抗CLDN抗体及其药物组合物和检测方法技术

本发明专利技术提供一种抗CLDN抗体及其药物组合物和检测方法，其中，所述抗体的重链包含一种或一种以上的CDR，重链的CDR与SEQ ID No.1至SEQ ID No.7中或者SEQ ID No.15至SEQ ID No.30中的任意一条的CDR序列相比，相差不多于三个氨基酸，所述抗体的轻链包含一种或一种以上的CDR，轻链的CDR与SEQ ID No.8至SEQ ID No.14中或者SEQ ID No.31至SEQ ID No.46中的任意一条的CDR序列相比，相差不多于三个氨基酸。本发明专利技术的抗CLDN抗体，与细胞系及肿瘤组织细胞结合的能力较IMAB362强，并且抗肿瘤效果较IMAB362强。

【技术实现步骤摘要】
抗CLDN抗体及其药物组合物和检测方法
本专利技术涉及一种抗CLDN抗体，本专利技术还涉及一种包含抗CLDN抗体的药物组合物，本专利技术还涉及检测生物样品中是否存在CLDN的方法。
技术介绍
紧密连接(tightjunction,TJ)在细胞间物质流转中起到关键作用，还通过阻断膜蛋白和膜脂径向扩散维持细胞极性，此外还参与招募调控细胞增殖、分化和运动的信号分子。紧密连接由紧密连接蛋白(Claudin,CLDN)形成，而紧密连接蛋白家族由超过20种蛋白分子组成，其成员均含有一个四次跨膜的结构域和相似的氨基酸序列，但组织分布具有一定特异性。人类CLDN基因以成对形式分布在不同染色体上，这暗示了某些CLDN基因来源于基因复制。CLDN蛋白分子量大多处于20-34kDa范围内，最大区别是胞内C-端的序列和大小，该段序列包含1个PDZ结构域结合基序，该基序使得CLDN蛋白能够直接和胞质内的紧密连接相关蛋白，如ZO-1、ZO-2、ZO-3以及MUPP1相互作用。此外，这段序列种含有磷酸化位点等转录后修饰位点，能够影响蛋白分子的定位和功能。MAPK(mitogen-activatedproteinkinase)或者PKC(proteinkinaseC)能够磷酸化CLDN1，cAMP(cyclicAMP)诱导CLDN5磷酸化，都能促进CLDN蛋白的屏障功能，而PKA介导的CLDN16磷酸化则能增强镁离子运输。CLDN在调控细胞旁路的选择性渗透中起到关键作用，CLDN2和CLDN15参与形成阳离子通道和阳离子孔隙，CLDN4/7/10则参与构成阴离子通道和孔隙。在某些细胞系中claudin蛋白高表达，从而影响跨膜电阻和渗透性。在培养的表皮来源细胞中，CLDN1/4/5/7能够提高跨膜电阻，而CLDN2和CLDN10反之。CLDN基因突变被认为与多种疾病有关。CLDN1突变可能会导致硬化性胆管炎(sclerosingcholangitis)和鱼鳞癣(ichthyosis)，CLDN16和CLDN19突变则被认为与低镁症(hypomagnesemia)和高钙尿症(hypercalcinuria)有关。CLDN蛋白的差异性表达被认为与多种癌症相关联。CLDN1和CLDN7在侵入性乳腺癌、前列腺癌和食管癌中发生下调，而在宫颈癌、结肠癌、食管癌、胃癌等多种癌症中发现CLDN3/4发生不同程度上调。Sahin等发现在正常组织中，CLDN18的isoform2亚型(CLDN18.2)只在胃黏膜的分化后表皮细胞中表达，在胃干细胞区域则未见表达，但在原发性胃癌及其转移灶中均发现异常高表达。在胰腺癌、食管癌和肺癌中也有CLDN18.2高表达的报道。由于CLDN18.2定位于细胞膜表面，其生物学功能和特征决定了它是一种理想的治疗靶点，而近年来针对该靶点也有单抗面世，其中发展最快的是Ganymed公司的IMAB362(Claudiximab)。IMAB362在肿瘤细胞表面结合CLDN18.2，诱导抗体依赖的细胞毒性作用(antibody-dependentcytotoxicity，ADCC)和补体依赖的细胞毒性作用(complementdependentcytotoxicity，CDC)从而杀伤肿瘤细胞。而与化疗结合使用时，IMAB362还能增强T细胞浸润及上调促炎症因子。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种抗CLDN抗体及其药物组合物和检测方法。本专利技术采用了如下技术方案：一种抗CLDN抗体，其特征在于，包括重链和轻链：其中，抗体的重链包含一种或一种以上的CDR，重链的CDR与SEQIDNo.1至SEQIDNo.7中或者SEQIDNo.15至SEQIDNo.30中的任意一条的CDR序列相比，相差不多于三个氨基酸，抗体的轻链包含一种或一种以上的CDR，轻链的CDR与SEQIDNo.8至SEQIDNo.14中或者SEQIDNo.31至SEQIDNo.46中的任意一条的CDR序列相比，相差不多于三个氨基酸。进一步，本专利技术的抗CLDN抗体，还具有这样的特征：抗体的重链选自SEQIDNo.1至No.7中的任意一条。进一步，本专利技术的抗CLDN抗体，还具有这样的特征：抗体的轻链选自如SEQIDNo.8至SEQIDNo.14中或者SEQIDNo.31至SEQIDNo.46中的任意一条。进一步，本专利技术的抗CLDN抗体，还具有这样的特征：抗体的重链选自SEQIDNo.15至SEQIDNo.30中的任意一条。进一步，本专利技术的抗CLDN抗体，还具有这样的特征：抗体的轻链选自SEQIDNo.31至SEQIDNo.46中的任意一条。进一步，本专利技术的抗CLDN抗体，还具有这样的特征：其中，抗体的重链和轻链的组合有：SEQIDNo.1和SEQIDN0.8，SEQIDNo.2和SEQIDN0.9，SEQIDNo.3和SEQIDNo.10，SEQIDNo.4和SEQIDNo.11，SEQIDNo.5和SEQIDNo.12，SEQIDNo.6和SEQIDNo.13，SEQIDNo.7和SEQIDNo.14，SEQIDNo.15和SEQIDNo.31，SEQIDNo.16和SEQIDNo.32，SEQIDNo.17和SEQIDNo.33，SEQIDNo.18和SEQIDNo.34，SEQIDNo.19和SEQIDNo.35，SEQIDNo.20和SEQIDNo.36，SEQIDNo.21和SEQIDNo.37，SEQIDNo.22和SEQIDNo.38，SEQIDNo.23和SEQIDNo.39，SEQIDNo.24和SEQIDNo.40，SEQIDNo.25和SEQIDNo.41，SEQIDNo.26和SEQIDNo.42，SEQIDNo.27和SEQIDNo.43，SEQIDNo.28和SEQIDNo.44，SEQIDNo.29和SEQIDNo.45，SEQIDNo.30和SEQIDNo.46。本专利技术还提供一种编码如上所述的抗体的多核苷酸。本专利技术还提供一种包含上述任意一项所述的抗体的药物组合物。本专利技术还提供上述任意一项所述的抗体，在制备抗肿瘤药物中的应用。本专利技术还提供一种检测生物样品中是否存在CLDN的方法，其特征在于，包括：给予生物样品如上述任意一项所述的抗体的步骤，其中所述抗体具有可检测标志物，以及检测是否存在所述可检测标志物，或者检测所述可检测标志物含量的步骤。专利技术的有益效果本专利技术的抗CLDN抗体，与细胞结合的能力较IMAB362强。并且本专利技术的抗体比IMAB362在体内动物药效中表现出更好的抑制肿瘤生长的效果。附图说明图1a是对照抗体QP024025对CHOS细胞的结合能力图1b是杂交瘤筛选出的抗体QP188189对CHOS细胞的结合能力图1c是杂交瘤筛选出的抗体QP190191对CHOS细胞的结合能力图1d是杂交瘤筛选出的抗体QP192193对C本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗CLDN抗体，其特征在于，包括重链和轻链：/n其中，所述抗体的重链包含一种或一种以上的CDR，重链的CDR与SEQ ID No.1至SEQ IDNo.7中或者SEQ ID No.15至SEQ ID No.30中的任意一条的CDR序列相比，相差不多于三个氨基酸，/n所述抗体的轻链包含一种或一种以上的CDR，轻链的CDR与SEQ ID No.8至SEQ IDNo.14中或者SEQ ID No.31至SEQ ID No.46中的任意一条的CDR序列相比，相差不多于三个氨基酸。/n

【技术特征摘要】
1.一种抗CLDN抗体，其特征在于，包括重链和轻链：
其中，所述抗体的重链包含一种或一种以上的CDR，重链的CDR与SEQIDNo.1至SEQIDNo.7中或者SEQIDNo.15至SEQIDNo.30中的任意一条的CDR序列相比，相差不多于三个氨基酸，
所述抗体的轻链包含一种或一种以上的CDR，轻链的CDR与SEQIDNo.8至SEQIDNo.14中或者SEQIDNo.31至SEQIDNo.46中的任意一条的CDR序列相比，相差不多于三个氨基酸。


2.如权利要求1所述的抗CLDN抗体，其特征在于：
抗体的重链选自SEQIDNo.1至No.7中的任意一条。


3.如权利要求2所述的抗CLDN抗体，其特征在于：
抗体的轻链选自如SEQIDNo.8至SEQIDNo.14中或者SEQIDNo.31至SEQIDNo.46中的任意一条。


4.如权利要求1所述的抗CLDN抗体，其特征在于：
抗体的重链选自SEQIDNo.15至SEQIDNo.30中的任意一条。


5.如权利要求4所述的抗CLDN抗体，其特征在于：
抗体的轻链选自SEQIDNo.31至SEQIDNo.46中的任意一条。


6.如权利要求1所述的抗CLDN抗体，其特征在于：
其中，抗体的重链和轻链的组合有：
SEQIDNo.1和SEQIDN0.8，
SEQIDNo.2和SEQIDN0.9，
SEQIDNo.3和SEQIDNo.10，
SEQIDNo.4和SEQIDNo.11，
SEQIDNo.5和SEQIDNo.12...

【专利技术属性】
技术研发人员：屈向东，潘琴，金后聪，都业杰，郑翰，
申请(专利权)人：启愈生物技术上海有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31