一种甾体皂类化合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种甾体皂类化合物及其制备方法和应用，属于医药技术领域。该甾体皂类化合物，是从金线重楼中提取分离得到的一种新的甾体皂苷类化合物，结构中苷元及3位糖链在重楼属中较为罕见，通过核磁及ESI-MS分析，确定其分子式为C57H92O25。该化合物对缺氧/复氧模型诱导的心肌细胞损伤有保护作用，能够提高缺氧/复氧损伤后心肌细胞的存活率，降低血清中LDH含量，有望成为新的治疗心血管疾病的药物。上述甾体皂类化合物的制备方法，是从金线重楼中提取分离，方法操作简单，提取出的甾体皂类化合物纯度高、收率好。

【技术实现步骤摘要】
一种甾体皂类化合物及其制备方法和应用
本专利技术属于医药
，具体涉及一种从重楼属(Paris)植物中分离的甾体皂类化合物及其制备方法和应用。
技术介绍
中药重楼来源于百合科(Liliaceae)重楼属植物，主要分布于亚欧大陆的热带和温带地区，全世界共有24个种，我国种类最多，有19种，以西南各省区的种类和资源最为丰富。本属植物是一类极具药用价值的植物，其根茎在我国有着悠久的药用历史，具有清热解毒、消肿止痛和凉肝定惊之功效，用于治疗痈疮、毒蛇咬伤、凉风抽搐、咽喉肿痛和跌打伤痛等症。现代药理学研究表明重楼属植物具有抗肿瘤、心脏保护、肾脏保护及抗炎等作用。金线重楼(Parispolyphyllavar.latifolia)主要分布于四川、云南、江西、湖北和陕西等地，有关该植物化学成分及药理活性的研究尚未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种甾体皂类化合物及其制备方法和应用。本专利技术是通过以下技术方案来实现：本专利技术公开了一种甾体皂类化合物，其化学结构式如下：该甾体皂类化合物的分子式为C57H92O25；命名为：26-O-β-D-吡喃葡萄糖-3β,26-二羟基-25(R)-Δ5,22-二烯-呋甾-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷。本专利技术还公开了上述的甾体皂类化合物在制备治疗心血管疾病的药物和/或保健品中的应用。所述的药物和/或保健品为对缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤有保护作用的药物和/或保健品。所述的药物和/或保健品为降低细胞血清中LDH含量的药物和/或保健品。所述的药物和/或保健品为提高缺氧/复氧损伤后心肌细胞存活率的药物和/或保健品。本专利技术还公开了一种甾体皂类化合物的制备方法，包括以下步骤：1)将金线重楼药材粉碎后，加醇回流提取后，回收溶剂，得醇提物；2)将醇提物分散于水中，先用石油醚萃取，再将萃取后的水相用正丁醇萃取，得到正丁醇萃取液；3)将正丁醇萃取液采用硅胶柱层析，以氯仿-甲醇-水的混合溶剂进行梯度洗脱，薄层层析检测，收集含甾体皂类化合物的馏分。步骤1)中，金线重楼药材与加入的醇的料液比为1g:(8～10)mL；加入的醇为甲醇或乙醇；回流提取1～3次，每次1～3h。步骤2)中，醇提物与水的用量比为1g：(4～8)mL；萃取时，先用石油醚萃取2～4次，再将萃取后的水相用正丁醇萃取2～4次；步骤3)是以体积比为10:1:0～6.5:3.5:1的氯仿-甲醇-水混合溶剂进行梯度洗脱。在步骤3)收集含甾体皂类化合物的馏分后，还包括采用高效液相色谱分离纯化的步骤，具体操作为：将含甾体皂类化合物的馏分以体积比为70:30的甲醇-水混合溶剂为流动相进行洗脱，制得甾体皂类化合物纯品与现有技术相比，本专利技术具有以下有益的技术效果：本专利技术公开的甾体皂类化合物，是从金线重楼中提取分离得到的一种新的甾体皂苷类化合物，结构中苷元及3位糖链在重楼属中较为罕见，通过核磁及ESI-MS分析，确定其分子式为C57H92O25。本专利技术通过体外活性试验证实，该化合物对缺氧/复氧模型诱导的心肌细胞损伤有保护作用，能够提高缺氧/复氧损伤后心肌细胞的存活率，降低血清中LDH含量，有望成为新的治疗心血管疾病的药物。本专利技术还公开了上述甾体皂类化合物的制备方法，是从金线重楼中提取分离，方法操作简单，提取出的甾体皂类化合物纯度高、收率好。附图说明图1为化合物GDFR的HR-ESI-MS谱。图2为化合物GDFR的1HNMR谱；图3为化合物GDFR的13C-NMR谱图4为化合物GDFR的DEPT(135°)谱图5为化合物GDFR的HSQC谱图6为化合物GDFR的1H-1HCOSY谱图7为化合物GDFR的HMBC谱图8为化合物GDFR的TOCSY谱图9为化合物GDFR的NOESY谱图10为化合物GDFR关键的HMBC和NOESY相关图。具体实施方式下面结合具体的实施例对本专利技术做进一步的详细说明，所述是对本专利技术的解释而不是限定，未注明具体条件的试验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。未详细叙述的测试方法和英文缩写属本行业的常用方法和公知常识，在网上或文献中可以检索到。本专利技术公开的甾体皂类化合物，如式Ι所示：上述结构其化学名称为26-O-β-D-吡喃葡萄糖-3β,26-二羟基-25(R)-Δ5,22-二烯-呋甾-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷。26-O-β-D-glucopyranosyl-3β,26-dihydroxy-25(R)-furosta-5,20(22)-dien-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)-β-D-glucopyranoside)。该化合物是从金线重楼中分离的新的甾体皂苷类化合物，以下简称其为GDFR。所述式I化合物GDFR的制备方法，具体步骤如下：该化合物的制备方法是金线重楼药材经粉碎后，按重量体积比加入8～10倍原料重的甲醇或乙醇回流提取，共提取3次，每次1～3小时。合并后回收溶剂，得醇提取物，提取物分散于按重量体积比4～8倍的水中，依次用石油醚、水饱和正丁醇萃取3次，分别得到石油醚和正丁醇的两个萃取部位。正丁醇层采用硅胶柱层析，以体积比为10:1:0～6.5:3.5:1的氯仿-甲醇-水混合溶剂梯度洗脱，薄层层析检测，收集含式I化合物GDFR的流份，最后经高效液相色谱仪分离纯化，体积比为70:30的甲醇-水混合溶剂为流动相洗脱，得到GDFR的纯品。所述的式I化合物GDFR的制备方法，除应用常规的溶剂提取、溶剂萃取和各种色谱分离技术外，在制备总皂苷时，对包含有GDFR的总皂苷的确定是采用如下手段来检查的：以硅胶薄层层析检测，采用体积比为10:1的水饱和正丁醇-甲醇混合溶剂或体积比为6.5:3.5:1的氯仿-甲醇-水混合溶剂展开，收集Rf值在0.2～0.35处显示紫红色斑点的流份，即为总皂苷。所述的式I化合物GDFR在浓度为25μmol/L～100μmol/L时能够提高缺氧/复氧损伤后心肌细胞的存活率，降低血清中LDH含量，且呈一定的剂量依赖性。本专利技术的特点是：式Ι化合物GDFR苷元及3位糖链在重楼属中较为罕见。该化合物对缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤有明显的保护作用，表明其可以进一步研发为新的治疗心血管疾病的药物。本专利技术从金线重楼中通过提取、分离纯化得到式Ι化合物GDFR，该化合物可为研制新的心血管药物提供了先导化合物。1、化合物的提取和分离采自陕西省宝鸡市太白县金线重楼根茎为原料，经粉碎成粗粉后，取10公斤，加入80升浓度为70％的乙醇进行回流提取，共提取3次，每次2小时。合并提取液，减压回收溶剂，得乙醇提取物780克。将乙醇提取物分散于8升水中，用石油醚萃取3次，每次8升。萃取后的水相再用正丁醇萃取3次，每次8升，合并正丁醇萃取液，回收溶剂得到总皂苷提取物140克。采用硅胶柱层析，以体积比为10:1:0.1～6.5:3.5:1(均取下层作为洗脱液)的氯仿-甲醇-水混合溶剂梯度洗脱，按150mL为一个本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种甾体皂类化合物，其特征在于，其化学结构式如下：

【技术特征摘要】
1.一种甾体皂类化合物，其特征在于，其化学结构式如下：2.根据权利要求1所述的甾体皂类化合物，其特征在于，该甾体皂类化合物的分子式为C57H92O25；命名为：26-O-β-D-吡喃葡萄糖-3β,26-二羟基-25(R)-Δ5,22-二烯-呋甾-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷。3.权利要求1所述的甾体皂类化合...

【专利技术属性】
技术研发人员：李嘉，刘杨，张伟，汤海峰，奚苗苗，杨璐，
申请(专利权)人：中国人民解放军第四军医大学，
类型：发明
国别省市：陕西;61