护范围。
实施例
[0013]（1）设置高效液相色谱条件；色谱柱为Agilent ZORBAX SB
‑
C18，规格为250
×
4.6mm，5μm，检测波长为210nm，柱温为35℃，流动相A为0.1%磷酸，流动相B为乙腈，流动相流速为1ml/min；洗脱程序：0
‑
5min内，流动相A由95%将至70%，流动相B由5%升至30%，5
‑
15min内，流动相A由70%将至50%，流动相B由30%升至50%，15
‑
25min内，流动相A由50%将至30%，流动相B由50%升至70%，25
‑
28min内，流动相A由30%将至0，流动相B由70%升至100%，28
‑
40min内，流动相A保持0，流动相B保持100%，40
‑
41min内，流动相A由0升至95，流动相B由100%降至5%，41
‑
45min内，流动相A保持95%，流动相B保持5%；（2）绘制标准曲线：将CBZ
‑
AEEA标准品配置成不同浓度的试样，具体为3 mg/mL，4 mg/mL，5 mg/mL，6 mg/mL，7 mg/mL，8 mg/mL，并将制得的不同浓度的标准品试样进入高效液相色谱仪进行检测，得到不同浓度的主产品CBZ
‑
AEEA的峰对应的峰面积，绘制出标准曲线，得到回归方程，y=169x+906，其中y=为峰面积，x为样品浓度，R2为0.9998，即在3
‑
8mg/mL范围内线性良好；（3）检测待测样品：将待测样品稀释至约5mg/mL，将待测样品进入高效液相色谱仪中进样检测，记录待测样品中CBZ
‑
AEEA峰的峰面积，并将其带入步骤（2）所得回归方程中，即可计算出CBZ
‑
AEEA的浓度，从而计算出CBZ
‑
AEEA的含量，CBZ
‑
AEEA含量=C
计算CBZ
‑
AEEA的浓度
/C
样品实际稀释浓度
*100%。
[0014]方法学验证：（1）准确度实验：精密称取CBZ
‑
AEEA标准品约40mg、50mg和60mg各三份，分本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种测定CBZ
‑
AEEA含量的方法，其特征在于，高效液相色谱条件为：色谱柱为Agilent ZORBAX SB
‑
C18，检测波长为210nm，柱温为35℃，流动相A为0.1%磷酸，流动相B为乙腈，流动相流速为1ml/min；洗脱程序：0
‑
5min内，流动相A由95%将至70%，流动相B由5%升至30%，5
‑
15min内，流动相A由70%将至50%，流动相B由30%升至50%，15
‑
25min内，流动相A由50%将至30%，流动相B由50%升至70%，25
‑
28min内，流动相A由30%将至0，流动相B由70%升至100%，28
‑
40min内，流动相A保持0，流动相B保持100%，40
‑
41min内，流动相A由0升至95，流动相B由100%降至5%，41
‑
45min内，流动相A保持95%，流动相B保持5%。2.根据权利要求1所述的一种测定CBZ
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AEEA含量的方法，其特征在于，进样量为3μL。3.根据权利要求1所述的一种测定CBZ

【专利技术属性】
技术研发人员：罗前东，舒娟，
申请(专利权)人：成都普康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：