调节性T细胞表面抗原的表位以及与其特异性结合的抗体制造技术

本发明专利技术涉及富含亮氨酸和免疫球蛋白样结构域1(Lrig‑1)的表位以及与其特异性结合的抗体或抗原结合片段，Lrig‑1是存在于调节性T细胞表面上的抗原。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】调节性T细胞表面抗原的表位以及与其特异性结合的抗体
本专利技术涉及富含亮氨酸和免疫球蛋白样结构域1(Lrig-1)蛋白的表位，其是存在于调节性T细胞表面上的抗原，以及与其特异性结合的抗体或抗原结合片段。
技术介绍
在所有正常个体中，最重要的特征之一是具有识别和消除非自身抗原的能力，同时又不会对构成自身的抗原性物质产生有害反应。这样，活体对自身抗原没有响应称为免疫学无反应性或耐受性。通过消除可能具有自身抗原特异性受体的淋巴细胞，或通过在接触自身抗原后自身失活反应能力而发生自我耐受。在诱导或维持自身耐受性出现问题的情况下，发生了对自身抗原的免疫反应，并且由此产生的疾病被称为自身免疫疾病。为了治疗自身免疫性疾病，Gershon在1970年代初首次介绍并提出了抑制性T细胞的概念，该概念暗示可能存在能够控制和抑制常规T细胞的效应子功能的T细胞(R.K.Gershon和K.Kondo,Immunology,1970,18:723-37)。从那时起，已进行研究以阐明调节性T细胞在免疫学的许多领域中的生物学特性和功能。关于这一点，已经报道调节性T细胞(Treg细胞)在自然地预防过度发炎和免疫反应的发生中起重要作用；但是，在发生自身免疫疾病和慢性炎性疾病的情况下，调节性T细胞的功能和数量显著降低。因此，对于患有免疫和炎性疾病的患者，重要的是以正常水平产生调节性T细胞，这可以作为这些疾病的治疗方法之一。迄今为止，已经对调节性T细胞中特异存在的基因和蛋白质进行了研究，并且已经提出诸如CD25、CTLA4、CD62L、CD38、CD103、GITR和CD45RB的物质可能对应于标记物质。但是，没有基因和蛋白质只能单独靶向调节性T细胞。另一方面，存在三个称为互补决定区的高变区(以下称为“CDR”)和四个构架区。CDR主要用于结合抗原上的表位。每条链的CDR通常从N端开始依次被称为CDR1、CDR2和CDR3，并且也通过具体CDR所在的链来区分。
技术实现思路
技术问题本专利技术的目的在于提供一种富含富亮氨酸和免疫球蛋白样结构域1(Lrig-1)蛋白的表位，其存在于调节性T细胞(Treg细胞)表面。本专利技术的另一个目的是提供能够特异性结合所述表位的抗体或抗原结合片段。本专利技术的又一个目的是提供用于预防或治疗癌症的药物组合物，其包含能够特异性结合所述表位的抗体或抗原结合片段。本专利技术的又一个目的是提供一种预防或治疗癌症的方法，使用能够特异性结合所述表位的抗体或抗原结合片段。然而，本专利技术要实现的技术问题不限于上述问题，本领域技术人员根据以下描述将清楚地理解未提及的其他问题。问题的解决方法本专利技术涉及富含亮氨酸和免疫球蛋白样结构域1(Lrig-1)蛋白的表位，或特异性结合该表位的抗体或抗原结合片段。在本专利技术中，“Lrig-1蛋白”是存在于调节性T细胞表面上的跨膜蛋白，由富含亮氨酸的重复序列(LRR)和细胞外或管腔侧的三个免疫球蛋白样结构域，细胞跨膜序列和胞质尾部组成。LRIG基因家族包括LRIG1、LRIG2和LRIG3，并且它们之间的氨基酸是高度保守的。LRIG1基因在正常皮肤中高表达，并可以在基底和毛囊细胞中表达，以调节上皮干细胞的增殖。因此，LRIG1基因在维持表皮的稳态中起着重要的作用，而LRIG1基因的缺失可能发展为牛皮癣或皮肤癌。已经报道在LRIG1所在的染色体3p14.3部分被切除的情况下，有可能发展为癌细胞。实际上，已经确定在肾细胞癌和皮肤鳞状细胞癌中LRIG1的表达大大降低。最近，还发现Lrig-1仅在约20％至30％的癌症中表达。另一方面，出于本专利技术的目的，Lrig-1蛋白可以是，但不限于人或小鼠中存在的蛋白。在本专利技术的一实施例中，Lrig-1蛋白可以是源自哺乳动物的Lrig-1蛋白，所述哺乳动物包括灵长类，例如人和猴，以及啮齿类动物，例如小鼠和大鼠。在本专利技术的一实施例中，Lrig-1蛋白可以是由SEQIDNO：1表示的人源Lrig-1蛋白，其可以但不限于由SEQIDNO：2表示的核酸序列编码(见表1)。表1在本专利技术的另一实施例中，Lrig-1蛋白可以是，但不限于SEQIDNO：3表示的小鼠源Lrig-1蛋白(见表2)。表2根据本专利技术的一实施方式，提供了一种作为Lrig-1蛋白的表位的表位，其包括由式1表示的氨基酸序列组成的多肽，[式1]Lx1Lx2x3N在式1中，x1至x3可各自独立地为中性氨基酸、酸性氨基酸、碱性氨基酸或芳族氨基酸。在此，中性氨基酸可以是甘氨酸(G)、丙氨酸(A)、缬氨酸(V)、亮氨酸(L)、异亮氨酸(I)、丝氨酸(S)或苏氨酸(T)；酸性氨基酸可以是天冬氨酸(D)、谷氨酸(E)、天冬酰胺(N)或谷氨酰胺(Q)；碱性氨基酸可以是赖氨酸(K)、精氨酸(R)或组氨酸(H)；芳香族氨基酸可以为苯丙氨酸(F)或酪氨酸(Y)。在本专利技术的一实施例中，x1至x3可各自独立地为选自下组的氨基酸：天冬酰胺(N)、天冬氨酸(D)、丝氨酸(S)、酪氨酸(Y)、精氨酸(R)、苯丙氨酸(F)、赖氨酸(K)、组氨酸(H)、亮氨酸(L)、缬氨酸(V)、苏氨酸(T)、丙氨酸(A)、谷氨酰胺(Q)、谷氨酸(E)和甘氨酸(G)。在本专利技术的另一实施例中，x1可以是选自下组的氨基酸：天冬酰胺(N)、苯丙氨酸(F)、天冬氨酸(D)、赖氨酸(K)、组氨酸(H)、缬氨酸(V)、精氨酸(R)和苏氨酸(T)；x2可以是选自下组的氨基酸：丝氨酸(S)、谷氨酰胺(Q)、丙氨酸(A)、天冬酰胺(N)、谷氨酸(E)、天冬氨酸(D)、苯丙氨酸(F)和甘氨酸(G)；x3可以是选自下组的氨基酸：酪氨酸(Y)、组氨酸(H)、甘氨酸(G)、精氨酸(R)、天冬酰胺(N)、亮氨酸(L)、赖氨酸(K)和苯丙氨酸(F)。在本专利技术的另一实施例中，x1至x3可以各自独立地是选自下组的氨基酸：天冬酰胺(N)、天冬氨酸(D)、丝氨酸(S)、酪氨酸(Y)和精氨酸(R)。在本专利技术的又一实施例中，x1可以是天冬酰胺(N)或天冬氨酸(D)；x2可以是丝氨酸(S)或天冬酰胺(N)；和x3可以是酪氨酸(Y)或精氨酸(R)。在本专利技术中，表位包括由式1表示的氨基酸序列组成的多肽，并且可以由10至20聚体，优选10至15聚体，并且更优选11至14聚体组成。另外，在本专利技术中，表位中由式1表示的氨基酸序列组成的多肽可以位于自表位的N末端的3-6位，优选4-6位，更优选5位。作为本专利技术的一实施例，由式1表示的氨基酸序列组成的多肽可以由但不限于下表3中的SEQIDNO：4至17的任何一个氨基酸序列表示：[表3]作为本专利技术的另一实施例，表位可以但不限于由SEQIDNO：18或20的氨基酸序列表示。根据本专利技术的另一实施方式，提供了一种作为Lrig-1蛋白的表位的表位，其包含由下表4中的SEQIDNO：18至29的任何一个氨基酸序列表示的多肽：[本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种与表位特异性结合的抗体或抗原结合片段，该表位包括由式1表示的氨基酸序列组成的多肽：/n[式1]/nLx

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180509 KR 10-2018-00530521.一种与表位特异性结合的抗体或抗原结合片段，该表位包括由式1表示的氨基酸序列组成的多肽：
[式1]
Lx1Lx2x3N
在式1中，x1-x3各自独立地为中性氨基酸、酸性氨基酸、碱性氨基酸或芳香族氨基酸。


2.如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，x1-x3各自独立地选自下组：天冬酰胺(N)、天冬氨酸(D)、丝氨酸(S)、酪氨酸(Y)、精氨酸(R)、苯丙氨酸(F)、赖氨酸(K)、组氨酸(H)、亮氨酸(L)、缬氨酸(V)、苏氨酸(T)、丙氨酸(A)、谷氨酰胺(Q)、谷氨酸(E)和甘氨酸(G)。


3.如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，x1选自下组：天冬酰胺(N)、苯丙氨酸(F)、天冬氨酸(D)、赖氨酸(K)、组氨酸(H)、缬氨酸(V)、精氨酸(R)和苏氨酸(T)，
x2选自下组：丝氨酸(S)、谷氨酰胺(Q)、丙氨酸(A)、天冬酰胺(N)、谷氨酸(E)、天冬氨酸(D)、苯丙氨酸(F)和甘氨酸(G)，以及
x3选自下组：酪氨酸(Y)、组氨酸(H)、甘氨酸(G)、精氨酸(R)、天冬酰胺(N)、亮氨酸(L)、赖氨酸(K)和苯丙氨酸(F)。


4.如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述表位由10至20聚体组成。


5.如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，由式1表示的氨基酸序列组成的多肽位于自表位N端的3至6位。


6.如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述多肽由SEQIDNO：4至17的任何一个氨基酸序列表示。


7.一种抗体或抗原结合片段，其特异性结合由SEQIDNO：18至29的任何一个氨基酸序列表示的Lrig-1蛋白的表位。


8.一种富含亮氨酸和免疫球蛋白样结构域1(Lrig-1)蛋白的表位，包括：

【专利技术属性】
技术研发人员：金廷镐，金范锡，
申请(专利权)人：古德T细胞有限公司，
类型：发明
国别省市：韩国;KR