抗TREM-1抗体及其用途制造技术

本文提供特异性结合并抑制TREM‑1信号传导的抗体或其抗原结合部分，其中所述抗体不结合一种或多种FcR并且不诱导髓样细胞产生炎性细胞因子。还提供了此类抗体或其抗原结合部分在治疗应用中的用途，例如自身免疫性疾病的治疗。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗TREM-1抗体及其用途通过EFS-WEB电子提交的序列表的引用随本申请一起提交的以ASCII文本文件(名称：3338_092PC01_SeqListing.txt；大小：106,162字节；创建日期：2019年3月27日)以电子方式提交的序列表的内容通过引用以其整体并入本文。专利技术背景TREM-1是在单核细胞、巨噬细胞和中性粒细胞上表达的活化受体。这些细胞通过释放驱动炎症的细胞因子和其他介质在慢性炎性疾病中发挥主要作用。患有风湿性关节炎(RA)和炎性肠病(IBD)的患者的TREM-1mRNA和蛋白质表达上调，并且TREM-1阳性细胞积聚在炎症部位，与疾病的严重程度相关。参见Bouchon等人,Nature410:1103-1107(2001)；Schenk等人,ClinInvest117:3097-3106(2007)；以及Kuai等人,Rheumatology48:1352-1358(2009)。主要由活化的中性粒细胞表达的肽聚糖识别蛋白1(PGLYRP1)是TREM-1的配体，并在结合后介导TREM-1信号传导。在体外，TREM-1的啮合触发促炎细胞因子的分泌，该促炎细胞因子包括TNF、IL-8和单核细胞趋化蛋白-1。另外，TREM-1信号传导与多个Toll样受体(TLR)协同作用，以进一步增强促炎信号。反过来，这会上调TREM-1的表达，导致加剧炎症的恶性循环。参见Bouchon等人，JImmunol164：4991-4995(2000)。越来越多的证据表明，TLR有助于诸如RA和IBD之类的慢性炎症疾病的发展和进展。抑制人类和食蟹猴TREM-1功能的人源化抗TREM-1mAb已经在别处公开。参见WO2013/120553A1和WO2016/009086A1。然而，此类抗体具有能够阻碍制造过程的粘度特征，或具有可限制其治疗潜力的其他问题(例如，细胞因子风暴和ADCC)。参见Shire等人，J.Pharm.Sci.93:1390-1402(2004)；和Warncke等人，JImmunol.188:4405-11(2012)。因此，需要能够与TREM-1特异性结合并抑制其功能但不存在较早的抗TREM-1抗体问题的抗TREM-1抗体。
技术实现思路
本文提供了分离的抗体，例如单克隆抗体，特别是人(例如单克隆)抗体，其特异性结合在髓样细胞上表达的触发受体-1(TREM-1)并具有所需的功能特性。在一些实施方案中，该抗体包含重链可变区(VH)、轻链可变区(VL)和IgG1重链恒定区，其中与野生型IgG1重链恒定区(SEQIDNO:9)相比，该IgG1重链恒定区包含一个或多个氨基酸取代。在一些实施方案中，该抗体与mAb0318交叉竞争性结合阻断性TREM-1，并包含重链可变区(VH)、轻链可变区(VL)和IgG1重链恒定区，其中与野生型IgG1重链恒定区(SEQIDNO:9)相比，该IgG1重链恒定区包含一个或多个氨基酸取代。在一些实施方案中，该抗体结合与mAb0318相同的TREM-1表位。在一些实施方案中，抗体特异性结合TREM-1表位，该TREM-1表位包含一个或多个选自SEQIDNO:1的D38、V39、K40、C41、D42、Y43、T44、L45、E46、K47、F48、A49、S50、S51、Q52、K53、A54、W55、Q56、Y90、H91、D92、H93、G94、L95和L96的氨基酸残基。在一些实施方案中，该抗体特异性结合TREM-1表位，该TREM-1表位包含SEQIDNO:1的氨基酸D38至L45、E46至Q56和/或Y90至L96。在一些实施方案中，本文公开的抗体的IgG1重链恒定区包含一个或多个选自K214R、L234A、L235E、G237A、D356E和L358M的氨基酸取代，根据EU编号。在一些实施方案中，IgG1重链恒定区包含一个或多个选自K214R、L234A、L235E、G237A、A330S、P331S、D356E和L358M的氨基酸取代，根据EU编号。在一些实施方案中，IgG1重链恒定区包含一个或多个选自K214R、C226S、C229S和P238S的氨基酸取代，根据EU编号。在一些实施方案中，IgG1重链恒定区包含一个或多个选自S131C、K133R、G137E、G138S、Q196K、I199T、N203D、K214R、C226S、C229S和P238S的氨基酸取代，根据EU编号。在一些实施方案中，本文公开的抗体包含重链CDR1、CDR2和CDR3以及轻链CDR1、CDR2和CDR3，其中重链CDR3包含DMGIRRQFAY(SEQIDNO:26)或除了一个或两个取代之外的DMGIRRQFAY(SEQIDNO:26)。在一些实施方案中，重链CDR3包含DQGIRRQFAY(SEQIDNO:72)。在一些实施方案中，本文公开的抗体包含重链CDR1、CDR2和CDR3以及轻链CDR1、CDR2和CDR3，其中重链CDR2包含RIRTKSSNYATYYAASVKG(SEQIDNO:25)或除了一个或两个取代之外的RIRTKSSNYATYYAASVKG(SEQIDNO:25)。在一些实施方案中，本文公开的抗体包含重链CDR1、CDR2和CDR3以及轻链CDR1、CDR2和CDR3，其中重链CDR1包含TYAMH(SEQIDNO:24)或除了一个或两个取代之外的TYAMH(SEQIDNO:24)。在一些实施方案中，本文公开的抗体包含重链CDR1、CDR2和CDR3以及轻链CDR1、CDR2和CDR3，其中轻链CDR1包含RASQSVDTFDYSFLH(SEQIDNO:27)或除了一个或两个取代之外的RASQSVDTFDYSFLH(SEQIDNO:27)。在一些实施方案中，轻链CDR2包含RASNLES(SEQIDNO:28)或除了一个或两个取代之外的RASNLES(SEQIDNO:28)。在一些实施方案中，轻链CDR3包含QQSNQDPYT(SEQIDNO:29)或除了一个或两个取代之外的QQSNQDPYT(SEQIDNO:29)。在一些实施方案中，本文公开的抗体的VH包含与SEQIDNO:14所示的氨基酸序列具有至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，本文公开的抗体的VL包含与SEQIDNO:15所示的氨基酸序列具有至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述VH和VL分别包含SEQIDNO:14和15。在一些实施方案中，本公开的抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含SEQIDNO:50、SEQIDNO:51、SEQIDNO:52或SEQIDNO:53。在一些实施方案中，所述轻链包含SEQIDNO:54。本文提供了一种与TREM-1特异性结合的分离的抗体，其包含重链CDR1、CDR本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分离的抗体，其与髓样细胞-1(TREM-1)上表达的触发受体特异性结合，其包含重链可变区(VH)、轻链可变区(VL)和IgG1重链恒定区，其中与野生型IgG1重链恒定区(SEQID NO:9)相比，所述IgG1重链恒定区包含一个或多个氨基酸取代。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180402 US 62/651,6051.一种分离的抗体，其与髓样细胞-1(TREM-1)上表达的触发受体特异性结合，其包含重链可变区(VH)、轻链可变区(VL)和IgG1重链恒定区，其中与野生型IgG1重链恒定区(SEQIDNO:9)相比，所述IgG1重链恒定区包含一个或多个氨基酸取代。


2.一种分离的抗体，其与mAb0318交叉竞争性结合阻断性TREM-1，其包含重链可变区(VH)、轻链可变区(VL)和IgG1重链恒定区，其中与野生型IgG1重链恒定区(SEQIDNO:9)相比，所述IgG1重链恒定区包含一个或多个氨基酸取代。


3.根据权利要求1或2所述的抗体，其中所述抗体结合与mAb0318相同的TREM-1表位。


4.根据权利要求1或2所述的抗体，其中所述抗体与TREM-1表位特异性结合，所述TREM-1表位包含一个或多个选自SEQIDNO:1的D38、V39、K40、C41、D42、Y43、T44、L45、E46、K47、F48、A49、S50、S51、Q52、K53、A54、W55、Q56、Y90、H91、D92、H93、G94、L95和L96的氨基酸残基。


5.根据权利要求1或2所述的抗体，其中所述抗体特异性结合包含SEQIDNO:1的氨基酸D38至L45、E46至Q56和/或Y90至L96的TREM-1表位。


6.根据权利要求1至5中任一项所述的抗体，其中所述IgG1重链恒定区包含一个或多个选自K214R、L234A、L235E、G237A、D356E和L358M的氨基酸取代，按照EU编号。


7.根据权利要求1-5中任一项所述的抗体，其中所述IgG1重链恒定区包含一个或多个选自K214R、L234A、L235E、G237A、A330S、P331S、D356E和L358M的氨基酸取代，按照EU编号。


8.根据权利要求1-5中任一项所述的抗体，其中所述IgG1重链恒定区包含一个或多个选自K214R、C226S、C229S和P238S的氨基酸取代，按照EU编号。


9.根据权利要求1-5中任一项所述的分离的抗体，其中所述IgG1重链恒定区包含一个或多个选自S131C、K133R、G137E、G138S、Q196K、I199T、N203D、K214R、C226S、C229S和P238S的氨基酸取代，按照EU编号。


10.根据权利要求1至9中任一项所述的抗体，其包含重链CDR1、CDR2和CDR3以及轻链CDR1、CDR2和CDR3，其中所述重链CDR3包含DMGIRRQFAY(SEQIDNO:26)或除了一个或两个取代外的DMGIRRQFAY(SEQIDNO:26)。


11.根据权利要求10所述的抗体，其中所述重链CDR3包含DQGIRRQFAY(SEQIDNO:72)。


12.根据权利要求1至11中任一项所述的抗体，其包含重链CDR1、CDR2和CDR3以及轻链CDR1、CDR2和CDR3，其中所述重链CDR2包含RIRTKSSNYATYYAASVKG(SEQIDNO:25)或除了一个或两个取代外的RIRTKSSNYATYYAASVKG(SEQIDNO:25)。


13.根据权利要求1至12中任一项所述的抗体，其包含重链CDR1、CDR2和CDR3以及轻链CDR1、CDR2和CDR3，其中所述重链CDR1包含TYAMH(SEQIDNO:24)或除了一个或两个取代外的TYAMH(SEQIDNO:24)。


14.根据权利要求1至13中任一项所述的抗体，其包含重链CDR1、CDR2和CDR3以及轻链CDR1、CDR2和CDR3，其中所述轻链CDR1包含RASQSVDTFDYSFLH(SEQIDNO:27)或除了一个或两个取代外的RASQSVDTFDYSFLH(SEQIDNO:27)。


15.根据权利要求1至14中任一项所述的抗体，其包含重链CDR1、CDR2和CDR3以及轻链CDR1、CDR2和CDR3，其中所述轻链CDR2包含RASNLES(SEQIDNO:28)或除了一个或两个取代外的RASNLES(SEQIDNO:28)。


16.根据权利要求1至15中任一项所述的抗体，其包含重链CDR1、CDR2和CDR3以及轻链CDR1、CDR2和CDR3，其中所述轻链CDR3包含QQSNQDPYT(SEQIDNO:29)或除了一个或两个取代外的QQSNQDPYT(SEQIDNO:29)。


17.根据权利要求1至16中任一项所述的抗体，其中所述VH包含与如SEQIDNO:14所示的氨基酸序列至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％同一的氨基酸序列。


18.根据权利要求1至17中任一项所述的抗体，其中所述VL包含与如SEQIDNO:15所示的氨基酸至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％同一的氨基酸序列。


19.根据权利要求1至18中任一项所述的抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，其中所述VH包含SEQIDNO:14，并且所述VL包含SEQIDNO:15。


20.根据权利要求19所述的抗体，其包含重链和轻链，其中所述重链包含SEQIDNO:50、SEQIDNO:51、SEQIDNO:52或SEQIDNO:53。


21.根据权利要求20所述的抗体，其包含重链和轻链，其中所述轻链包含SEQIDNO:54。


22.一种与TREM-1特异性结合的分离的抗体，其包含重链CDR1、CDR2、CDR3；轻链CDR1、CDR2、CDR3；和IgG1重链恒定区，
其中所述重链CDR1、CDR2和CDR3分别包含TYAMH(SEQIDNO:24)、RIRTKSSNYATYYAASVKG(SEQIDNO:25)和DMGIRRQFAY(SEQIDNO:26)；
其中所述轻链CDR1、CDR2和CDR3分别包含RASQSVDTFDYSFLH(SEQIDNO:27)、RASNLES(SEQIDNO:28)和QQSNQDPYT(SEQIDNO:29)；和
其中所述IgG1重链恒定区包含一个或多个选自L234A、L235E和G237A的氨基酸取代，根据EU编号。


23.一种与TREM-1特异性结合的分离的抗体，其包含重链CDR1、CDR2、CDR3；轻链CDR1、CDR2、CDR3；和IgG1重链恒定区，
其中所述重链CDR1、CDR2和CDR3分别包含TYAMH(SEQIDNO:24)、RIRTKSSNYATYYAASVKG(SEQIDNO:25)和DMGIRRQFAY(SEQIDNO:26)；
其中所述轻链CDR1、CDR2和CDR3分别包含RASQSVDTFDYSFLH(SEQIDNO:27)、RASNLES(SEQIDNO:28)和QQSNQDPYT(SEQIDNO:29)；和
其中所述IgG1重链恒定区包含选自L234A、L235E、G237A、A330S和P331S的氨基酸取代，根据EU编号。


24.一种与TREM-1特异性结合的分离的抗体，其包含重链CDR1、CDR2、CDR3；轻链CDR1、CDR2、CDR3；和IgG1重链恒定区，
其中所述重链CDR1、CDR2和CDR3分别包含TYAMH(SEQIDNO:24)、RIRTKSSNYATYYAASVKG(SEQIDNO:25)和DMGIRRQFAY(SEQIDNO:26)；
其中所述轻链CDR1、CDR2和CDR3分别包含RASQSVDTFDYSFLH(SEQIDNO:27)、RASNLES(SEQIDNO:28)和QQSNQDPYT(SEQIDNO:29)；和
其中所述IgG1重链恒定区包含一个或多个选自K214R、C226S、C229S和P238S的氨基酸取代，根据EU编号。


25.一种与TREM-1特异性结合的分离的抗体，其包含重链CDR1、CDR2、CDR3；轻链CDR1、CDR2、CDR3；和IgG1重链恒定区，
其中所述重链CDR1、CDR2和CDR3分别包含TYAMH(SEQIDNO:24)、RIRTKSSNYATYYAASVKG(SEQIDNO:25)和DMGIRRQFAY(SEQIDNO:26)；
其中所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：A·帕希尼，M·L·戈瑟林，A·P·亚姆纽克，D·A·福尔摩斯，陈国栋，P·A·马迪亚，R·YC·黄，S·M·卡尔，
申请(专利权)人：百时美施贵宝公司，
类型：发明
国别省市：美国;US