一种多肽－人肌肉BOP蛋白41和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种多肽－－人肌肉ＢＯＰ蛋白４１，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人肌肉ＢＯＰ蛋白４１的多核苷酸的用途。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种多肽——人肌肉BOP蛋白41，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。
技术介绍
在研究基因表达时，常常可以发现两个或两个以上的基因在染色体上的位置关系密切。它们或者紧靠在一起，公用同一个启动子，或者启动子相距很近，或同向或反向地起始转录。它们在位置上的紧密联系也暗示了他们在功能上的关系，同时也为研究它们在进化上的关系提供了线索。基因Bop与CD8b就属于这种情况。Bop基因的启动子位于CD8b启动子的上游约600个碱基，启动转录的方向与CD8b相反。对Bop基因和CD8b基因在淋巴细胞中的表达情况的研究表明Bop在第一类MHC特异的CTL细胞细高表达，在胸腺，Con-A刺激的淋巴结细胞和几种CD8b阳性的癌细胞系中表达的弱一些。Bop的表达可能是淋巴细胞表面受到刺激的结果。Bop在转录是首先转录出的一个转录本经过不同的剪切形成不同的成熟mRNA，它们的5’核苷酸顺序相同。其中一类在CTL细胞中表达出的蛋白称为t-BOP，另一类mRNA似乎是不编码的，它包括许多个短的开放读框，最长的一个只有57个氨基酸。另外在心肌和骨骼肌中也发现了Bop基因的表达，它与t-BOP极其相似，被称为skm-BOP。在skm-BOP中有一个锌指结构。锌指结构在核酸-蛋白、蛋白-蛋白相互作用中其重要作用。锌指结构还存在于酶的活力位点中。另外，skm-BOP还包括与其他蛋白同源的结构，例如鼠的KINESIN轻链、一种从人婴儿大脑中克隆的视黄酸相应基因NN8-4AG，以及一种位于肌肉M细胞系中的蛋白SKELEMIN。skm-BOP在位置上与CD8b的紧密联系以及相反的启动转录方向显示了skm-BOP蛋白与CD8蛋白，特别是CD8蛋白的β亚基在功能上也可能是相关的。可能二者在相同的功能通路上起作用。CD8b在第一类MHC特异的CTL细胞系的发育中起关键作用，这与skm-BOP在T细胞中特异表达的结果是一致的。skm-BOP的生物学功能显示了其在免疫防御、免疫应答、细胞识别等相关疾病治疗方面的潜力。本专利技术的人的基因与skm-BOP在蛋白水平上有32％的同源性。故认为本专利技术的新基因为一编码人的新的skm-BOP的蛋白，定名为人肌肉BOP蛋白41，推测其并具有与skm-BOP相似的生物学功能。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——人肌肉BOP蛋白41以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人肌肉BOP蛋白41的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人肌肉BOP蛋白41的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人肌肉BOP蛋白41的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人肌肉BOP蛋白41的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——人肌肉BOP蛋白41的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人肌肉BOP蛋白41异常相关的疾病的方法。在本专利技术的第一方面，提供新颖的分离出的人肌肉BOP蛋白41，该多肽是人源的，它包含具有<210>2氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物、类似物。较佳地，该多肽是具有<210>2氨基酸序列的多肽。在本专利技术的第二方面，提供编码分离的这些多肽的多核苷酸，该多核苷酸包含一核苷酸序列，该核苷酸序列与选自下组的一种核苷酸序列有至少87％相同性(a)编码上述人肌肉BOP蛋白41的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。较佳地，该多核苷酸编码具有<210>2所示氨基酸序列的多肽。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有<210>1中246-1355位的序列；和(b)具有<210>1中1-1567位的序列。在本专利技术的第三方面，提供了含有上述多核苷酸的载体，以及被该载体转化或转导的宿主细胞或者被上述多核苷酸直接转化或转导的宿主细胞。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。如本专利技术所用，“分离的”是指物质从其原始环境中分离出来(如果是天然的物质，原始环境即是天然环境)。如活体细胞内的天然状态下的多聚核苷酸和多肽是没有分离纯化的，但同样的多聚核苷酸或多肽如从天然状态中同存在的其他物质中分开，则为分离纯化的。如本文所用，“分离的人肌肉BOP蛋白41”是指人肌肉BOP蛋白41基本上不含天然与其相关的其它蛋白、脂类、糖类或其它物质。本领域的技术人员能用标准的蛋白质纯化技术纯化人肌肉BOP蛋白41。基本上纯的多肽在非还原聚丙烯酰胺凝胶上能产生单一的主带。人肌肉BOP蛋白41多肽的纯度能用氨基酸序列分析。本专利技术提供了一种多肽——人肌肉BOP蛋白41，其基本上是由<210>2所示的氨基酸序列组成的。本专利技术的多肽可以是重组多肽、天然多肽、合成多肽，优选重组多肽。本专利技术的多肽可以是天然纯化的产物，或是化学合成的产物，或使用重组技术从原核或真核宿主(例如，细菌、酵母、高等植物、昆虫和哺乳动物细胞)中产生。根据重组生产方案所用的宿主，本专利技术的多肽可以是糖基化的，或可以是非糖基化的。本专利技术的多肽还可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基。本专利技术还包括人肌肉BOP蛋白41的片段、衍生物和类似物。如本专利技术所用，术语“片段”、“衍生物”和“类似物”是指基本上保持本专利技术的人肌肉BOP蛋白41相同的生物学功能或活性的多肽。本专利技术多肽的片段、衍生物或类似物可以是(I)这样一种，其中一个或多个氨基酸残基被保守或非保守氨基酸残基(优选的是保守氨基酸残基)取代，并且取代的氨基酸可以是也可以不是由遗传密码子编码的；或者(II)这样一种，其中一个或多个氨基酸残基上的某个基团被其它基团取代包含取代基；或者(III)这样一种，其中成熟多肽与另一种化合物(比如延长多肽半衰期的化合物，例如聚乙二醇)融合；或者(IV)这样一种，其中附加的氨基酸序列融合进成熟多肽而形成的多肽序列(如前导序列或分泌序列或用来纯化此多肽的序列或蛋白原序列)通过本文的阐述，这样的片段、衍生物和类似物被认为在本领域技术人员的知识范围之内。本专利技术提供了分离的核酸(多核苷酸)，基本由编码具有<210>2氨基酸序列的多肽的多核苷酸组成。本专利技术的多核苷酸序列包括<210>1的核苷酸序列。本专利技术的多核苷酸是从人胎脑组织的cDNA文库中发现的。它包含的多核苷酸序列全长为1567个碱基，其开放读框(246--1355)编码了369个氨基酸。根据氨基酸序列同源比较发现，此多肽与skm-BOP有34％的同源性，可推断出该新的人肌肉BOP蛋白41具skm-BOP相似的结构和功能。本专利技术的多核苷酸可以是DNA形式或是RNA形式。DNA形式包括cDNA、基因组DNA或人工合成的DNA。DNA可以是单链的或是双链的。DNA可以是编码链或非编码链。编码成熟多肽的编码区序列可以与&本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人肌肉ＢＯＰ蛋白４１，其特征在于它包含有：〈２１０〉２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]