LRIG-1蛋白的特异性结合分子及其用途制造技术

本发明专利技术涉及能够与位于调节性T细胞的表面上的Lrig

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】LRIG
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1蛋白的特异性结合分子及其用途


[0001]本专利技术涉及能够与存在于调节性T细胞(T regulatory cell，Treg细胞)表面的Lrig
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1(富含亮氨酸和免疫球蛋白样结构域1)蛋白特异性结合的结合分子及其用途。
技术背景
[0002]所有正常个人中最重要的特性之一是有能力识别和消除非自身抗原，而不会对构成自身的抗原物质产生有害的反应。因此，生物体对自身抗原的无应答被称为免疫无应答性(immunologic unresponsiveness)或耐受性(tolerance)。自身耐受性的产生是通过清除可能具有自身抗原特异性受体的淋巴细胞，或通过接触自身抗原后反应能力的自我失活。如果在诱导或维持自身耐受方面出现问题，发生对自身抗原的免疫应答，并且由此产生的疾病称为自身免疫疾病(autoimmune disease)。
[0003]为了治疗自身免疫性疾病，Gershon在20世纪70年代初首次提出了抑制T细胞的概念(R.K.Gershon和K.Kondo，Immunology，1970,18：723
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37)，提示了存在能够控制和抑制传统T细胞(conventional T cells)效应功能(effector functio)的T细胞的可能性。从那时起，已经进行了研究以阐明在免疫学的许多领域中调节性T细胞的生物学性质和功能。
[0004]在这方面，据报道，调节性T细胞(Treg细胞)在天然防止过度炎症和免疫应答的发生中起重要作用；然而，在发生自身免疫疾病和慢性炎症疾病的情况下，调节性T细胞的功能和数量显着降低。因此，在患者患有免疫和炎症性疾病的情况下，调节性T细胞以正常水平产生是很重要的，这可以成为这些疾病的治疗方法之一。
[0005]到目前为止，已经进行了关于特异性存在于调节性T细胞中的基因和蛋白质的研究，并且已经提出了如CD25、CTLA4、CD62L、CD38、CD103、GITR和CD45RB等物质可能与标记物质相对应。然而，没有基因和蛋白质可以仅靶向调节性T细胞。
[0006]另一方面，存在三个称为互补决定区域(complementarity determining region，以下称为“CDR”)的高变区和四个框架区域(framework region)。CDR主要作用是与抗原上的表位(epitope)结合。每种链的CDR通常从N
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末端开始依次称为CDR1、CDR2和CDR3，并且还由特定CDR所在的链来区分。
[0007]技术问题
[0008]本专利技术的一个目的是提供一种存在于调节性T细胞表面(Treg细胞)的Lrig
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1蛋白的特异性结合分子。
[0009]本专利技术的另一个目的是提供一种编码本专利技术的结合分子的核酸分子。
[0010]本专利技术的又一个目的是提供一种插入有本专利技术的核酸分子的表达载体。
[0011]本专利技术的又一个目的是提供一种用本专利技术的表达载体转染的宿主细胞系。
[0012]本专利技术的又一个目的是提供一种根据本专利技术的抗体
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药物缀合物。
[0013]本专利技术的又一个目的是提供一种用于预防或治疗免疫相关疾病的药物组合物，其包含本专利技术的结合分子。
[0014]本专利技术的又一个目的是提供一种用于预防或治疗免疫相关疾病的方法，包括将本
专利技术提供的药物有效量的结合分子或抗体
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药物缀合物(Antibody
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Drug Conjugate,ADC)给予个体的步骤。
[0015]然而，本专利技术要解决的技术问题不限于上述问题，并且从以下描述中本领域技术人员将清楚地理解其他未提到的问题。
[0016]技术问题的解决方案
[0017]本专利技术人已经发现了特异性地存在于调节性T细胞表面的Lrig
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1蛋白，在所述蛋白上选择了表位，并产生了能够与Lrig
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1蛋白质特异性结合的单克隆抗体，从而完成了本专利技术。
[0018]根据本专利技术的一个实施方式，提供了一种结合分子，其特异性结合Lrig
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1(富含亮氨酸和免疫球蛋白样结构域1)蛋白。
[0019]如本文所用，术语“结合分子”是指包含完整免疫球蛋白的可变结构域，其包括单克隆抗体(例如嵌合、人源化或人单克隆抗体)，或者与抗原结合的免疫球蛋白(例如与完整(intact)免疫球蛋白竞争结合A型流感病毒的单体HA或三聚体HA的免疫球蛋白片段)。无论结构如何，抗原结合片段与完整(intact)免疫球蛋白识别的相同抗原结合。抗原结合片段可包括肽或多肽，其含有结合分子的氨基酸序列中的两个或更多个连续残基的氨基酸序列、20个或更多个连续氨基酸残基、25个或更多个连续氨基酸残基、30个或更多个连续氨基酸残基、35个或更多个连续氨基酸残基、40个或更多个连续氨基酸残基、50个或更多个连续氨基酸残基、60个或更多个连续氨基酸残基、70个或更多个连续氨基酸残基、80个或更多个连续氨基酸残基、90个或更多个连续氨基酸残基、100个或更多个连续氨基酸残基、125个或更多个连续氨基酸残基、150个或更多个连续氨基酸残基、175个或更多个连续氨基酸残基、200个或更多个连续氨基酸残基、或250个或更多个连续氨基酸残基。术语“抗原结合片段”，特别是包括Fab、F(AB')、F(AB')2、Fv、dAb、FD、互补决定区(CDR)片段、单链抗体(scFv)、二价(bivalent)单链抗体、单链噬菌体抗体、单抗体(unibody)、双抗体(diabody)、三抗体、四抗体、含有至少一个足以使特定抗原结合多肽的免疫球蛋白片段的多肽，等。所述片段可以合成或通过酶促或化学消化完整的免疫球蛋白生产，或者可以通过使用重组DNA技术通过基因工程方法生产。生产方法在本领域中是众所周知的。
[0020]在本专利技术中，Lrig
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1蛋白质是存在于调节性T细胞表面上由1091个氨基酸组成的跨膜蛋白，并且由细胞外或腔侧的富含亮氨酸的重复(leucine
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rich repeat,LRR)和三个免疫球蛋白样结构域，细胞跨膜序列和细胞质尾部组成。LRIG基因家族包括LRIG1、LRIG2和LRIG3，其间的氨基酸高度保守。LRIG1基因在正常皮肤中高度表达，可在基底细胞和毛囊细胞中表达以调节上皮干细胞的增殖。因此，LRIG1基因在维持表皮的稳态中起重要作用，并且其缺失可能会产生牛皮癣或皮肤癌。据报道，当LRIG1所在的染色体3p14.3部分被切断时，有可能发展成癌细胞。事实上，发现LRIG1在肾细胞癌和皮肤鳞状细胞癌中的表达明显降低。最近发现，仅有约20％至30％的癌症表达Lrig
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1。另一方面，为了本专利技术的目的，Lrig
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1蛋白可以是但不限于存在于人或小鼠中的蛋白质。
[0021]在本专利技术中，Lrig
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种与Lrig
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1(富含亮氨酸和免疫球蛋白样结构域1)蛋白特异性结合的结合分子，所述结合分子包括：重链可变区域，其包含选自SEQ ID NO：5、13、21和29所示的氨基酸序列的重链CDR1；选自SEQ ID NO:6、14、22和30所示的氨基酸序列的重链CDR2；选自SEQ ID NO:7、15、23和31所示的氨基酸序列的重链CDR3；和轻链可变区，其包含选自SEQ ID NO：8、16、24和32所示的氨基酸序列的轻链CDR1；选自SEQ ID NO：9、17、25和33所示的氨基酸序列的轻链CDR2；选自SEQ ID NO：10、18、26和34所示的氨基酸序列的轻链CDR3。2.根据权利要求1所述的结合分子，其中所述Lrig
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1蛋白包含SEQ ID NO：1或3所示的氨基酸序列。3.根据权利要求1所述的结合分子，其中所述Lrig
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1蛋白由SEQ ID NO：2或4所示的多核苷酸编码。4.根据权利要求1所述的结合分子，其中所述结合分子包含：重链可变区，其选自包含(a)至(d)的下组：(a)含有由SEQ ID NO：5所示的重链CDR1，由SEQ ID NO：6所示的重链CDR2，和由SEQ ID NO：7所示的重链CDR3的重链可变区；(b)含有由SEQ ID NO：13所示的重链CDR1，由SEQ ID NO：14所示的重链CDR2，和由SEQ ID NO：15所示的重链CDR3的重链可变区；(c)含有由SEQ ID NO：21所示的重链CDR1，由SEQ ID NO：22所示的重链CDR2，和由SEQ ID NO：23所示的重链CDR3的重链可变区；和(d)含有由SEQ ID NO：29所示的重链CDR1，由SEQ ID NO：30所示的重链CDR2，和由SEQ ID NO：31所示的重链CDR3的重链可变区；以及轻链可变区，其选自包含(e)至(h)的下组：(e)含有由SEQ ID NO：8所示的轻链CDR1，由SEQ ID NO：9所示的轻链CDR2，和由SEQ ID NO：10所示的轻链CDR3的轻链可变区；(f)含有由SEQ ID NO：16所示的轻链CDR1，由SEQ ID NO：17所示的轻链CDR2，和由SEQ ID NO：18所示的轻链CDR3的轻链可变区；(g)含有由SEQ ID NO：24所示的轻链CDR1，由SEQ ID NO：25所示的轻链CDR2，和由SEQ ID NO：26所示的轻链CDR3的轻链可变区；(h)含有由SEQ ID NO：32所示的轻链CDR1，由SEQ ID NO：33所示的轻链CDR2，和由SEQ ID NO：34所示的轻链CDR3的轻链可变区。5.根据权利要求1所述的结合分子，其中所述结合分子选自包含(1)至(4)的下组：(1)包含含有由SEQ ID NO：5所示的重链CDR1，由SEQ ID NO：6所示的重链CDR2，和由SEQ ID NO：7所示的重链CDR3的重链可变区；以及含有由SEQ ID NO：8所示的轻链CDR1，由SEQ ID NO：9所示的轻链CDR2，由SEQ ID NO：10所示的轻链CDR3的轻链可变区的结合分子；(2)包含含有由SEQ ID NO：13所示的重链CDR1，由SEQ ID NO：14所示的重链CDR2，和由SEQ ID NO：15所示的重链CDR3的重链可变区；以及含有由SEQ ID NO：16所示的轻链CDR1，
由SEQ ID NO：17所示的轻链CDR2，和由SEQ ID NO：18所示的轻链CDR3的轻链可变区的结合分子；(3)包含含有由SEQ ID NO：21所示的重链CDR1，由SEQ ID NO：22所示的重链CDR2，和由SEQ ID NO：23所示的重链CDR3的重链可变区；以及含有由SEQ ID NO：24所示的轻链CDR1，由SEQ ID NO：25所示的轻链CDR2，和由SEQ ID NO：26所示的轻链CDR3的轻链可变区的结合分子；(4)包含含有由SEQ ID NO：29所示的重链CDR1，由SEQ ID NO：30所示的重链CDR2，和由SEQ ID NO：31所示的重链CDR3的重链可变区；以及含有由SEQ ID NO：32所示的轻链CDR1，由SEQ ID NO：33所示的轻链CDR2，和由SEQ ID NO：34所示的轻链CDR3的轻链可变...

【专利技术属性】
技术研发人员：金廷镐，金范锡，
申请(专利权)人：古德T细胞有限公司，
类型：发明
国别省市：