一种测定AEEA-AEEA含量的方法技术

本发明专利技术公开一种测定AEEA

【技术实现步骤摘要】
一种测定AEEA
‑
AEEA含量的方法


[0001]本专利技术属于化学分析领域，具体涉及一种测定AEEA
‑
AEEA含量的方法。

技术介绍

[0002]AEEA
‑
AEEA，中文名为17
‑
氨基
‑
10
‑
氧代
‑
3,6,12,15
‑
四氧杂
‑9‑
氮杂十七烷酸，在生产AEEA
‑
AEEA的工艺中，不免产生各种杂质，其中杂质2A甲酯、AEEA、β
‑
Ala
‑
AEEA（β
‑
Ala
‑
A）、β
‑
Ala
‑
2A和3A是几种主要的杂质。产品AEEA
‑ꢀ
AEEA以及各杂质的极性偏大，现有技术中并无AEEA
‑ꢀ
AEEA以及上述杂质的测定方法，以检测AEEA
‑ꢀ
AEEA的含量。

技术实现思路

[0003]为了解决上述问题，本专利技术提供一种测定AEEA
‑
AEEA含量的方法，该方法基于高效液相色谱仪，可有效将目标产物与其他杂质进行分离，从而准确测定目标产物的含量。
[0004]为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种测定AEEA
‑
AEEA含量的方法，待检测样品稀释后进入高效液相色谱仪中进行检测；色谱条件为：色谱柱：Welch Ultimate HILIC Silica，250mm
×
4.6mm 5μm；流动相流速：1.0mL/min；柱温：35
±
2℃；检测波长：205nm；洗脱梯度程序：0
‑
10min内，流动相A由10%升到20%，流动相B由90%下降到80%，10
‑
45min内，流动相A由20%上升到30%，流动相B由80%下降到70%，45
‑
50min内，流动相A保持30%，流动相B保持70%，50
‑
51min内，流动相A由30%降至10%，流动相B由70%升至90%，51
‑
66min内，流动相A保持10%，流动相B保持90%；其中，流动相A为0.01mol/L醋酸铵水溶液，流动相B为乙腈。
[0005]进一步的，待检测样品中的杂质包含杂质2A甲酯、杂质AEEA、杂质β
‑
Ala
‑
AEEA、杂质β
‑
Ala
‑
2A和杂质3A。
[0006]进一步的，待测样品稀释剂为乙腈与水的混合溶剂，其中乙腈与水的体积比为1:1。
[0007]进一步的，所述色谱柱的规格为250mm
×
4.6mm 5μm。
[0008]进一步的，具体步骤为：（1）绘制标准曲线：将AEEA
‑
AEEA标准品配置成不同浓度的试样，不同浓度的标准品试样进入高效液相色谱仪进行检测，得到不同浓度的主产品AEEA
‑
AEEA的峰对应的峰面积，绘制出标准曲线；（2）配制待检测样品稀释液；（3）待检测样品的稀释液进入高效液相色谱系统中进行检测，进样量为20μL，得到主产品AEEA
‑
AEEA的峰的峰面积；（4）将步骤（3）所得峰面积代入步骤（1）所得标准曲线，得到待测样品中主产品AEEA
‑
AEEA的浓度，再根据计算浓度与实际稀释浓度计算出含量。
[0009]进一步的，步骤（2）中稀释液浓度为30mg/mL。
[0010]与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：
本专利技术中，产品AEEA
‑
AEEA和各杂质的极性偏大，在普通液相C18柱中几乎无保留，且产品与各杂质的极性相近，极难分离，本专利技术选择Welch Ultimate HILIC Silica色谱柱，该色谱柱联合且本专利技术的洗脱程序及流动相，可有效将产品和各杂质分离开来，从而实现对目标产品的含量检测，其中流动相A为0.01mol/L醋酸铵水溶液，一方面可以改善各峰形，减少拖尾现象，另一方面由于拖尾现象减少，提高了主峰与杂质峰之间的分离。
[0011]本专利技术中，产品AEEA
‑
AEEA以及各杂质的紫外吸收弱，本专利技术将检测波长设置为205nm，且待检测样品的浓度为30mg/mL，进样量为20μL，增加杂质峰吸收，信号增强，避免杂质未出峰。
附图说明
[0012]图1为AEEA
‑
AEEA、2A甲酯、AEEA、β
‑
Ala
‑
AEEA、β
‑
Ala
‑
2A、3A出峰图。
具体实施方式
[0013]下面结合实施例对本专利技术作进一步的描述，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，并不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域的普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的其他所有实施例，都属于本专利技术的保护范围。
实施例
[0014]色谱条件为：色谱柱：Welch Ultimate HILIC Silica，250mm
×
4.6mm 5μm；流动相流速：1.0mL/min；柱温：35
±
2℃；样品温度：25
±
3℃；检测波长：205nm；洗脱梯度程序：0
‑
10min内，流动相A由10%升到20%，流动相B由90%下降到80%，10
‑
45min内，流动相A由20%上升到30%，流动相B由80%下降到70%，45
‑
50min内，流动相A保持30%，流动相B保持70%，50
‑
51min内，流动相A由30%降至10%，流动相B由70%升至90%，51
‑
66min内，流动相A保持10%，流动相B保持90%；其中，流动相A为0.01mol/L醋酸铵水溶液，流动相B为乙腈；（1）绘制标准曲线：将AEEA
‑
AEEA标准品配置成27 mg/mL、28 mg/mL、29 mg/mL、30 mg/mL、31 mg/mL、32mg/mL的试样，不同浓度的标准品试样进入高效液相色谱仪进行检测，色谱条件如上所述，得到不同浓度的主产品AEEA
‑
AEEA的峰对应的峰面积，绘制出标准曲线，得到回归方程y=87x+1735，R2=0.9996，因此，在27
‑
32mg/mL范围内线性良好，其中y为峰面积，x为样品浓度；（2）配制待检测样品稀释液，待检测样品的浓度为约30mg/mL；（3）待检测样品的稀释液进入高效液相色谱系统中进行检测，进样量为20μL，得到主产品AEEA
‑
AEEA的峰的峰面积；（4）将步骤（3）所得峰面积代入步骤（1）所得标本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种测定AEEA
‑
AEEA含量的方法，其特征在于，待检测样品稀释后进入高效液相色谱仪中进行检测；色谱条件为：色谱柱：Welch Ultimate HILIC Silica；流动相流速：1.0mL/min；柱温：35
±
2℃；检测波长：205nm；洗脱梯度程序：0
‑
10min内，流动相A由10%升到20%，流动相B由90%下降到80%，10
‑
45min内，流动相A由20%上升到30%，流动相B由80%下降到70%，45
‑
50min内，流动相A保持30%，流动相B保持70%，50
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51min内，流动相A由30%降至10%，流动相B由70%升至90%，51
‑
66min内，流动相A保持10%，流动相B保持90%；其中，流动相A为0.01mol/L醋酸铵水溶液，流动相B为乙腈。2.根据权利要求1所述的一种测定AEEA
‑
AEEA含量的方法，其特征在于，待检测样品中的杂质包含杂质2A甲酯、杂质AEEA、杂质β
‑
Ala
‑
AEEA、杂质β
‑
Ala
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2A和杂质3A。3.根据权利要求2所述的一种测定AEEA
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【专利技术属性】
技术研发人员：罗前东，舒娟，
申请(专利权)人：成都普康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：