一种新的多肽--人剑蛋白亚基53.90和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人剑蛋白亚基５３．９０，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人剑蛋白亚基５３．９０的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——人剑蛋白亚基53.90，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。微管蛋白是一种动力学结构，其在细胞周期中有规则的分布对于细胞间期中膜的定位和有丝分裂期中染色体分离起着非常重要的作用。一些微管切割蛋白能够改变细胞周期依赖的微管的运动和组织，这些蛋白是p56、EF1a和剑蛋白，它们都不能被cyclin B/cdc2所活化。剑蛋白主要集中在有丝分裂细胞纺锤体的微观支架结构和人类成纤维细胞中，对于纺锤体微管解体具有特异性作用。值得注意的是，剑蛋白还存在于成体的脑中，表明除了在有丝分裂中发挥作用外，它还有其它方面的功能。剑蛋白的活化需要消耗ATP，不同于另外两种微管切割蛋白p56和EF1a。剑蛋白是异源二聚体结构，由60Kda和80Kda两个亚基共同组成(McNally and Vale，1993)。60Kda的亚基还是一种ATP酶，属于ATP酶AAA家族的蛋白成员(Confalonieri andDuguet，1995)。实验表明，即使当80KDa亚基不存在时，它仍然能够表达微管切割活性以及微管激活的ATP酶活性(Hartman et al.，1998)，证明了60Kda亚基是剑蛋白中发挥主要功能的亚基。在体内，剑蛋白的一个重要功能是亚细胞定位，它通常聚集在细胞内中心体上(McNally et al.，1996)，从它们的附着为点上切割纺锤体微管，这种切割反应有利于使得微管向两极运动(Mitchison，1989)。中心体相关的微管蛋白同时也涉及神经微管从中心体的释放(Baas and Yu，1996)。剑蛋白在有丝分裂中起着非常重要的调节和定位作用，另外，它也存在于成人的脑组织中，表明了其在非分裂细胞中具有其它方面的功能。在许多种类和细胞型中，剑蛋白都聚集于中心体周围，在神经细胞中也不例外，它能够从中心体附着为点上释放微管，使得微管沿着轴突运动。在非神经细胞的细胞周期间期中心体上，也有类似的微管释放现象。本专利技术的多肽与上述的剑蛋白60Kda亚基有68％的相同性，78％的相似性，并且包含ATP酶AAA家族特征性的保守序列，因此认为此蛋白是一种新的ATP酶，具有与剑蛋白60Kda亚基相似的生物学功能，并命名为人剑蛋白亚基53.90。由于如上所述人剑蛋白亚基53.90蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人剑蛋白亚基53.90蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人剑蛋白亚基53.90蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——人剑蛋白亚基53.90以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人剑蛋白亚基53.90的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人剑蛋白亚基53.90的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人剑蛋白亚基53.90的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人剑蛋白亚基53.90的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——人剑蛋白亚基53.90的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人剑蛋白亚基53.90异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO1中105-1577位的序列；和(b)具有SEQ ID NO1中1-1674位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人剑蛋白亚基53.90蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人剑蛋白亚基53.90蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人剑蛋白亚基53.90表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肤、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改变导致与天然存在的分子相比，一个或多个氨基酸或核苷酸的增加。“替换”是指由不同的氨基酸或核苷酸替换一个或多个氨基酸或核苷酸。“生物活性”是指具有天然分子的结构、调控或生物化学功能的蛋白质。类似地，术语“免疫学活性”是指天然的、重组的或合成蛋白质及其片段在合适的动物或细胞中诱导特定免疫反应以及与特异性抗体结合的能力。“激动剂”是指当与人剑蛋白亚基53.90结合时，一种可引起该蛋白质改变从而调节该蛋白质活性的分子。激动剂可以包括蛋白质、核酸、碳水化合物或任何其它可结合人剑蛋白亚基53.90的分子。“拮抗剂”或“抑制物”是指当与人剑蛋白亚基53.90结合时，一种可封闭或调节人剑蛋白亚基53.90的生物学活性或免疫学活性的分子。拮抗剂和抑制物可以包括蛋白质、核酸本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人剑蛋白亚基５３．９０，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]