Boc-His(Trt)-Aib-OH及其异构体的分离检测方法技术

本发明专利技术公开了Boc

【技术实现步骤摘要】
Boc
‑
His(Trt)
‑
Aib
‑
OH及其异构体的分离检测方法


[0001]本专利技术涉及医药中间体检测
，具体而言，涉及Boc
‑
His(Trt)
‑
Aib
‑
OH及其异构体的分离检测方法。

技术介绍

[0002]Boc
‑
His(Trt)
‑
Aib
‑
OH是目前较常用的氨基酸衍生物，其存在异构体Boc
‑
D
‑
His(Trt)
‑
Aib
‑
OH。由于对映异构体间的性质十分相似，普通的反相色谱条件下，异构体间难以分离，故大多数物质间异构体的分离检测主要采取正相色谱模式。
[0003]但本品种(Boc
‑
His(Trt)
‑
Aib
‑
OH)在现有的正相色谱条件下，构型易翻转导致测得的异构体值不准确，且色谱峰拖尾严重，异构体间难以达到基线分离，从而难以对本品种中的异构体进行准确定量检测。目前文献中暂未见有效解决该品种异构体分离的相关报道。
[0004]鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供Boc
‑
His(Trt)
‑
Aib
‑
OH及其异构体的分离检测方法，旨在解决Boc
‑
His(Trt)
‑
Aib
‑
OH及其异构体峰型较差、难分离定量的难题。
[0006]本专利技术是这样实现的：
[0007]第一方面，本专利技术提供一种Boc
‑
His(Trt)
‑
Aib
‑
OH及其异构体的分离检测方法，包括：
[0008]利用流动相将待测试样溶解得到待测溶液；
[0009]利用反相高效液相色谱法对待测溶液进行检测，流动相采用乙腈、甲醇、冰醋酸和三乙胺形成的混合物，乙腈、甲醇、冰醋酸和三乙胺的体积比为260
‑
300:100
‑
140:0.5
‑
2:0.05
‑
0.2；
[0010]按照面积归一化法计算Boc
‑
His(Trt)
‑
Aib
‑
OH及其异构体的含量。
[0011]在可选的实施方式中，在流动相中，乙腈、甲醇、冰醋酸和三乙胺的体积比为270
‑
290:110
‑
130:1.0
‑
1.5:0.1
‑
0.2。
[0012]在可选的实施方式中，待测溶液中待测样品的浓度为1
‑
3mg/mL。
[0013]在可选的实施方式中，采用色谱柱的内径为4
‑
5mm，长度为150mm，填料粒径为3
‑
6μm。
[0014]在可选的实施方式中，采用色谱柱的型号为CHIRALPAK QD
‑
AX，色谱柱的内径为4.6mm，长度为150mm，填料粒径为5μm。
[0015]在可选的实施方式中，色谱柱的填料选自含奎纳啶衍生物键合硅胶中的任意一种。
[0016]在可选的实施方式中，色谱条件：柱温为23℃
‑
27℃，流速为0.4
‑
0.6mL/min，检测波长为252
‑
256nm。
[0017]在可选的实施方式中，进样体积为5
‑
15μL；优选为9
‑
11μL。
[0018]在可选的实施方式中，测试时等度运行20
‑
40min。
[0019]在可选的实施方式中，按照如下公式计算异构体含量：
[0020][0021]式中，Ai表示异构体峰面积；
[0022]A表示主成分峰面积。
[0023]本专利技术具有以下有益效果：本专利技术采用反相色谱条件进行分离，通过对色谱条件进行优化，特别是优化流动相的组成，能够显著提升Boc
‑
His(Trt)
‑
Aib
‑
OH和及其异构体[Boc
‑
D
‑
His(Trt)
‑
Aib
‑
OH]的分离效果，主成分峰与异构体峰间分离度大于1.5，且峰型较好，故能对异构体进行准确定量。
附图说明
[0024]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
[0025]图1为本专利技术实施例1的液相色谱图；
[0026]图2为本专利技术对比例1的液相色谱图；
[0027]图3为本专利技术对比例2的液相色谱图；
[0028]图4为本专利技术对比例3的液相色谱图；
[0029]图5为本专利技术对比例4的液相色谱图；
[0030]图6为本专利技术对比例5的液相色谱图。
具体实施方式
[0031]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0032]本专利技术提供一种Boc
‑
His(Trt)
‑
Aib
‑
OH及其异构体的分离检测方法，包括：
[0033]S1、待测溶液
[0034]利用流动相将待测试样溶解得到待测溶液，待测溶液中待测样品的浓度为1
‑
3mg/mL，如可以为1.0mg/mL、1.5mg/mL、2.0mg/mL、2.5mg/mL、3.0mg/mL等。
[0035]需要说明的是，在实际应用时将待测试样用流动相溶解，制备满足浓度要求的待测溶液进行检测。为验证本专利技术实施例所提供的分离检测方法的分离效果，专利技术人采用如下方法配置待测溶液：
[0036]取供试品适量，用流动相溶解并制成每1mL中约含1～3mg的供试品溶液；取Boc
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D
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His(Trt)
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Aib
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OH对照品适量，用流动相溶解并制成每1mL中约含0.05mg的异构体储备液；取Boc
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His(Trt)
‑
Aib
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OH对照品适量，用加入异构体储备液适量制成每1mL中约含2mg Boc
‑<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种Boc
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His(Trt)
‑
Aib
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OH及其异构体的分离检测方法，其特征在于，包括：利用流动相将待测试样溶解得到待测溶液；利用反相高效液相色谱法对所述待测溶液进行检测，所述流动相采用乙腈、甲醇、冰醋酸和三乙胺形成的混合物，乙腈、甲醇、冰醋酸和三乙胺的体积比为260
‑
300:100
‑
140:0.5
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2:0.05
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0.2；按照面积归一化法计算Boc
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His(Trt)
‑
Aib
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OH及其异构体的含量。2.根据权利要求1所述的分离检测方法，其特征在于，在所述流动相中，乙腈、甲醇、冰醋酸和三乙胺的体积比为270
‑
290:110
‑
130:1.0
‑
1.5:0.1
‑
0.2。3.根据权利要求1或2所述的分离检测方法，其特征在于，所述待测溶液中待测样品的浓度为1
‑
3mg/mL。4.根据权利要求1所述的分离检测...

【专利技术属性】
技术研发人员：舒娟，徐春梅，吴涛，
申请(专利权)人：成都普康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：