甾体化合物分析方法技术

一种甾体化合物的分析方法，涉及卤甲松系列化合物以及其合成涉及的一些中间体的分析方法，提供了一个全新的卤甲松液相分析方法，该方法能够系统分析卤甲松系列化合物以及其合成过程中间体。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及卤甲松系列化合物以及其合成涉及的一些中间体的分析方法。
技术介绍
卤甲松是一个含卤基的强效外用糖皮质类固醇药物，具有快速抗炎、抗过敏、止痒、血 管收縮、抗渗出及抗增生作用，它活性强作用快，广泛应用于不同类型的炎症性皮肤病，能 迅速地减轻和消除如瘙痒等症状。关于卤甲松的文章报道的己经很多，但是关于其分析方法的相关报道，主要是涉及其制 剂的分析方法只有一篇，简单介绍如下文献Cesko-Slovenska Farmacie (1986)， 35(6), 265-9.提到了利用微分脉冲极谱 (differential pulse polarography; DPP)方法，对卤甲松软膏，乳膏和片剂中卤甲松的含量进行测 定。该文献报道的方法虽然可以用来分析卤甲松，但是适用性范围比较窄，微分脉冲极谱应 用起来不够方便。为了了解卤甲松工艺路线中各个中间体的含量和变化过程，监控反应过程， 需要一种适用性很广泛的分析方法，比如普通的高压液相法，能对合成路线上涉及到的中间 体以及成品进行系统得分析比较，以便于分析最终产品中产生的杂质的来源及其含量，可以 通过优选反应条件，减少反应过程产生的杂质。然而，目前未见文献报道解决该问题。针对卤甲松以及合成涉及的一些中间体的系统分析方法问题，本专利技术提供了一个全新的 卤甲松液相分析方法，该方法能够系统分析卤甲松系列化合物以及其合成过程中间体。色谱 法参照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录V D)测定。本专利技术提到的液相方法，测试样品为卤甲松系列化合物以及其合成过程中间体，即式(I )化合物，其结构式为<formula>formula see original document page 4</formula>
技术实现思路
其中1， 2位上的H或卤素，R2-H或卤素。其分析方法如下a色谱柱选用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱b以乙腈和水为流动相，c检测波长为235-255 nmd取测试样品适量，精密称定，加乙腈溶解并用乙腈稀释制成一定浓度Ca的溶液，摇匀，精 密量取50^11注入液相色谱仪，记录色谱图。本专利技术提到的分析方法得到的色谱图是测试样品的归一法液相色谱图，得到了测试样品 的归一法液相含量，使用同样的分析方法，可以得到测试的对照品的归一法液相含量，然后 通过公式计算，可以得到测试样品的外标法的液相含量。即本专利技术提到的分析方法可以用于 测定测试样品的外标法液相含量，其具体过程是分别测定测试样品和测试的对照品的归一 法液相含量，按外标法以峰面积计算，即得到该样品的液相含量Cn/。；C%=Aa/As X Cs/CaX100%其中Aa为测试样品液相主峰面积；As为测试的对照品液相主峰面积； Ca为测试样品浓度；Cs为测试的对照品浓度。本专利技术提到分析方法中测试的对照品为对应测试样品精制得到的含量为99.5%以上的标 准品或工作标准品。本专利技术提到的分析方法中，式(I )化合物优选l， 2位为双键。，本专利技术提到的分析方法中，卤甲松系列化合物以及其合成过程中间体优选R=H或COCH3， R1-H或Cl， R2-H或C1。本专利技术提到的分析方法中，卤甲松系列化合物以及其合成过程中间体优选1， 2位上为双键，R-H或OCOR3，其中R3-5个碳以下的烷基；更优选R1-卤素，R2= H; 1， 2位上 为双键，R-H或COCH3， R1-卤素，R2=H。最优选l， 2位上为双键，R=H或COCH3， R1-C1， R2-H;以及l, 2位上为单键，R-H或COCH3， R1=C1， R2=C1。本专利技术提到的分析方法不仅适用于分析卤甲松系列化合物以及其合成过程中间体，也适 合于分析卤甲松制剂中的卤甲松含量。本专利技术提到的分析方法，流动相乙腈和水的体积配比选自乙腈水=35: 75-50: 50; 优选体积配比乙腈水=40: 60 45: 55;最优选乙腈水=43: 57。本方法涉及的测试样品浓度Ca和测试样品的对照品浓度Cs可在0.1 10mg/ml范围内，优选1 8mg/ml，最优选 0.2 lmg/ml。卤甲松系列化合物以及其合成过程中间体，其紫外吸收最大峰波长在235-255 nra之间； 本专利技术提供的检测方法使用检测波长选自是238-245 nm，优选为240nm。理论塔板数按主峰计算应以不低于2000为佳。本专利技术提到的分析方法，其流动相中还可以加入一定量的醋酸，可以减少个别峰的脱尾 现象。本专利技术提到的分析方法，其流动相中还可以加入醋酸的体积配比是流动相乙腈和水的总 体积的0.01%-10%，优选0.1%。卤甲松制备过程路线以及涉及的中间体如下过程示意图以双氟米松醋酸酯为起始物，得到双氯物和单氯物混和物，再得到单氯物，最后得到卤甲松的过程。该过程涉及的双氟米松醋酸酯、双氯物和单氯物混和物、单氯物和卤甲松均能使用本专利技术提 供的分析方法，系统适应性较好。本专利技术提供的分析方法，进行了精密度、检测限等测定手段，均符合中国药典2005年版 的相应规定。此外，根据中国药典2005年版，目前已经做完了方法学验证，包括系统适用性 试验、线性试验、回收试验以及专属性试验。经过这些验证，本专利技术提供的分析方法实用可 靠，稳定性较好。本专利技术提供的卤甲松以及其合成涉及的一些中间体的高效液相方法，具有如下优点(1) 使用普通的液相色谱仪即可，设备要求不高。(2) 流动相选用的两个介质普通易得，可行性高。 ，(3)操作过程较为简单方便。(4)适用性好，可以广泛应用于卤甲松以及其合成涉及的一些中间体。 附图说明图2:样品2的HPLC图谱 图4:样品4的HPLC图谱 图6:样品6的HPLC图谱 图8:样品8的HPLC图谱图1:样品1的HPLC图谱 图3:样品3的HPLC图谱 图5':样品5的HPLC图谱 图7:样品7的HPLC图谱具体实施例方式下面将通过实施例对本专利技术作进一步的描述，这些描述并不是对本
技术实现思路
作进一步的 限定。本领域的技术人员应理解，对本专利技术的技术特征所作的等同替换，或相应的改进，仍 属于本专利技术的保护范围之内。实施例一色谱条件-色谱柱C18; 5|im; 4.6mmx250mm。流^]相乙腈水=43: 57 (体积比) 进样量50pl检测波长240nm 流速1.0ml/min操作取样品适量，精密称定，加乙腈溶解并定量稀释制成每lml中含0.4mg的溶液，摇匀，精密量取50^il注入液相色谱仪，记录色谱图，即得样品的归一法液相含量。样品为同一批号(060501)的卤甲松以及其合成涉及的中间体，液相结果见附图1-5。<table>table see original document page 7</column></row><table>实施例:色谱条件色谱柱C18; 5ym; 4.6mmx250mmc流动相乙腈一水(4: 6)进样量50nl检测波长240nm 流速l.Oml/min操作取卤甲松样品6适量，精密称定，加乙腈溶解并定量稀释制成每lml中含0.8mg的溶 液，摇匀，精密量取50pl注入液相色谱仪，记录色谱图；即得归一法液相含量。样品6和样品1为同一批卤甲松，得到的液相含量98.96%，保本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种式（Ⅰ）化合物的分析方法：　＊＊＊　（Ⅰ）　其中１，２位上的“＊”为单键或双键，Ｒ＝Ｈ或ＣＯＲ３，其中Ｒ３＝５个碳以下的烷基；Ｒ１＝Ｈ或卤素，Ｒ２＝Ｈ或卤素；　ａ色谱柱选用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱　 ｂ以乙腈和水为流动相，　ｃ检测波长为２３５－２５５ｎｍ　ｄ取测试样品适量，精密称定，加乙腈溶解并用乙腈稀释制成一定浓度Ｃａ的溶液，摇匀，注入液相色谱仪，记录色谱图。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：樊娜，朱润芝，
申请(专利权)人：天津金耀集团有限公司，
类型：发明
国别省市：12[中国|天津]