一种新的多肽——神经发育调控蛋白37.95和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－神经发育调控蛋白３７．９５，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如神经系统的发育紊乱性疾病、胚胎发育紊乱症、生长发育障碍性疾病、肿瘤等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的神经发育调控蛋白３７．９５的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——神经发育调控蛋白37.95，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。Otx是发育早期的转录因子，可作为脑部触角和前触角片段的体节缺口基因，Otx基因在上皮细胞中间结构的形成中有重要作用，这又影响中枢神经系统的发育。Otx1和Otx2是脊椎动物的同源基因，主要在发育期的大脑皮层及大脑掌管嗅觉的部分表达，这两个基因在划分丘脑的背、腹部界限中均有作用，它们在听觉、视觉系统中也有表达。Otx1在妊娠8天胚胎的端脑、间脑、中脑表达，而在妊娠10.5天的胚胎的后脑中亦有表达。Otx2在外胚层表达，在妊娠早期，主要在端脑、间脑、中脑表达，而到了妊娠11.75天它在端脑的表达消失，集中在间脑和中脑。Otx2是在外胚层中最早表达的基因之一，之后立即在神经外胚层表达，在头褶形成之前即参与划分脑区域的界限。Otx、Otx1和Otx2基因均含一个类似bcd的同源域，它们的产物能识别转录控制区的bcd靶序列(bts)，能结合类似的DNA靶序列。Otx1和Otx2基因的表达产物分别由355和289个氨基酸残基组成，它们氨基端的98个残基十分相似，同源域及其上游的345个残基亦类似。其它相似的区域存在于同源域的下游，Otx1的该区域被包括Ala和His的重复结构所隔开。Otx1、Otx2的同源域与Otx的同源域分别有3个和2个残基的不同，这3个同源域的第9位皆为Lys，它们同源域上游都有一较短的氨基末端，而其下游为一较长的羧基末端。Otx1和Otx2的同源域紧邻上游处均为Arg-Lys，氨基末端均为Tyr-Leu-Lys，它们都有一内含子紧邻同源域上游，该内含子上游处的外显子在3个基因中都是Tyr-Pro-Ala/Gly模式。人OTX1基因不在NT2/D1 EC细胞表达(Simeone et al.，1991)，而OTX2则表达。本专利技术的新的多肽与已知的含bcd同源域的Otx蛋白在蛋白水平上具有100％的同源性和100％的相似性，并与之具有相似的结构特征，由此认为其是一种新的含bcd同源域的Otx蛋白，命名为多肽命名，并与已知蛋白具有相似的生物学功能，能识别转录控制区的bcd靶序列，结合类似DNA序列，与胚胎的早期发育相关，若表达异常，将严重影响生物体的发育、分化等生理过程。此外，其在一些发育异常性疾病的诊断及治疗中也有一定作用。由于如上所述神经发育调控蛋白37.95蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的神经发育调控蛋白37.95蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新神经发育调控蛋白37.95蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——神经发育调控蛋白37.95以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码神经发育调控蛋白37.95的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码神经发育调控蛋白37.95的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产神经发育调控蛋白37.95的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——神经发育调控蛋白37.95的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——神经发育调控蛋白37.95的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与神经发育调控蛋白37.95异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少100％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO1中18-1055位的序列；和(b)具有SEQ ID NO1中1-2117位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制神经发育调控蛋白37.95蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与神经发育调控蛋白37.95蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于神经发育调控蛋白37.95表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改变导致与天然存在的分子相比，一个或多个氨基酸或核苷酸的增加。“替换”是指由不同的氨基酸或核苷酸替换一个或多个氨基酸或核苷酸。“生物活性”是指具有天然分子的结构、调控或生物化学功能的蛋白质。类似地，术语“免疫学活性”是指天然的、重组的或合成蛋白质及其片段在合适的动物或细胞中诱导特定免疫反应以及与特异性抗体结合的能力。“激动剂”是指当与神经发育调控蛋白37.95结合时，一种可引起该蛋白质改变从而调节该蛋白质活性的分子。激动剂可以包括蛋白质、核酸、碳水化合物或任何其它可结合神经发育调控蛋白37.95的分子。“拮抗剂”或“抑制物”是本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－神经发育调控蛋白３７．９５，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]