本发明专利技术涉及小反刍兽疫病毒抗体检测试剂盒。本发明专利技术的检测试剂盒包括固相载体以及独立地连接于所述固相载体上的特定多肽组合。所述试剂盒被采用以用于区分受到小反刍兽疫疫苗免疫的对象生物和受到小反刍兽疫病毒自然感染的对象生物，或者用于从受到小反刍兽疫疫苗免疫的对象生物群体中区分出受到小反刍兽疫疫苗免疫后又受到小反刍兽疫病毒自然感染的对象生物。
【技术实现步骤摘要】
可用于区分疫苗免疫和自然感染的小反刍兽疫检测试剂盒
本专利技术主要涉及兽用检测试剂盒。具体而言，该试剂盒可用于区分对象生物中的小反刍兽疫疫苗免疫和小反刍兽疫自然感染。
技术介绍
小反刍兽疫(pestedespetitsruminants，PPR)俗称羊瘟，又名小反刍兽假性牛瘟(pseudorinderpest)、肺肠炎(pneumoenteritis)、口炎肺肠炎复合症(stomatitis-pneumoenteritiscomplex)，是由小反刍兽疫病毒引起的一种急性病毒性传染病，主要感染小反刍动物，以发热、口炎、腹泻、肺炎为特征。1942年本病首次在象牙海岸发生，其后，非洲的塞内加尔、加纳、多哥、贝宁等有本病报道，尼日利亚的绵羊和山羊中也发生了本病，并造成了重大损失。亚洲的一些国家也报道了本病，根据世界动物卫生组织(OIE)1993年《世界动物卫生》报道，孟加拉国的山羊有本病发生，印度德拉邦和马哈拉施特拉邦的部分地区绵羊中发生了类似牛瘟的疾病，最后确诊为小反刍兽疫，此后，泰米尔拉德邦也有受到感染报道。1993年，以色列第一次报道有小反刍兽疫发生，传染来源不明，为防止本病传播，以色列对其北部地区的绵羊和山羊接种了牛瘟疫苗。1992年，约旦的绵羊和山羊中发现了本病特异性抗体，1993年，有11个农场出现临诊病例，100多只绵羊和山羊死亡。1993年，沙特阿拉伯首次发现133个病例。2007年7月，该疫病首次传入我国西藏地区。小反刍兽疫病毒属副黏病毒科麻疹病毒属。与牛瘟病毒有相似的物理化学及免疫学特性。病毒呈多形性，通常为粗糙的球形。病毒颗粒较牛瘟病毒大，核衣壳为螺旋中空杆状并有特征性的亚单位，有囊膜。病毒可在胎绵羊肾、胎羊及新生羊的睾丸细胞、Vero细胞上增殖，并产生细胞病变(CPE)，形成合胞体。小反刍兽疫主要感染山羊、绵羊、美国白尾鹿等小反刍动物，发病动物死亡率高，为我国划定的一类动物疫病。目前，尚无有效方法治疗小反刍兽疫，只能采取疫苗接种、疫情发生后扑杀及定期血清监测的方法来进行控制。因此，该病的血清学诊断及疫苗免疫效果的评估与监测显得尤为重要。世界动物卫生组织推荐采用的小反刍兽疫病毒抗体检测方法主要有病毒中和试验(VNT)和酶联免疫测定(ELISA)。其中，病毒中和试验方法的检测结果准确，是检测小反刍兽疫病毒的金标准，但该方法检测时间长且不适于检测大量样本。与此相对，酶联免疫测定的特异性和敏感性较高、检测时间比病毒中和试验短且适合检测大量样品，因此，被广泛应用于小反刍兽疫病毒抗体的检测。但是，疫苗免疫并非百分之百成功，会出现免疫失败、动物接受免疫后又发生自然感染现象。这些免疫后又被感染的动物可能成为动物群体中的传染源，增加动物群体性发病的风险。因此，尽快识别出这些免疫后又被感染的动物并将其扑杀是十分重要的。另一方面，小反刍兽疫疫苗为减毒活疫苗，现有的小反刍兽疫病毒抗体检测方法无论是病毒中和试验(VNT)还是酶联免疫测定(ELISA)，都不能区分疫苗免疫和自然感染。
技术实现思路
鉴于上述现有技术中存在的问题，本专利技术的目的在于提供一种能够用于区分小反刍兽疫疫苗免疫和小反刍兽疫病毒自然感染的检测试剂盒。专利技术人为解决上述技术问题进行了深入研究，结果发现通过将下述多肽组合1中的至少一条多肽(即一条、两条、三条、四条或全部多肽)是否对对象生物来源的生物样本有响应作为指标，能够区分对象生物是被小反刍兽疫疫苗免疫还是被小反刍兽疫病毒自然感染。从而，完成了本专利技术。因此，本专利技术包括：1.一种多肽组合，其包括：a.SEQIDNO：1所示的多肽(N50)，以及b.SEQIDNO：2所示的多肽(N49)，以及c.SEQIDNO：3所示的多肽(N47)或SEQIDNO：4所示的多肽(N46)。2.根据项1所述的多肽组合，其中，所述多肽组合还包括：d.SEQIDNO：5所示的多肽(F10)。在此，各序列为：SEQIDNO：1：SAEALFRLQAMAKILEDQEE。SEQIDNO：2：SSQNPREAQRSAEALFRLQA。SEQIDNO：3：GETPGPLLPEIMQEDELSRE。SEQIDNO：4：TKRTRSGKPRGETPGPLLPE。SEQIDNO：5：TKNVRPIQTLTPGRRTRRFV。3.根据项1或2所述的多肽组合在制备小反刍兽疫检测试剂盒中的用途。4.根据项3所述的用途，其中所述试剂盒被采用以用于区分受到小反刍兽疫疫苗免疫的对象生物和受到小反刍兽疫病毒自然感染的对象生物，或者用于从受到小反刍兽疫疫苗免疫的对象生物群体中区分出受到小反刍兽疫疫苗免疫后又受到小反刍兽疫病毒自然感染的对象生物。在此，具体的区分方法是，以所述多肽组合中是否至少有一条多肽(即一条、两条、三条、四条或全部多肽)对来源于对象生物的生物样本有响应作为指标。出现上述响应则说明存在自然感染。“响应”是指R值大于或等于0.3，其中，R＝SNR1/SNR0，SNR1测得的生物样本的SNR值，SNR0是测得的阳性标准品的SNR值。5.根据项3所述的用途，其中，所述对象生物是小反刍动物。6.根据项3所述的用途，其中，所述对象生物是山羊或绵羊。7.根据项3所述的用途，其中，所述试剂盒的固相载体上连接有来自于小反刍兽疫病毒的蛋白。8.一种小反刍兽疫检测试剂盒，其固相载体上连接有根据项1或2所述的多肽组合。在此，对固体载体没有特殊限制，只要是作为固体或不溶性材料的载体即可。多肽与固体载体的连接可以采用本领域技术人员公知的多肽与固体载体的连接方法来进行。9.根据项8所述的试剂盒，其固相载体上还连接有来自于小反刍兽疫病毒的蛋白。10.根据项9所述的试剂盒，其中，所述来自于小反刍兽疫病毒的蛋白是N蛋白、F蛋白和/或H蛋白。在此，N蛋白是指小反刍兽疫病毒的核衣壳蛋白(Nucleocapsidprotein)，H蛋白是指小反刍兽疫病毒的血凝素蛋白(Haemagglutininprotein)，F蛋白是指小反刍兽疫病毒的融合蛋白(Fusionprotein)。11.根据项8所述的试剂盒，其中，所述试剂盒被采用以用于区分受到小反刍兽疫疫苗免疫的对象生物和受到小反刍兽疫病毒自然感染的对象生物，或者用于从受到小反刍兽疫疫苗免疫的对象生物群体中区分出受到小反刍兽疫疫苗免疫后又受到小反刍兽疫病毒自然感染的对象生物。12.根据项8所述的试剂盒，其中，所述对象生物是小反刍动物。13.根据项8所述的试剂盒，其中，所述对象生物是山羊或绵羊。在此，所述生物样本可以是对象生物的全血、血浆或血清。即使在用小反刍兽疫疫苗为减毒活疫苗对动物群体中的对象生物进行免疫的情况下，使用本专利技术的小反刍兽疫检测试剂盒也能够区分疫苗免疫和自然感染。简单地讲，本专利技术能够取得这样的技术效果的原因是被疫苗免疫或自然感染时，对象生物产生的结合上本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种多肽组合，其包括：/nSEQ ID NO：1所示的多肽(N50)，以及/nSEQ ID NO：2所示的多肽(N49)，以及/nSEQ ID NO：3所示的多肽(N47)或SEQ ID NO：4所示的多肽(N46)。/n
【技术特征摘要】
1.一种多肽组合，其包括：
SEQIDNO：1所示的多肽(N50)，以及
SEQIDNO：2所示的多肽(N49)，以及
SEQIDNO：3所示的多肽(N47)或SEQIDNO：4所示的多肽(N46)。
2.根据权利要求1所述的多肽组合，其中，所述多肽组合还包括：
d.SEQIDNO：5所示的多肽(F10)。
3.根据权利要求1或2所述的多肽组合在制备小反刍兽疫检测试剂盒中的用途。
4.根据权利要求3所述的用途，其中所述试剂盒被采用以用于区分受到小反刍兽疫疫苗免疫的对象生物和受到小反刍兽疫病毒自然感染的对象生物，或者用于从受到小反刍兽疫疫苗免疫的对象生物群体中区分出受到小反刍兽疫疫苗免疫后又受到小反刍兽疫病毒自然感染的对象生物。
【专利技术属性】
技术研发人员：薛青红，孙淼，刘彬，朱强，陈延飞，陈建，李岭，才学鹏，
申请(专利权)人：中国兽医药品监察所，苏州工业园区强东医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11
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