补体3检测试剂制造技术

本发明专利技术涉及一种用于测定人体体液成份的试剂组合。目的是提供一种Ｃ↓［３］检测试剂，该测试剂应具有操作简单、测定数据准确度高、重复性好、抗干扰能力强的特点，并且适用于各种类型的全自动生化分析仪。技术方案是：补体４检测试剂，包括：ａ．一种使样品中Ｃ↓［３］抗原位点充分暴露、从而有利于与抗Ｃ↓［３］抗体试剂充分结合的Ｃ↓［３］反应剂，ｂ．一种与人血清中的Ｃ↓［３］抗原有高度特异反应性的抗Ｃ↓［３］抗体试剂，ｃ．一种用来与样品比较、进行结果计算的液体血清型恒定值校准剂，包括的成分及所占重量百分比为：防腐剂０．０１－１、稳定剂０．１－１、防霉剂０．０５－０．１和适量Ｃ↓［３］抗原，其余是２０－１００ｍｍｏｌ／Ｌ缓冲剂。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种用于测定人体体液成份的试剂组合，特别是测定人体血 清中的补体3 (C3)的检测试剂，可广泛应用在医学及生物化学
技术背景补体是存在于血清及组织液中的一组具有酶样活性的球蛋白。补体系统由20 多种血浆蛋白和血细胞受体组成，约占血清总蛋白的10%,其中G在血清中含 量最高，是在补体系统中起关键作用的成分，3条补体激活途径都要经过C3活化 才能实现。补体3 (C3)分子量为190000，主要由巨噬细胞和肝脏合成，在C3转 化酶的作用下，裂解成C3a与C3b二个片段。人体血清中C3浓度的增高，常见于 急性炎症，传染病早期，肿瘤等。人体血清中C3浓度的降低，常见于系统性红斑 狼疮活动期，冷球蛋白血症，急性肾小球肾炎，基底膜增殖性肾小球肾炎，肝脏 疾病等。已知测定补体3 (C3)的方法有免疫扩散法、免疫电泳法、放射免疫分析法、 这些方法都存在着操作繁琐，需要特殊的设备，样品需要预处理，不能进行批量 样本分析和不能直接上全自动生化分析仪检测等缺点。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服上述
技术介绍
的不足，提供一种G检测试剂，其应具 有操作简单、测定数据准确度高、重复性好、抗干扰能力强的特点，并且适用于 各种类型的全自动生化分析仪。本专利技术提供的技术方案是补体3检测试剂，包括-a、 一种使样品中C3抗原位点充分暴露、从而有利于与抗Cs抗体试剂充分结 合的C3反应剂，包括的成分及所占重量百分比为防腐剂0.01-1、稳定剂 0. 05 - 1、电解质0. 1 - 10、高分子加速剂2-8、表面活性剂0. 1 - 10和反应促 进剂0. 1 - 0. 5，其余是5 — 200翻1/L的缓冲剂；b、 一种与人血清中的C3抗原有高度特异反应性的抗C3抗体试剂，包括的成 分及所占重量百分比为抗C3抗体5-50、抗氧化剂0.001-0.5和稳定剂 0.05 - 20，还包括防腐剂0.01-1、电解质O. 1-10、高分子加速剂2-8、表面 活性剂0. 1 — 10，其余是5 — 200腿ol/L的缓冲剂；c、 一种用来与样品比较、进行结果计算的液体血清型恒定值校准剂，包括的 成分及所占重量百分比为防腐剂0.01-1、稳定剂0.1-1、防霉剂0.05-0.1 和适量C3抗原，其余是20 - 100mmol/L缓冲剂。所述的液体血清型恒定值校准剂分为五份，其中四份校准剂中加入的G抗 原含量分别是0. 20-0. 6g/L、 0. 7-1. 4g/L、 1, 5-1. 8g/L、 2. 0-3. 0 g/L，另1份C3抗原不加。所述的四份校准剂中加入的C3抗原含量分别是0. 55g/L、 1. 10g/L、 1. 60g/L 和2. 20g/L。所述的抗C3抗体来自羊、马、鼠或兔等哺乳动物。所述的稳定剂选自乙二胺四乙酸二钠、氯化镁、牛或人血清白蛋白乙二醇、 丙三醇、甘露糖醇、海藻糖中的一种或多种。所述的校准剂中的缓冲液选自PBS、 Tris、 TAPS、、 HEPPS、 CHES、 CAPS、 CAPSO、 POPSO、 Tricie、甘氨酸、双甘氨肽、二甘氨酸、硼酸盐中的一种或多种，ffl值 为5-10。所述的C3反应剂及抗C3抗体试剂中的缓冲液选自磷酸盐缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液、PIPES缓冲液、HEPES缓冲液、TAPS缓冲液、甘氨酸缓冲液、硼 酸缓冲液中的一种或多种，PH值为5-10。所述的C3反应剂及抗C3抗体试剂中的缓冲液优选磷酸盐，PH值为7. 4-8. 1。所述的表面活性剂选自非离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、阴离子表面 活性剂或两性离子表面活性剂中的一种或多种。所述的中的表面活性剂优选非离子表面活性剂。所述的电解质可以是阴离子电解质或阳离子电解质。所述的电解质优选阳离子电解质中的氯化钠。所述的防腐剂选自叠氮钠、乙基汞硫代硫酸钠、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲 酸乙酯、苯酚、广谱杀菌剂中的一种或多种。本专利技术的原理是利用抗原抗体反应，加入反应剂，即样品稀释液，解除样本 中抗原周围的电子层和水化层，使抗原位点充分暴露，然后加入抗C3抗体试剂； 高特异反应性的抗C3抗体试剂与样本中相应的G抗原反应，形成不溶性的抗原-抗体复合物，产生一定的浊度，其浊度高低与样本中的C3含量成正比，在规定波 长下测定该不溶性抗原-抗体复合物的吸光度值，与己知恒定的校准剂比较，通 过公式<formula>formula see original document page 6</formula>式中AAu为以空白管吸光度为对照的样品管吸光度 AAs为以空白管吸光度为对照的校准管吸光度 Cs为校准剂中C3的浓度 可计算出样本中C3的含量。本专利技术提供的试剂使用时测得的数据准确度高、重复性好、抗干扰能力强；并且由于样本不用预稀释，采用血清型液体恒定值校准液后不需每批更改参数， 因而操作简单，还能广泛适用于各种类型的全自动生化分析仪。具体实施方式本专利技术所提供的补体3检测试剂包括以下成份a、 一种使样品中C3抗原位点充分暴露，有利于与抗C3抗体试剂充分结合的 C3反应剂(即样品稀释液)，包括防腐剂0. 01-1、稳定剂0.05-1、电解质O. 1-10、 高分子加速剂2-8，还可包括表面活性剂O. 1-10和反应促进剂0.1-0. 5，其余是 5-200mmol/L缓冲剂；上述防腐剂、稳定剂、电解质、高分子加速剂、表面活性 剂及反应促进剂的含量均为在C3反应剂中所占的重量百分比。b、 一种与人血清中的C3抗原有高度特异反应性的抗C3抗体试剂，包括抗G 抗体5 - 50、抗氧化剂0. 001 - 0. 5和稳定剂0. 05 - 20，以及防腐剂0. 01 - 1、 电解质O. 1 — 10、高分子加速剂2 - 8和表面活性剂0. 1 - 10，其余是5 — 200聽1/L 缓冲剂；上述抗C3抗体、抗氧化剂、稳定剂、防腐剂、电解质、高分子加速剂及 表面活性剂的含量均为在抗C3抗体试剂中所占的重量百分比。作为单试剂使用时，上述C3反应剂和抗C3抗体试剂可以按3: l的体积比例 进行组合搭配，也可以是4: 1、 5: 1、或7: 1。 以上所述的各成分中缓冲剂可以是磷酸盐缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液、PIPES缓冲液、HEPES 缓冲液、TAPS缓冲液、甘氨酸缓冲液或硼酸缓冲液等，本专利技术优选磷酸盐缓冲 液；缓冲液的PH值为5-10，本专利技术优选PH值为7.4-8. 1，在此范围内反应效果 最好；防腐剂可以是叠氮钠、乙基汞硫代硫酸钠、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸乙 酯、苯酚或广谱杀菌剂，本专利技术从环保角度考虑，优选广谱杀菌剂；稳定剂的可以是乙二胺四乙酸二钠、氯化镁、牛(人)血清白蛋白乙二醇、 甘露糖醇或海藻糖；电解质的可以是阴离子或阳离子，本专利技术优选阳离子中的氯化钠(NaCl);加速剂可以是聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000或聚乙二醇 8000，本专利技术优选聚乙二醇6000;表面活性剂可以是非离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、阴离子表面活性 剂或两性离子表面活性剂，本专利技术优选非离子表面活性剂，包括Theist、 Tween 系列、聚氧乙烯月桂醚系列、聚氧乙烯苯基醚、聚氧乙烯辛基苯醚、聚氧乙烯本文档来自技高网...

【技术保护点】
补体３检测试剂，其特征在于该试剂包括：　ａ、一种使样品中Ｃ↓［３］抗原位点充分暴露、从而有利于与抗Ｃ↓［３］抗体试剂充分结合的Ｃ↓［３］反应剂，包括的成分及所占重量百分比为：防腐剂０．０１－１、稳定剂０．０５－１、电解质０．１－１０、 高分子加速剂２－８、表面活性剂０．１－１０和反应促进剂０．１－０．５，其余是５－２００ｍｍｏｌ／Ｌ的缓冲剂；　ｂ、一种与人血清中的Ｃ↓［３］抗原有高度特异反应性的抗Ｃ↓［３］抗体试剂，包括的成分及所占重量百分比为：抗Ｃ↓［３］抗体５－ ５０、抗氧化剂０．００１－０．５和稳定剂０．０５－２０，还包括防腐剂０．０１－１、电解质０．１－１０、高分子加速剂２－８、表面活性剂０．１－１０，其余是５－２００ｍｍｏｌ／Ｌ的缓冲剂；　ｃ、一种用来与样品比较、进行结果计算的液体血清型 恒定值校准剂，包括的成分及所占重量百分比为：防腐剂０．０１－１和稳定剂０．１－１和防霉剂０．０５－０．１％，其余是２０－１００ｍｍｏｌ／Ｌ缓冲剂以及适量Ｃ↓［３］抗原。　所述的液体血清型恒定值校准剂分为五份，其中四份校准剂中加入的Ｃ↓ ［３］抗原含量分别是０．２０－０．６ｇ／Ｌ、０．７－１．４ｇ／Ｌ、１．５－１．８ｇ／Ｌ、２．０－３．０ｇ／Ｌ，另１份Ｃ↓［３］抗原不加。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王贤理，蒙凯，蔡其浩，蔡伟伟，
申请(专利权)人：王贤理，
类型：发明
国别省市：33[中国|浙江]