一种Fmoc-NH-PEGn-丙酸同系物的分离方法技术

本发明专利技术公开了一种Fmoc

【技术实现步骤摘要】
一种Fmoc
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NH
‑
PEGn
‑
丙酸同系物的分离方法


[0001]本专利技术涉及医药原料检测
，具体而言，涉及一种Fmoc
‑
NH
‑
PEGn
‑
丙酸同系物的分离方法。

技术介绍

[0002]就Fmoc
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NH
‑
PEGn
‑
丙酸同系物(n＝1,2,
…
,12)而言，该品种常含有同系物杂质，干扰产品纯度和收率，同时对下游产品中的杂质谱产生影响。
[0003]目前有关上述物质的检测方法主要是依据《中国药典》2020版四部通则，没有对其同系物进行分离检测。
[0004]但该品种同系物之间极性十分相近，在色谱柱中吸附能力相当，分离难度较大。目前还没有能够使该品种同系物间有效分离，且灵敏度较高的分离方法。
[0005]鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种Fmoc
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NH
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PEGn
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丙酸同系物的分离方法，以解决上述技术问题。
[0007]本申请可这样实现：
[0008]本申请提供一种Fmoc
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NH
‑
PEGn
‑
丙酸同系物的分离方法，包括以下步骤：
[0009]按以下高效液相色谱条件对含Fmoc
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NH
‑
PEGn
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丙酸同系物的待测样品进行分离：
[0010]色谱柱：Agilent ZORBAX SB
‑
C18；
[0011]流动相：流动相A为高氯酸
‑
水溶液，流动相B为甲醇
‑
水溶液；其中，高氯酸
‑
水溶液中高氯酸的体积百分数为0.05～0.15％，甲醇
‑
水溶液中甲醇的体积百分数为88～92％；
[0012]洗脱程序为：洗脱时间及洗脱时间内流动相A的体积含量如下：0～3min，38～42％；3～12min，38～42％至25～30％；12～30min，25～30％；30～40min，25～30％至0％；40～50min，0％。
[0013]在可选的实施方式中，洗脱程序还包括：洗脱时间及洗脱时间内流动相A的体积含量如下：50～60min，0％至38～42％。
[0014]在可选的实施方式中，分离过程中，洗脱流速为0.8～1.2mL/min。
[0015]在可选的实施方式中，分离过程中，柱温为25～40℃。
[0016]在可选的实施方式中，分离过程中，检测波长为210～230nm。
[0017]在可选的实施方式中，分离过程中，进样量为5～20μL。
[0018]在可选的实施方式中，分离过程中，待测样品的进样浓度为0.5～4mg/mL。
[0019]在可选的实施方式中，待测样品经稀释剂稀释后至预设浓度后再进样。
[0020]在可选的实施方式中，稀释剂包括乙腈或甲醇。
[0021]在可选的实施方式中，待测样品中同时含有Fmoc
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NH
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PEG1
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丙酸、Fmoc
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NH
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PEG2
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丙酸、Fmoc
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NH
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PEG3
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丙酸、Fmoc
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NH
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PEG4
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丙酸、Fmoc
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NH
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PEG5
‑
丙酸、Fmoc
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NH
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PEG6
‑
丙酸、
Fmoc
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NH
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PEG7
‑
丙酸、Fmoc
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NH
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PEG8
‑
丙酸、Fmoc
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NH
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PEG9
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丙酸、Fmoc
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NH
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PEG10
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丙酸、Fmoc
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NH
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PEG11
‑
丙酸以及Fmoc
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NH
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PEG12
‑
丙酸中的至少2种。
[0022]本申请的有益效果包括：
[0023]本申请提供的分离方法，通过使用特定的色谱柱、流动相和洗脱程序，能够使Fmoc
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NH
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PEGn
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丙酸同系物(n＝1至12)间分离度达到1.0以上，实现各同系物的完全分离，具有良好的专属性，便于判断产品中含有同系物杂质类型。检测过程对应的色谱峰峰形对称，无明显拖尾。并且，该方法操作简便，耗时短，成本低，能够在较短时间内检测出样品中上述同系物杂质的情况，为产品生产工艺控制同系物杂质提供数据依据，有利于控制产品质量。
附图说明
[0024]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
[0025]图1为本申请实施例1中杂质混合溶液的色谱图；
[0026]图2为本申请对比例1中杂质混合溶液的色谱图；
[0027]图3为本申请对比例2中供试品溶液的色谱图；
[0028]图4为本申请对比例3中杂质混合溶液的色谱图；
[0029]图5为本申请对比例4中杂质混合溶液的色谱图；
[0030]图6为本申请对比例5中杂质混合溶液的色谱图；
[0031]图7为本申请对比例6中杂质混合溶液的色谱图。
具体实施方式
[0032]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0033]下面对本申请提供的Fmoc
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NH
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PEGn
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丙酸同系物的分离方法进行具体说明。
[0034]本申请提出Fmoc
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NH
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PEGn
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丙酸同系物的分离方法，待测样品中含有Fmoc
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NH
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PEG1
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丙酸、Fmoc
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NH
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种Fmoc
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NH
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PEGn
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丙酸同系物的分离方法，其特征在于，包括以下步骤：按以下高效液相色谱条件对含Fmoc
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NH
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PEGn
‑
丙酸同系物的待测样品进行分离：色谱柱：Agilent ZORBAX SB
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C18；流动相：流动相A为高氯酸
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水溶液，流动相B为甲醇
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水溶液；其中，高氯酸
‑
水溶液中高氯酸的体积百分数为0.05～0.15％，甲醇
‑
水溶液中甲醇的体积百分数为88～92％；洗脱程序为：洗脱时间及所述洗脱时间内流动相A的体积含量如下：0～3min，38～42％；3～12min，38～42％至25～30％；12～30min，25～30％；30～40min，25～30％至0％；40～50min，0％。2.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，洗脱程序还包括：洗脱时间及所述洗脱时间内流动相A的体积含量如下：50～60min，0％至38～42％。3.根据权利要求1或2所述的分离方法，其特征在于，分离过程中，洗脱流速为0.8～1.2mL/min。4.根据权利要求1或2所述的分离方法，其特征在于，分离过程中，柱温为25～40℃。5.根据权利要求1或2所述的分离方法，其特征在于，分离过程中，检测波长为210～230nm。6.根据权利要求1或2所述的分离方法，其特征在于，分离过程中，进样量为5～20μL。7.根据权利要求6所述的分离方法，其特征在于，分离过程中，待测样品的进样浓度为0.5～4mg/mL。8.根据权利要求7所述分离方法，其特征在于，待测样品经稀释剂稀释...

【专利技术属性】
技术研发人员：舒娟，唐灿，徐春梅，牟心，
申请(专利权)人：成都普康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：