抗TMPRSS2抗体和抗原结合片段制造技术

本发明专利技术包括与TMPRSS2特异性结合的抗体或其抗原结合片段和使用这类抗体和片段治疗或预防病毒性感染(例如，流感病毒感染)的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗TMPRSS2抗体和抗原结合片段本申请要求2018年1月26日提交的美国临时专利申请号62/622,292的权益，所述文献通过引用的方式完整并入本文。
本专利技术涉及与TMPRSS2特异性结合的抗体和抗原结合片段和用所述抗体和片段治疗或预防病毒性感染的方法。专利技术背景流感病毒已经对目前使用的靶向病毒神经氨酸酶(NA)或离子通道蛋白-基质蛋白2(M2)的药物获得性耐药。耐药的出现凸显形成新抗病毒策略的必要。宿主细胞打靶可以减少或避免逃逸突变体的出现，但可能因广泛表达而产生“陷阱”并带来对毒性的顾虑。已经显示多种呼吸道病毒融合蛋白需要受宿主蛋白酶剪切以激活(Shirato等人,ClinicalIsolatesofHumanCoronavirus229EBypasstheEndosomeforCellEntry，JournalofVirology，91,e01387–16(2017)；Reinke等人,DifferentresiduesintheSARS-CoVspikeproteindeterminecleavageandactivationbythehostcellproteaseTMPRSS2，PLoSONE.12,e0179177(2017)；Zhou等人,Proteaseinhibitorstargetingcoronavirusandfilovirusentry，AntiviralResearch，116,76–84(2015)；Zmora等人,TMPRSS2Isoform1ActivatesRespiratoryVirusesandIsExpressedinViralTargetCells，PLoSONE.10,e0138380(2015))，包括流感(Zmor等人,Non-humanprimateorthologuesofTMPRSS2cleaveandactivatetheinfluenzavirushemagglutinin，PLoSONE.12,e0176597(2017)；等人,Inhibitionofinfluenzavirusinfectioninhumanairwaycellculturesbyanantisensepeptide-conjugatedmorpholinooligomertargetingthehemagglutinin-activatingproteaseTMPRSS2，JournalofVirology，85,1554–1562(2011)；Bertram等人,TMPRSS2andTMPRSS4facilitatetrypsin-independentspreadofinfluenzavirusinCaco-2cells，JournalofVirology，84,10016–10025(2010)；Tarnow等人,TMPRSS2isahostfactorthatisessentialforpneumotropismandpathogenicityofH7N9influenzaAvirusinmice，JournalofVirology，(2014),May；88(9):4744-51)。为了激活，甲型流感血凝素前体(HA0)需要借助宿主丝氨酸蛋白酶剪切成HA1和HA2。例如，跨膜丝氨酸蛋白酶2；TMPRSS2、TMPRSS4和TMPRSS11D以及人气道胰蛋白酶样蛋白酶(HAT)已经涉及HA剪切(Bertram等人,TMPRSS2andTMPRSS4facilitatetrypsin-independentspreadofinfluenzavirusinCaco-2cells，JournalofVirology，84,10016–10025(2010)；Bottcher等人,ProteolyticActivationofInfluenzaVirusesbySerineProteasesTMPRSS2andHATfromHumanAirwayEpithelium，JournalofVirology，2006Oct；80(19):9896-8；国际专利申请公开号WO2017/151453)。另外，TMPRSS2是抗癌疗法的靶。参见，例如，WO2008127347和WO2002004953。TMPRSS2和ERG之间的融合(TMPRSS2:ERG)是已知主要驱动受ERα触发并被ERβ阻遏的前列腺癌发生的基因融合。Bonkhoff,Estrogenreceptorsignalinginprostatecancer:Implicationsforcarcinogenesisandtumorprogression，Prostate78(1):2-10(2018)。专利技术简述尽管存在TMPRSS2的小分子抑制剂和例如可用于免疫组织化学的研究抗体，但本领域需要用于治疗或预防病毒性感染的中和性治疗用抗TMPRSS2抗体及其用途。参见，例如，Shen等人,Biochimie142:1-10(2017)、WO2008127347；WO2002004953；US9498529；从Abcam(Cambridge,MA)可获得的抗体ab92323或从SantaCruzBiotech(Dallas,TX)可获得的抗体c-515727和c-101847。通过提供人抗人TMPRSS2抗体，如H1H7017N及其组合(例如，包括，抗流感HA抗体(例如，第I群HA或第II群HA))和使用其治理病毒性感染的方法，本专利技术部分地满足这种需求。本专利技术提供与人TMPRSS2特异性结合的中和性人抗原结合蛋白，例如，抗体或其抗原结合片段。例如，在本专利技术的一个实施方案中，抗原结合蛋白包含：(a)包含在SEQIDNO:2、17或19中所述的氨基酸序列的免疫球蛋白重链的CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3；和/或(b)包含在SEQIDNO:4或18中所述的氨基酸序列的免疫球蛋白轻链的CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3。在本专利技术的一个实施方案中，抗原结合蛋白包含：(a)轻链免疫球蛋白可变区，其包含与SEQIDNO:4或18中所述的氨基酸序列具有至少90％氨基酸序列同一性的氨基酸序列；和/或(b)重链免疫球蛋白可变区，其包含与SEQIDNO:2、17或19中所述的氨基酸序列具有至少90％氨基酸序列同一性的氨基酸序列。在本专利技术的一个实施方案中，本专利技术提供抗原结合蛋白，其包含：(a)轻链免疫球蛋白的CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，所述轻链免疫球蛋白包含在SEQIDNO:4或18中所述并且与SEQIDNO:4或18中所述的氨基酸序列有至少90％氨基酸序列同一性的氨基酸序列；和/或(b)重链免疫球蛋白的CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3，所述重链免疫球蛋白包含在SEQIDNO:2、17或19中所述并且与SEQIDNO:2、17或19中所述的氨基酸序列有至少90％氨基酸序列同一性的氨基酸序列。例如，在本专利技术的一个实施方案中，抗原结合蛋白包含轻链免疫球蛋白可变区，所述轻链免疫球蛋白可变区包含了本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种人抗原结合蛋白，与人TMPRSS2特异性结合。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180126 US 62/622,2921.一种人抗原结合蛋白，与人TMPRSS2特异性结合。


2.根据权利要求1所述的抗原结合蛋白，其是抗体或其抗原结合片段。


3.根据权利要求1-2中任一项所述的抗原结合蛋白，包含：
(a)免疫球蛋白重链可变区，其免疫球蛋白重链的CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3，所述免疫球蛋白重链包含在SEQIDNO:2、17或19中所述的氨基酸序列；和/或
(b)免疫球蛋白轻链可变区，其包含免疫球蛋白轻链的CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，所述免疫球蛋白轻链包含在SEQIDNO:4或18中所述的氨基酸序列。


4.根据权利要求1-3中任一项所述的抗原结合蛋白，包含：
(a)重链免疫球蛋白可变区，其包含与SEQIDNO:2、17或19中所述的氨基酸序列具有至少90％氨基酸序列同一性的氨基酸序列；和/或
(b)轻链免疫球蛋白可变区，其包含与SEQIDNO:4或18中所述的氨基酸序列具有至少90％氨基酸序列同一性的氨基酸序列。


5.根据权利要求1-4中任一项所述的抗原结合蛋白，包含：
(a)包含重链免疫球蛋白的CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3的免疫球蛋白重链可变区，所述重链免疫球蛋白包含在SEQIDNO:2、17或19中所述氨基酸序列以及与SEQIDNO:2、17或19中所述氨基酸序列有至少90％氨基酸序列同一性的氨基酸序列；和/或
(b)包含轻链免疫球蛋白的CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3的免疫球蛋白轻链可变区，所述轻链免疫球蛋白包含在SEQIDNO:4或18中所述氨基酸序列以及与SEQIDNO:4或18中所述氨基酸序列有至少90％氨基酸序列同一性的氨基酸序列。


6.根据权利要求1-5中任一项所述的抗原结合蛋白，包含：
重链免疫球蛋白可变区，其包含
(a)包含氨基酸序列：QSISSW(SEQIDNO：12)的CDR-L1，和/或
(b)包含氨基酸序列：KAS(SEQIDNO：14)的CDR-L2，和/或
(c)包含氨基酸序列：QQYNSYSYT(SEQIDNO：16)的CDR-L3；和/或
轻链免疫球蛋白可变区，其包含
(a)包含氨基酸序列：GFTFSSYG(SEQIDNO：6)的CDR-H1；
(b)包含氨基酸序列：IWNDGSYV(SEQIDNO：8)的CDR-H2；
(c)包含氨基酸序列：AREGEWVLYYFDY(SEQIDNO：10)的CDR-H3。


7.根据权利要求1-6中任一项所述的抗原结合蛋白，包含：
(a)包含在SEQIDNO：17或19中所述的氨基酸序列的重链免疫球蛋白，或包含在SEQIDNO：2中所述的氨基酸序列的免疫球蛋白重链可变区；和/或
(b)包含在SEQIDNO：18中所述的氨基酸序列的轻链免疫球蛋白，或包含在SEQIDNO：4中所述的氨基酸序列的免疫球蛋白轻链可变区。


8.抗原结合蛋白，其与根据权利要求1-7中任一项所述的抗原结合蛋白竞争结合于TMPRSS2和/或结合于TMPRSS2上的相同或重叠表位。


9.根据权利要求1-8中任一项所述的抗原结合蛋白，其是多特异性的。


10.根据权利要求1-9中任一项所述的抗原结合蛋白，其包含以下一个或多个特性：
·抑制流感病毒在表达TMPRSS2的细胞中生长；
·与表达TMPRSS的细胞的表面结合；
·不显著与不表达TMPRSS2的MDCK/Tet-on细胞结合；
·在约25℃以约2.81X10-9M的KD与人TMPRSS2结合；
·在约37℃以约9.31X10-9M的KD与人TMPRSS2结合；
·在约25℃以约5.60X10-8M的KD与食蟹猴TMPRSS2结合；
·在约37℃以约1.40X10-7M的KD与食蟹猴TMPRSS2结合；
·在体外限制细胞的流感病毒感染扩散；和/或
·保护经工程化以表达人TMPRSS2蛋白的小鼠免于流感病毒感染所致的死亡。


11.复合物，包含与TMPRSS2多肽结合的根据权利要求1-10中任一项所述的抗原结合蛋白。


12.产生根据权利要求1-10中任一项所述的抗原结合蛋白或其免疫球蛋白链的方法，包括：
(a)引入一种或多种编码所述抗原结合蛋白的免疫球蛋白链的多核苷酸；
(b)在有利于表达多核苷酸的条件下培养宿主细胞；并且
(c)任选地，从宿主细胞和/或其中培育宿主细胞的培养基分离抗原结合蛋白或免疫球蛋白链。


13.根据权利要求12所述的方法，其中宿主细胞是中国仓鼠卵巢细胞。


14.抗原结合蛋白或免疫球蛋白链，其是根据权利要求12-13中任一项所述的方法的产物。


15.多肽，包含
(a)包含在SEQIDNO:2中所述氨基酸序列的免疫球蛋白链的VH结构域的CDR1、CDR2和CDR3；或。
(b)包含在SEQIDNO:4中所述氨基酸序列的免疫球蛋白链的VL结构域的CDR1、CDR2和CDR3。


16.编码根据权利要求15所述的多肽的多核苷酸。


17.载体，包含根据权利要求16所述的多核苷酸。


18.宿主细胞，包含根据权利要求1-10和14-17中任一项所述的抗原结合蛋白或免疫球蛋白链或多肽或多核苷酸或载体。


19.组合物或套件，包含与其他治疗剂联合的根据权利要求1-10和14中任一项所述的抗原结合蛋白。


20.药物组合物，包含根据权利要求1-10和14中任一项所述的抗原结合蛋白和可药用载体以及任选地其他治疗剂。


21.根据权利要求19-20中任一项所述的组合物或套件，其与作为抗病毒药物或疫苗的其他治疗剂联合。


22.根据权利要求19-20中任一项所述的组合物或套件，其中其他治疗剂是选自以下的成员：雷迪帕韦、索非布韦、雷迪帕韦和索非布韦组合、奥司他韦、扎那米韦、利巴韦林和干扰素-α2b、干扰素-α2a、抗癌药和与流感HA特异性结合的抗体或其抗原结合片段；和/或
选自以下的抗体或其抗原结合片段：
H1H14611N2；H1H14612N2；H1H11723P；H1H11729P；H1H11820N；H1H11829N；
H1H11829N2；H2aM11829N；H2M11830N；H1H11830N2；H1H11903N；H1H14571N；
H2a14571N；H1H11704P；H1H11711P；H1H11714P；H1H11717P；H1H11724P；
H1H11727P；H1H11730P2；H1H11731P2；H1H11734P2；H1H11736P2；H1H11742P2；
H1H11744P2；H1H11745P2；H1H11747P2；H1H11748P2；H1H17952B；H1H17953B；
H1H17954B；H1H17955B；H1H17956B；H1H17957B；H1H17958B；H1H17959B；
H1H17960B；H1H17961B；H1H17962B；H1H17963B；H1H17964B；H1H17965B；
H1H17966B；H1H17967B；H1H17968B；H1H17969B；H1H17970B；H1H17971B；
H1H17972B；H1H17973B；H1H17974B；H1H17975B；H1H17976B；H1H17977B；
H1H17978B；H1H17979B；H1H17980B；H1H17981B；H1H17982B；H1H17983B；
H1H17984B；H1H17985B；H1H17986B；H1H17987B；H1H17988B；H1H17989B；
H1H17990B；H1H17991B；H1H17992B；H1H17993B；H1H17994B；H1H17995B；
H1H17996B；H1H17997B；H1H17998B；H1H17999B；H1H18000B；H1H18001B；
H1H18002B；H1H18003B；H1H18004B；H1H18005B；H1H18006B；H1H18007B；
H1H18008B；H1H18009B；H1H18010B；H1H18011B；H1H18012B；H1H18013B；
H1H18014B；H1H18015B；H1H18016B；H1H18017B；H1H18018B；H1H18019B；
H1H18020B；H1H18021B；H1H18022B；H1H18023B；H1H18024B；H1H18025B；
H1H18026B；H1H18027B；H1H18028B；H1H18029B；H1H18030B；H1H18031B；
H1H18032B；H1H18033B；H1H18034B；H1H18035B；H1H18037B；H1H18038B；
H1H18039B；H1H18040B；H1H18041B；H1H18042B；H1H18043B；H1H18044B；
H1H18045B；H1H18046B；H1H18047B；H1H18048B；H1H18049B；H1H18051B；
H1H18052B；H1H18053B；H1H18054B；H1H18055B；H1H18056B；H1H18057B；
H1H18058B；H1H18059B：H1H18060B；H1H18061B；H1H18062B；H1H18063B；
H1H18064B；H1H18065B；H1H18066B：H1H18067B：H1H18068B；H1H18069B；
H1H18070B：H1H18071B：H1H18072B：H1H18073B；H1H18074B；H1H18075B；
H1H18076B；H1H18077B；H1H18078B；H1H18079B；H1H18080B；H1H18081B；
H1H18082B；H1H18083B；H1H18084B；H1H18085B；H1H18086B；H1H18087B；
H1H18088B；H1H18089B；H1H18090B；H1H18091B；H1H18092B；H1H18093B；
H1H18094B；H1H18095B；H1H18096B；H1H18097B；H1H18098B；H1H18099B；
H1H18100B；H1H18101B；H1H18102B；H1H18103B；H1H18104B；H1H18105B；
H1H18107B；H1H18108B；H1H18109B；H1H18110B；H1H18111B；H1H18112B；
H1H18113B；H1H18114B；H1H18115B；H1H18116B；H1H18117B；H1H18118B；
H1H18119B；H1H18120B；H1H18121B；H1H18122B；H1H18123B；H1H18124B；
H1H18125B；H1H18126B；H1H18127B：H1H18128B：H1H18129B：H1H18130B：
H1H18131B：H1H18132B：H1H18133B：H1H18134B：H1H18135B：H1H18136B：
H1H18137B：H1H18138B：H1H18139B：H1H18140B：H1H18141B：H1H18142B：
H1H18143B：H1H18144B：H1H18145B：H1H18146B：H1H18147B：H1H18148B：
H1H18149B：H1H18150B：H1H18151B：H1H18152B：H1H18153B：H1H18154B：
H1H18155B：H1H18156B：H1H18157B：H1H18158B：H1H18159B：H1H18160B：
H1H18161B：H1H18162B；H1H18163B；H1H18164B；H1H18165B：H1H18166B：
H1H18167B：H1H18168B：H1H18169B：H1H18170B：H1H18171B：H1H18172B：
H1H18173B：H1H18174B：H1H18175B；H1H18176B：H1H18177B：H1H18178B；
H1H18179B：H1H18180B：H1H18181B：H1H18182B：H1H18183B：H1H18184B；
H1H18185B；H1H18186B；H1H18187B；H1H18188B；H1H18189B；H1H18190B：
H1H18191B：H1H18192B：H1H18193B：H1H18194B：H1H18195B：H1H18196B：
H1H18197B；H1H18198B：H1H18199B；H1H18200B；H1H18201B；H1H18202B；
H1H18203B；H1H18204B：H1H18205B；H1H18206B：H1H18207B；H1H18208B：
H1H18209B；H1H18210B：H1H18211B：H1H18212B；H1H18213B；H1H18214B；
H1H18216B；H1H18217B；H1H18218B；H1H18219B；H1H18220B；H1H18221B；
H1H18222B；H1H18223B；H1H18224B；H1H18225B；H1H18226B；H1H18227B；
H1H18228B；H1H18229B；H1H18230B：H1H18231B：H1H18232B：H1H18233B：
H1H18234B；H1H18235B：H1H18236B；...

【专利技术属性】
技术研发人员：L·珀塞尔，
申请(专利权)人：瑞泽恩制药公司，
类型：发明
国别省市：美国;US