一种新的多肽——人含PDZ结构域肌动结合蛋白51.37和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人含ＰＤＺ结构域肌动结合蛋白５１．３７，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如周期性瘫痪、心律失常、支气管哮喘、消化性溃疡、糖尿病、胚胎发育畸形、肿瘤等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人含ＰＤＺ结构域肌动结合蛋白５１．３７的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——人含PDZ结构域肌动结合蛋白51.37，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。肌动蛋白在细胞结构、细胞运动及肌肉细胞与非肌肉细胞的收缩力形成过程中都起着重要的作用。在很多器官中均发现有肌动蛋白及肌动蛋白异构体存在。虽然这些肌动蛋白氨基酸序列非常相似，但均是由不同基因产生的不同的蛋白产物。在脊髓动物中含有三种肌动蛋白异构体α、β及γ。α肌动蛋白在肌肉组织中发现，其在肌肉收缩过程中起重要作用；β及γ肌动蛋白在众多细胞中均有表达，如作为细胞骨架的组成成分及细胞内运动的中介物。肌动蛋白不仅在肌肉收缩力的形成过程中起重要作用，其在非肌肉细胞的生理过程中亦起着重要的作用，如胞质环流、细胞形态形成及细胞壁沉积等。肌动蛋白在不同的组织中均有着重要的生理学功能。在肌肉细胞中，它们与线粒体及神经肌肉接头的结构及功能特异相关。这些蛋白还与微血管外膜细胞及肠上皮细胞的各种生理学功能相关。因而，这些蛋白在生物体内的表达异常将导致上述器官及细胞的功能异常，从而引发各种与之相关的上述组织的疾病。肌动蛋白或以单体形式存在或以多聚体形式存在。每一肌动蛋白单体均可结合一分子的ATP，在蛋白聚合时，ATP被水解，以提供蛋白作用所需的能量。肌动蛋白通常含有以下三个保守的一致性序列，序列1--G--E-A-Q-X-(2)-G；序列2W----X--Y--及序列3--T-E--X--N--X(2)-N-。前两个保守序列对于所有的肌动蛋白是特异的，而第三个保守序列在肌动蛋白及肌动蛋白相似的蛋白中均存在。这些保守的序列片段为蛋白发挥生理学功能的作用位点。这三个序列片段中某些特殊位点的突变将导致蛋白功能的异常，从而引发各种相关组织的疾病，如微血管系统疾病、肠道组织疾病及一些与运动系统相关的疾病。PHD指结构域是一种C4HC3型锌指结构相似的结构基序，最早在核蛋白中被发现。现已发现在多种不同的蛋白中均含有这一结构基序，这些蛋白在生物体内均参与各种染色质介导的转录调控过程。PHD结构域通常在蛋白作用过程中涉及蛋白与DNA、RNA的相互作用，其在生物体一些多组分复合物的聚集及活化过程中起着极为重要的作用，直接调控着染色质结构的形成。而染色质的结构又直接影响着一些基因的转录与表达过程。该结构基序由如下所示的一致性序列片段组成C(X)1，2C(X)5，45(V，W，F，L，W，I，E)XC(X)1，4C(X)1，4(W，Y，F，V，Q，H，L，T)HXXC(X)5，45(W，F，L，Y，I)XCXXC；该一致性序列片段亦是蛋白发挥生理学功能的重要作用位点，其与C4HC3锌指结构域相似，通过与两个锌离子结合以形成具有活性的构象。该序列片段在生物体内通过调节相关蛋白的相互作用来调控一些基因的表达，从而影响相关组织细胞的增殖及分化。研究发现，该结构域在生物体的发育过程起着重要的作用，其突变将导致蛋白的功能异常，通常与一些相关组织的生长、发育紊乱性疾病及白血病等血液系统疾病的发生相关。本专利技术的新的人蛋白同时含有肌动蛋白结构域和PHD指结构域，因而其为一新的肌动蛋白。该蛋白在生物体内调控着各种肌肉组织基因的表达与作用，该蛋白的表达异常通常与一些肌肉组织发育代谢紊乱性疾病、微血管系统疾病、肠道组织疾病、运动组织疾病及相关组织肿瘤及癌症的发生相关。其还可用于诊断及治疗上述各种相关疾病。本专利技术人的多肽与人含PHD结构域肌动结合蛋白在氨基酸水平上分别有81％的相同性和86％的相似性，并具有相似的结构特征，同属于含PHD结构域肌动蛋白家族，故命名为人含PDZ结构域肌动结合蛋白51.37，同时推测其具有相似的生物学功能。由于如上所述人含PDZ结构域肌动结合蛋白51.37蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人含PDZ结构域肌动结合蛋白51.37蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人含PDZ结构域肌动结合蛋白51.37蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——人含PDZ结构域肌动结合蛋白51.37以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人含PDZ结构域肌动结合蛋白51.37的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人含PDZ结构域肌动结合蛋白51.37的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人含PDZ结构域肌动结合蛋白51.37的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人含PDZ结构域肌动结合蛋白51.37的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——人含PDZ结构域肌动结合蛋白51.37的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人含PDZ结构域肌动结合蛋白51.37异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少82％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO1中212-1615位的序列；和(b)具有SEQ ID NO1中1-2268位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人含PDZ结构域肌动结合蛋白51.37蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人含PDZ结构域肌动结合蛋白51.37蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人含PDZ结构域肌动结合蛋白51.37表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人含ＰＤＺ结构域肌动结合蛋白５１．３７，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]